吸附層析ppt課件(2)(參考版)
2025-05-15 02:01本頁面
【正文】 。 薄層層析的其它操作方法與紙層析薄層層析的其它操作方法與紙層析類似：點(diǎn)樣、展開、顯色、定性與類似：點(diǎn)樣、展開、顯色、定性與定量分析。 推鋪法：、推鋪法： 在一根玻璃棒的兩端適當(dāng)距離處分別繞幾在一根玻璃棒的兩端適當(dāng)距離處分別繞幾圈膠布條，膠布條的圈數(shù)視所需薄層層析厚度圈膠布條，膠布條的圈數(shù)視所需薄層層析厚度而定，然后把準(zhǔn)備好的支持劑倒在玻璃板上的而定，然后把準(zhǔn)備好的支持劑倒在玻璃板上的一端，用玻璃棒壓在玻璃板上，將支持劑均勻一端，用玻璃棒壓在玻璃板上，將支持劑均勻地向另一個(gè)方向推動，而成為一薄層。 傾斜涂布法（傾淌法）、傾斜涂布法（傾淌法） ：： 將調(diào)好的支持劑漿液倒在玻璃板上，然后將玻璃板將調(diào)好的支持劑漿液倒在玻璃板上，然后將玻璃板前后左右傾斜，使支持劑漫布于整塊玻璃板上而形成前后左右傾斜，使支持劑漫布于整塊玻璃板上而形成薄層。 噴涂法：、噴涂法： 用噴霧器將調(diào)好的漿液噴在玻璃板上，形成薄層。 薄層板常用的制作方法有：薄層板常用的制作方法有： 浸涂法：、浸涂法： 將玻璃板在調(diào)好的支持劑漿液中浸一下，使?jié){液將玻璃板在調(diào)好的支持劑漿液中浸一下，使?jié){液在玻璃板上形成薄層。所用玻璃板要求表面平整、光滑，用前應(yīng)洗凈、干燥。薄層層析常用的基質(zhì)與紙層析比薄層層析多一步薄層板的制作：與紙層析比薄層層析多一步薄層板的制作： 將支持劑均勻地涂布在玻璃板上而成薄層板。? 這種層析方法是把吸附劑等物質(zhì)涂布于載體上形成薄層，然后按紙層析操作進(jìn)行展層。? 其基本原理和柱層祈、紙層折比較相近。chromatography,TLC? 薄層層析 (thinlayer圖 X—100 等去污劑處理后，會產(chǎn)生分子量不同的蛋白質(zhì)亞基。 天然的雙鏈 (ds)和熱變性單鏈 (ss)小牛胸腺DNA在 HTP層析柱的分離圖譜2.純化生命物質(zhì)四、應(yīng)用圖 易和所需要的成分分開。粘度小? ⑤ 能較完全洗脫下所分離的成分? ④ 穩(wěn)定性好? ③ 純度較高? ② 硅膠三、洗脫劑合適的洗脫劑應(yīng)符合下列條件 ：? ① 吸附劑的性質(zhì)圖 一、基本原理 吸附劑的表面存在著許多隨機(jī)分布的吸附位點(diǎn)。吸附柱層析? 吸附柱層析是以固體吸附劑為固定相，以有機(jī)溶劑或緩沖液為流動相構(gòu)成柱狀的一種層析方法。chromatography)第一節(jié) 色譜分析的局限性● 對分析對象的鑒定功能較差● 單次分析周期可能較長 ？● 濃度檢測靈敏度可能較低 ？● 儀器及費(fèi)用也許較貴● 實(shí)驗(yàn)影響因素較多，需要有較高的專業(yè)知識第三章 特殊的分離問題，如球烯化合物、生物大分子等分離不能簡單地套用小分子化合物的色譜方法。 學(xué)習(xí)色譜分析時(shí)，應(yīng)注意如下幾個(gè)問題 ：（ 1）色譜儀并不是色譜柱和檢測器的簡單堆積，柱外效應(yīng)是決定峰展寬的另一重要因素，是決定整個(gè)色譜系統(tǒng)連接的合理性的依據(jù)。（ 2）試液是否處理得當(dāng)，是色譜分析又一個(gè)關(guān)鍵因素。試樣用量少 色譜分析的應(yīng)用面廣 , 但它不是萬能的。(7) (6)(3)高靈敏度 ：多種高靈敏檢測器，痕量雜質(zhì)分析的有力工具。 （色譜的熱力學(xué)性質(zhì)） (2)tR/sec苯 環(huán)己烷圖 苯和環(huán)己烷氣相色譜圖50cm(id) ， 5%丁二酸乙二醇聚酯 /Celite載體（100120目），柱溫 90℃色譜分析的特點(diǎn)(1)30201510苯和 環(huán)己烷的 bp僅差 ℃，如用分離柱進(jìn)行分離是不可能的。*從分離科學(xué)角度分析， 色譜法、電泳法和質(zhì)譜法有哪些異同點(diǎn)？◆ 色譜法與分餾法的比較 色譜分離比分餾快，得到的物質(zhì)純度比分離法高。 ◆ 色譜法與光譜、質(zhì)譜分析法 *的比較 光譜、質(zhì)譜主要是定性分析工具 , 色譜是分離分析的工具。 定性能力？（未知樣品）216。l定性 混合試樣中的最低組分?jǐn)?shù) l l色譜圖提供的分析信息l同一種檢測器對不同類型物質(zhì)有不同的響應(yīng)值 色譜圖是色譜分析的主要技術(shù)資料。（ 2） 定量校正因子的測定l 影響色譜峰大小的因素a） 峰高可以定量嗎？為什么？b) 對于同一樣品中的 A和 B兩個(gè)組分，能否直接用峰大小判斷它們的含量大
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