【正文】 因此對蛋白質(zhì)的沉淀一般要求低溫條件。此法沉淀蛋白質(zhì)的選擇性較高，且不需脫鹽，但溫度高時可引起蛋白質(zhì)變性，故應(yīng)注意低溫條件。通常單價離子的中性鹽 (NaCl)比二價離子的中性鹽 [(NH4)2SO4]對蛋白質(zhì)溶解度的影響要小。鹽析沉淀的蛋白質(zhì)一般保持著天然構(gòu)象而不變性。 11 2)鹽析沉淀 中性鹽對蛋白質(zhì)膠體的穩(wěn)定性有顯著的影響。 1)等電點沉淀蛋白質(zhì)在等電點時溶解度最小。 利用蛋白質(zhì)溶解度的差異是分離蛋白質(zhì)的常用方法之一。 （ 4）、要選用無毒，不易燃燒的價廉易得的溶劑。 （ 2）、選用的溶劑，在萃取后，溶質(zhì)與溶劑要容易分離與回收。也可用檸檬酸、氨基三乙酸、 EDTA 等絡(luò)合物進行處理。 50. 樹脂的再生（或稱活化） ？ 所謂樹脂的再生就是讓使用過的樹脂重新獲得使用性能的處理過程，樹脂的再生反應(yīng)是交換吸附的逆反應(yīng)。 46. 生物分離技術(shù)的基本涵義及內(nèi)容 ？ 基本涵義：生物分離技術(shù)是指從動植物與微生物的有機體或器官、生物工程產(chǎn)物（發(fā)酵液、培養(yǎng)液）及其生物化學(xué)產(chǎn)品中提取、分離、純化有用物質(zhì)的技術(shù)過 程。 （ 3）、對生物分子的變性作用小。 借助新型的分離技術(shù) 除去有害人類健康的物質(zhì) 采用利于保持目標(biāo)產(chǎn)物產(chǎn)品質(zhì)量的操作條件 42. 沉析溶劑選擇主要應(yīng)考慮以下因素。 40. 生物分離技術(shù)的特點 ？ 產(chǎn)物的快速分離純化。 25. 膜分離技術(shù)的類型和定義 ？ 答： 膜分離過程的實質(zhì)是物質(zhì)透過或被截留于膜的過程，近似于篩分過程，依據(jù)濾膜孔徑大小而達到物質(zhì)分離的目的，故而可以按分離粒子大小進行分類： （ 1）微濾：以多孔細小薄膜為過濾介質(zhì)，壓力為推動力，使不溶性物質(zhì)得以分離的操作，孔 徑 分布范圍在~14μm 之間； （ 2）超濾：分離介質(zhì)同上，但孔徑更小，為 ~ μm，分離推動力仍為壓力差，適合于分離酶、蛋白質(zhì)等生物大分子物質(zhì)； （ 3）反滲透：是一種以壓力差為推動力，從溶液中分離出溶劑的膜分離操作，孔徑范圍在 ~ μm之間；（由于分離的溶劑分子往往很小，不能忽略滲透壓的作用，故而成為反滲透）； （ 4）納濾：以壓力差為推動力，從溶液中分離 300~1000 小分子量的膜分離過程，孔徑分布在平均 2nm； （ 5）電滲析：以電位差為推動力，利用離子交換膜的選擇 透過性，從溶液中脫除或富集 電解質(zhì)的膜分離操作； 10 28. 鹽析的原理及影響因素 ？ 親水性大于蛋白質(zhì)破壞水化層 帶電離子中和蛋白質(zhì)表面電荷 影響因素：（ 1）鹽離子濃度（ 2）生物分子種類（ 3）生物分子濃度（ 4） pH 值（五）溫度 29. 影響有機溶劑沉析的因素 ？ （ 1）溫度（ 2）生物樣品的濃度（ 3） pH（ 4）離子強度（ 5）金屬離子 30. 等電點沉析注意事項 ？ （ 1）等電點的改變（ 2）目的物的穩(wěn)定性（ 3） 鹽溶作用（ 4） pH 的調(diào)節(jié) 36. 氣相色譜的條件選擇 ？ 固定相的選擇 載氣流速的選擇 柱溫的選擇 進樣量與進樣時間的影響 色譜柱形、柱內(nèi)徑及柱長的選擇 37. 影響電泳分離的主要因素？ 大分子的性質(zhì) 電場強度 溶液的 pH 溶液的離子強度 電滲 溫度 支持物的影響 39. 生物分離的基本原理 ？ 主要是依據(jù)離心力、分子大?。êY分）、濃度差、壓力差、電荷效應(yīng)、吸附作用、靜電作用、親和作用、疏水作用、溶解度、平衡分離等原理對原料或產(chǎn)物進行分離、純化。 原理： （ 1）降低了溶質(zhì)的介電常數(shù)，使溶質(zhì)之間的靜電引力增加，從而出現(xiàn)聚集現(xiàn)象，導(dǎo)致沉淀。從而范德華引力起主導(dǎo)作用，聚合成較大的膠粒，粒子的密度越大，越易分離。 ? 答 : 產(chǎn)品豐富：產(chǎn)品的多樣性導(dǎo)致分離方法的多樣性 絕大多數(shù)生物分離方法來源于化學(xué)分離 生物分離一般比化工分離難度大（ 1）成分復(fù)雜（ 2）懸液中的目標(biāo)產(chǎn)物濃度低（ 3） 生物活性，條件相對溫和（ 4）生物產(chǎn)品要求高質(zhì)量（ 5）獲得高純度的干燥產(chǎn)品（ 6）衛(wèi)生 ？ 答：凝聚和絮凝 —— 在電介質(zhì)作用下，破壞溶質(zhì)膠體顆粒表面的雙電層，破壞膠體系統(tǒng)的分散狀態(tài)，使膠體粒子聚集的過程。親和吸附劑的組成包括：惰性載體、手臂鏈、特異性親和配基。而在臨界點附近，微小的壓力下降或溫度上升，則溶劑的密度大幅度減少，對溶質(zhì)的溶解度將大幅減少，有利于溶質(zhì)的分離和溶劑的回收。（ 2 分） SCCO2 萃取的優(yōu)點 ？ 答 :原理：溶質(zhì)在超臨界流體中的溶解度，與其密度有關(guān)，密度越大，溶解度越大。（ 3 分） 9 （ 2）膜污染是可以預(yù)防或減輕的，措施包括料液預(yù)處理、膜性質(zhì)的改善、操作條件改變等方式。這樣，分子量不同的溶質(zhì)分子得以分離。其特點是安全、無毒、產(chǎn)品分離簡單，但設(shè)備投資較大。 （ 4）化學(xué)反應(yīng)結(jié)晶 加入反應(yīng)劑產(chǎn)生新物質(zhì)，當(dāng)該新物質(zhì)的溶解度超過飽和溶解度時，即有晶體析出； ？ 答：物理處理：水洗、過篩，去雜，以獲得粒度均勻的樹脂顆粒； 化學(xué)處理：轉(zhuǎn)型（氫型或鈉型） 陽離子樹脂 酸 — 堿 — 酸 陰離子樹脂 堿 — 酸 — 堿 最后以去離子水或緩沖液平衡 ？ 答 :蛋白質(zhì)再等電點下的溶解度最低，根據(jù)這一性質(zhì)，再溶液中加入一定比例的有機溶劑，破壞蛋白質(zhì)表面的水化層和雙電層， 降低分子間斥力，加強了蛋白質(zhì)分子間的疏水相互作用，使得蛋白質(zhì)分子得以聚集成團沉淀下來。 對離子交換樹脂離子型的選擇：根據(jù)分離的目的，弱酸或弱堿性樹脂不使用 H 或 OH 型。 6． 在離子交換色譜操作中，怎樣選擇離子交換樹脂？ 答： 對陰陽離子交換樹脂的選擇：正電荷選擇陽離子交換樹脂，負電荷選擇陰離子 交換樹脂。 5． 簡述軟水和無鹽水的制備方法 ？ 答：①軟水的制備：利用鈉型磺酸樹脂除去水中的鈣離子和鎂離子等堿金屬后即可制得軟水。 3． 在色譜操作過程中為什么要進行平衡？ 答： 流速平衡：流速是柱層析操作當(dāng)中的主要影響因素，流速的快慢直接影響著分離的效果，流速過快，混合物得不到完全的分離，流速過慢，整體分離的時間要延長，因此在分離前首先要確定留宿。 （ 飽和溶液冷卻 ）、（ 部分溶劑蒸發(fā) ） 、（解析） 和（ 化學(xué)反應(yīng)結(jié)晶 ）。 （ 離心沉降 ）和（ 離心過濾 ） 兩大類； ，可將吸附分為 （ 物理 ） 、 （ 化學(xué) ） 、 （ 極性 ） 和（ 交換 ） 吸附； （ 動態(tài) ）和（ 靜態(tài) ） 兩種； ，在溶液中呈穩(wěn)定的分散狀態(tài)，其原因是由于 （ 分子表面電荷 ） 和（ 水化層 ） ； （ 鹽析作用強 ）、（ 溶解度大 ） 、（ 生物學(xué)惰性 ）和（ 來源豐富、經(jīng)濟 ） 等幾個方面的因素； （ 溫度 ）、（ pH）、（ 樣品濃度 ）、（ 中性鹽濃度 ）和（ 金屬離子 ）。 （ 共聚（加聚） ）和（ 均聚（縮聚） ） 兩大類； ，色譜法可分為 （ 吸附色譜 ） ，（ 離子交換色譜 ），（ 凝膠色譜 ） ，（分配色譜） 和（ 親和色譜 ）。 ，工業(yè)上常用的起晶方法有 （ 自然起晶法 ），（ 刺激起晶法 ）和（ 晶種起晶法 ）。 18. 影響吸附的主要因素有 （ 吸附劑的 性質(zhì) ），（ 吸附質(zhì)的性質(zhì) ） ，（ 溫度 ），（ 溶液 pH 值 ） ，（鹽濃度） 和（ 吸附物濃度和吸附劑用量 ）。 16． 膜分離過程中所使用的膜，依據(jù)其膜特性（孔徑）不同可分為 （ 微濾膜 ） ，（ 超濾膜 ），