《水樣的微生物檢測》ppt課件-預覽頁
【正文】 必須在采樣時對樣品加以保護。 水樣的采集和保存方法 ? 水樣的過濾和離心 ? 需要進行微生物檢測的樣品 ? 不能進行過濾和離心 水樣的采集和保存方法 ? 3 水樣的管理 ? 水樣的標簽設計 水樣采集后，往往根據(jù)不同的分析要求，分裝成數(shù)份，并分別加入保存劑。 水樣的采集和保存方法 ? 水樣的運送 裝有水樣的容器必須加以妥善的保護和密封，并裝在包裝箱內固定，以防在運輸途中破損，包括材料和運輸水樣的條件都應嚴格要求。 水樣中細菌學項目檢測方法 GB/T 1 菌落總數(shù) 1 平皿計數(shù)法 2 總大腸菌群 1 多管發(fā)酵法 2 濾膜法 3 酶底物法 3 耐熱大腸菌群 1 多管發(fā)酵法 2 濾膜法 4大腸埃希氏菌 1 多管發(fā)酵法 2 濾膜法 3 酶底物法 菌落總數(shù)的檢驗 ? 方法：平皿計數(shù)法 ? 范圍 此方法規(guī)定了生活飲用水及其水源水中細菌總數(shù)的測定方法 此方法適用于測定生活飲用水及其水源水中的細菌總數(shù) 細菌總數(shù)的檢驗 ? 檢驗步驟： ? 1 生活飲用水 以無菌操作方法用滅菌吸管吸取 1ml充分混勻的水樣，注入滅菌平皿中，傾注約 15ml已融化并冷卻到 45℃ 左右的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，并立即旋搖平皿，使水樣與培養(yǎng)基充分混勻。 吸取 1： 10稀釋液 1ml注入盛有 9ml滅菌水的試管中，混勻成 1： 100稀釋液。以下操作同生活飲用水的檢驗步驟。 對已處理過的出廠自來水 ， 需經(jīng)常檢驗或每天檢驗一次的 ， 可直接種 5份 10mL雙料培養(yǎng)基 ， 每份接種 10mL水樣 。 1℃ 培養(yǎng)箱內 ， 培養(yǎng) 24177。 1℃ 培養(yǎng)箱內 ， 培養(yǎng) 18～ 24h，觀察菌落形態(tài) ， 挑取符合下列特征的菌落： 深紫黑色 ， 具有金屬光澤的菌落 紫黑色 ， 不帶或略帶金屬光澤的菌落 淡紫紅色 ， 中心較深的菌落 做革蘭氏染色 ， 鏡檢和證實試驗 。 ? 結果報告： ? 根據(jù)證實為總大腸菌群的管數(shù)，查 MPN檢索表。 ? 過濾水樣 ? 用無菌鑷子夾取滅菌濾膜邊緣部分，將粗糙面向上，貼放在已滅菌的濾床上，固定好 濾器，將 100mL水樣注入濾器中，打開濾器閥門，在 104Pa下抽濾 ? 培養(yǎng) ? 水樣濾完后，再抽氣約 5s，關上濾器閥門，取下濾器，用滅菌鑷子夾取濾膜邊緣部分，移放在品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基上，濾膜截留細菌面向上，濾膜應與培養(yǎng)基完全貼緊，兩者間不得留有氣泡，然后將平皿倒置，放入 37℃ 恒溫箱內培養(yǎng) 24h177。 ? 本法可同時檢測大腸埃希氏菌 。耐熱大腸菌群在此培養(yǎng)基上菌落為藍色，非耐熱大腸菌群菌落為灰色至奶油色。 ? 檢驗步驟： ? 總大腸菌群乳糖發(fā)酵試驗陽性管 EC－ MUG管中， ℃ 培養(yǎng)24h 366nm波長 6W的紫外燈照射 ? 產(chǎn)生藍色熒光 陽性 ? 計算 ECMUG的管數(shù)，查 MPN表 ? 耐熱大腸菌群 2 ? 濾膜法： ? 用濾膜法檢測水樣后，將總大腸菌群陽性的濾膜在含有熒光底物的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，能產(chǎn)生 β葡萄糖醛酸酶，分解熒光底物釋放出熒光產(chǎn)物，使菌落能夠在紫外光下產(chǎn)生特征性熒光。
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