【正文】 36. 氣相色譜的條件選擇？固定相的選擇載氣流速的選擇柱溫的選擇進樣量與進樣時間的影響色譜柱形、柱內(nèi)徑及柱長的選擇37. 影響電泳分離的主要因素？大分子的性質(zhì)電場強度溶液的pH 溶液的離子強度 電滲溫度支持物的影響38. 提高晶體質(zhì)量的方法有哪些？（1）晶體大小的控制（2）晶體形狀的控制（3）晶體純度的控制（4）晶體結(jié)塊的控制39. 生物分離的基本原理？主要是依據(jù)離心力、分子大?。êY分）、濃度差、壓力差、電荷效應(yīng)、吸附作用、靜電作用、親和作用、疏水作用、溶解度、平衡分離等原理對原料或產(chǎn)物進行分離、純化。盡管在水溶液中蛋白質(zhì)（酶）具有將疏水性基團折疊在分子內(nèi)部而表面顯露極性和荷電基團的趨勢，但總會有一些疏水性基團或極性基團的疏水部位暴露在蛋白質(zhì)（酶）表面。另一些影響因素如實驗中的離子強度、pH值等主要影響樣品中組分和離子交換劑的帶電性質(zhì)。通常所說的離子交換劑的交換容量是指離子交換劑所能提供交換離子的總量，又稱為總交換容量，它只和離子交換劑本身的性質(zhì)有關(guān)。此外還用于不適合用柱進行操作的離子交換分離，如溶液粘度太大、含有懸浮固體及在反應(yīng)時放出氣體會造成溝流或堵塞管柱；或者是含有碳酸鹽、亞硫酸鹽、硫化物的溶液與氫型陽離子柱交換時；以及某些交換速度較慢、交換要求在一步完成的等條件下，還是可以采用的。當(dāng)K值較小時，可以適當(dāng)增加有機溶劑用量來提高萃取率，但有機溶劑用量增加會增加后處理的工作量，因此在實際工作中，常常采取分次加入溶劑，連續(xù)多次提取來提高萃取率。27. 影響有機溶劑萃取分離的因素？影響液一液萃取的因素主要有目的物在兩相的分配比（分配系數(shù)K）和有機溶劑的用量等。（2）不同的培養(yǎng)基組分和用量也會影響?zhàn)ざ?，如用黃豆餅粉、花生餅粉作氮源，用淀粉作碳源會使黏度增大。（二）發(fā)酵液的黏度：液一固分離的速度通常與黏度成反比。對于酵母菌體，離心分離的方法具有較好的效果。（2）由于有機溶劑的水合作用，降低了自由水的濃度，降低了親水溶質(zhì)表面水化層的厚度，降低了親水性，導(dǎo)致脫水凝聚。因此，可作為酶固定化體系，用于水不溶性底物的生物催化？答：概念：在含有溶質(zhì)的水溶液中加入一定量親水的有機溶劑，降低溶質(zhì)的溶解度，使其沉淀析出。（2）生物大分子由于具有較強的極性，可溶解于極性水核中，防止與外界有機溶劑接觸，減少變性作用。從而范德華引力起主導(dǎo)作用，聚合成較大的膠粒，粒子的密度越大，越易分離。?答: 產(chǎn)品豐富：產(chǎn)品的多樣性導(dǎo)致分離方法的多樣性絕大多數(shù)生物分離方法來源于化學(xué)分離生物分離一般比化工分離難度大：（1）成分復(fù)雜，（2）懸液中的目標產(chǎn)物濃度低，（3）生物活性，條件相對溫和，（4）生物產(chǎn)品要求高質(zhì)量，（5）獲得高純度的干燥產(chǎn)品，（6）衛(wèi)生？答：凝聚和絮凝——在電介質(zhì)作用下，破壞溶質(zhì)膠體顆粒表面的雙電層，破壞膠體系統(tǒng)的分散狀態(tài)，使膠體粒子聚集的過程。親和吸附劑的組成包括：惰性載體、手臂鏈、特異性親和配基。層析介質(zhì)的制備過程包括：抗體的制備、抗體提取、載體活化，手臂鏈的連接、抗體的連接等步驟。而在臨界點附近，微小的壓力下降或溫度上升，則溶劑的密度大幅度減少，對溶質(zhì)的溶解度將大幅減少，有利于溶質(zhì)的分離和溶劑的回收。（2分）？答:原理：溶質(zhì)在超臨界流體中的溶解度，與其密度有關(guān)，密度越大，溶解度越大。（3分）（2）膜污染是可以預(yù)防或減輕的，措施包括料液預(yù)處理、膜性質(zhì)的改善、操作條件改變等方式。這樣，分子量不同的溶質(zhì)分子得以分離。？答：結(jié)晶過程包括過飽和溶液的形成、晶核的形成及晶體的生長三個過程，其中溶液達到過飽和狀態(tài)是結(jié)晶的前提，過飽和度是結(jié)晶的推動力。，并簡述其分離原理？答：超臨界流體萃取是利用超臨界流體具有的類似氣體的擴散系數(shù)，以及類似液體的密度（溶解能力強）的特點，利用超臨界流體為萃取劑進行的萃取單元操作。？答：（1）熱飽和溶液冷卻（等溶劑結(jié)晶），適用于溶解度隨溫度升高而增加的體系；同時，溶解度隨溫度變化的幅度要適中；（2）部分溶劑蒸發(fā)法（等溫結(jié)晶法），適用于溶解度隨溫度降低變化不大的體系，或隨溫度升高溶解度降低的體系；（3）真空蒸發(fā)冷卻法，使溶劑在真空下迅速蒸發(fā)，并結(jié)合絕熱冷卻，是結(jié)合冷卻和部分溶劑蒸發(fā)兩種方法的一種結(jié)晶方法。如果在溶液一側(cè)施加壓力，外界力做功使溶液中水的化學(xué)勢升高，則純水通過膜的滲透就會逐漸減小，并最終停止（條件？），此時的壓力差就是溶液的滲透壓。 ？答：滲透是由于存在化學(xué)勢存在梯度而引起的自發(fā)擴散現(xiàn)象。同時，樹脂內(nèi)部主要為疏水性，對親水性的蛋白質(zhì)會產(chǎn)生影響。7．簡述鹽析的原理及產(chǎn)生的現(xiàn)象？答：當(dāng)中性鹽加入蛋白質(zhì)分散體系時可能出現(xiàn)以下兩種情況：（1）“鹽溶”現(xiàn)象—低鹽濃度下，蛋白質(zhì)溶解度增大。對離子交換樹脂強弱的選擇：較強的酸性或堿性，選擇選用弱酸性或弱堿性樹脂。 ②無鹽水的制備：將原水通過氫型強酸性陽離子交換樹脂和羥型強堿或弱堿性陰離子交換樹脂的組合，經(jīng)過離子交換反應(yīng)，將水中所有的陰、陽離子除去，從而制得純度很高的無鹽純水。加鹽：依照質(zhì)量作用定律，把蛋白質(zhì)洗脫下來。4．以羧酸吸附蛋白質(zhì)為例，簡要說明離子交換樹脂的洗脫方法及其原理？答：加堿：主要是調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)到達等電點，是蛋白質(zhì)帶電量減少，吸附力下降從而被洗脫下來。3．在色譜操作過程中為什么要進行平衡？答：流速平衡：流速是柱層析操作當(dāng)中的主要影響因素，流速的快慢直接影響著分離的效果，流速過快，混合物得不到完全的分離，流速過慢，整體分離的時間要延長，因此在分離前首先要確定留宿。離子絡(luò)合萃取：①金屬離子在水相中形成絡(luò)合陰離子，萃取劑與氫離子結(jié)合形成陽離子，二者構(gòu)成離子締合體系進入有機相； ②金屬陽離子與中性鰲合劑結(jié)合成鰲合陽離子，再與水相中的陰離子構(gòu)成離子締合體系而進入有機相。酸性陽離子交換萃?。狠腿槿跛嵝杂袡C酸或酸性鰲合劑。以中型分子存在，不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。（凝膠色譜）的主要應(yīng)用是（脫鹽）和（分級分離），常用的膜可分為（對稱性膜）、（非對稱膜）和（復(fù)合膜）三類；（結(jié)晶）和（無定型）兩種狀態(tài)；（過飽和溶液的形成）；結(jié)晶的推動力是（溶液的過飽和度）；，晶體的生長包括（溶質(zhì)借擴散作用從溶液中轉(zhuǎn)移到晶體的表面）、（溶質(zhì)長入晶面放出結(jié)晶熱）和（結(jié)晶熱傳遞回到溶液中）三個過程；（雜質(zhì)）、（攪拌）、（過飽和度）和（溫度）。（結(jié)合水）和（非結(jié)合水）三種；，物料干燥可分為（恒速干燥階段）和（降速干燥階段） 兩個階段；－液萃取從機理上分析可分為（物理萃?。┖停ɑ瘜W(xué)萃取）兩類；（非極性）、（中等極性）和（極性）三種主要類型；（樹脂粒度）、（交聯(lián)度）、（溶液流速）、（溫度）、（離子的大?。?、（離子的化合價）和（離子濃度）。（過飽和溶液的形成）、（晶核的形成）和（晶體的生長）。（板框壓濾機）和（真空轉(zhuǎn)鼓過濾機）。（粘度（擴散系數(shù)）），與液體有相似的（密度）。，工業(yè)上常用的起晶方法有（自然起晶法），（刺激起晶法）和（晶種起晶法）。18. 影響吸附的主要因素有（吸附劑的性質(zhì)），（吸附質(zhì)的性質(zhì)） ，（溫度），（溶液pH值），（鹽濃度）和（吸附物濃度和吸附劑用量）。16．膜分離過程中所使用的膜，依據(jù)其膜特性（孔徑）不同可分為 （微濾膜） ，（超濾膜），（納濾膜）和（反滲透膜）。13．影響離子交換選擇性的因素有（離子化合價），（離子水化半徑），（溶液濃度），（離子強度），（溶液的pH值） ，（有機溶劑），（樹脂物理結(jié)構(gòu)）和（輔助力）。11．常用的化學(xué)細胞破碎方法有（滲透沖擊），（酶消化法），（增溶法），（脂溶法）和（堿處理法）。9．多糖基離子交換劑包括（葡聚糖離子交換劑）和（離子交換纖維素）兩大類。7．離子交換分離操作中，常用的洗脫方法有（pH梯度） 和（離子強度（鹽）梯度）。5．蛋白質(zhì)分離常用的色譜法有（凝膠色譜法） ，（多糖基離子交換色譜法），（高效液相色譜法）和（親和色譜法） 。3．陽離子交換樹脂按照活性基團分類，可分為（強酸型），（弱酸型）和（中等強度）；其典型的活性基團分別有（磺酸基團），（羧基），（磷酸基）。（ ∨ ）四、填空1．發(fā)酵液常用的固液分離方法有（ 離心 ）和（ 過濾 ）等。( )124．樹脂使用后不可再回收。（）122．若兩性物質(zhì)結(jié)合了較多陽離子（如Ca2+、Mg2+、Zn2+等），則等電點pH升高。（√ ）120．同一化合物用不同溶劑重結(jié)晶，其結(jié)晶的熔點可能有差距。（√）118．沉淀法、吸附法、萃取法、超濾法都是進行初步純化。 （√ ）116．蛋白質(zhì)類的生物大分子在鹽析過程中，最好在高溫下進行，因為溫度高會增加其溶解度。同類成分的極性大小主要取決于以下因素。（）112．氨基酸、蛋白質(zhì)、多肽、酶、核酸等兩性物質(zhì)可用等電點沉析。（）110．分配系數(shù)K與溶質(zhì)的濃度和相體積比無關(guān)，它主要取決于相系統(tǒng)的性質(zhì)、被萃取物質(zhì)的表面性質(zhì)和溫度。（√ ）108．細胞破碎技術(shù)是生物分離操作中必需的步驟。（）106．蛋白質(zhì)變性后溶解度降低，主要是因為電荷被中和及水膜被去除所引起的。（√ ）105．液一液萃取時，常發(fā)生乳化作用，使有機溶濟與水相分層困難。（）103．透析設(shè)備簡單、操作容易，可用于工業(yè)化生產(chǎn)（）104．有機溶劑（如胍、乙醇、尿素和異丙醇等）可以削弱疏水分子間的相互作用。（ √ ）101．中性多糖類藥物常用水作溶劑來提取，也可用水浸煮，也可以用冷水浸提。（ ）99．要增加目的物的溶解度，往往要在目的物等電點附近進行提取。可以促使生化物質(zhì)轉(zhuǎn)入有機相從而提高萃取率。（）95．丙酮，介電常數(shù)較低，沉析作用大于乙醇，所以在沉析時選用丙酮較好。（ ）93．凍結(jié)融化法凍結(jié)的作用是破壞細胞膜的疏水鍵結(jié)構(gòu)，增加其親水性和通透性來破壞細胞的。（√ ）91．采用溶劑提取法提取中草藥有效成分時，選擇溶劑的原則是“相似相溶原則”。（√ ）88．疏水柱層析可直接分離鹽析后或高鹽洗脫下來的蛋白質(zhì)、酶等生物大分子溶液（√ ）89．某結(jié)晶物質(zhì)經(jīng)硅膠薄層色譜，用一種展開劑展開，顯示單一斑點，所以該晶體為一單體。（√ ）86．鹽析反應(yīng)完全需要一定時間，一般硫酸銨全部加完后，應(yīng)放置30min以上才可進行固液分離。（ √ ）83．酸性、中性、堿性氨基酸在強堿性陰離子交換樹脂柱上的吸附順序是堿性氨基酸＞中性氨基酸＞酸性氨基酸（ ）84．等密度梯度離心適于分離大小相同密度不同的物質(zhì)。（√ ）81．可以用紙色譜的方法來選擇、設(shè)計液液萃取分離物質(zhì)的最佳方案。（ ）79．滲透壓沖擊是各種細胞破碎法中最為溫和的一種，適用于易于破碎的細胞，如動物細胞和革蘭氏陽性菌。（ ）77．在恒速干燥階段，過程速度由水分從物料內(nèi)部移動到表面的速度即內(nèi)擴散所控制。（√ ）75．在聚丙烯酰胺凝膠中加入陰離子去污劑十二烷基硫酸鈉（SDS），影響凝膠的形成。（ ）73．色譜分離技術(shù)中被檢測物質(zhì)的峰越寬越好。（√ ）71．在高濃度鹽溶液中疏水性相互作用減小。（ ）69．任何情況都優(yōu)先選擇較小孔隙的交換劑。（ ）67．吸附力較弱的組分，有較低的Rf值。（√ ）64．層析分離是一種化學(xué)的分離方法。（ ）62．如不慎樹脂失水，應(yīng)先用水浸泡。（√ ）60．對強酸性樹脂一般選擇氨水、甲醇及甲醇緩沖液等作洗脫劑。（ ）58．伯胺基在pH7的溶液中使用。（ ）56．離子交換速率總是取決于內(nèi)部擴散速率。（ ）54．用64%氯化鋅溶液處理透析袋，使大分子也能通過膜孔。（ ）52．等電點沉淀在實際操作中應(yīng)避免溶液pH上升至5以上。（√ ）50．有機溶劑沉析分辨能力比鹽析高。（√ ）48．丙酮沉析作用小于乙醇。（ ）46．在低鹽濃度時，鹽離子能增加生物分子表面電荷，使生物分子水合作用增強，具有促進溶解的作用。（√ ）44．鹽析是利用不同物質(zhì)在高濃度的鹽溶液中溶解度的差異，向溶液中加入一定量的中性鹽，使原溶解的物質(zhì)沉淀析出的分離技術(shù)。（√ ）42．不同高分子化合物的溶液相互混合可形成兩相或多相系統(tǒng)，如葡聚糖與聚乙二醇（PEG）按一定比例與水混合后，溶液先呈渾濁狀態(tài)，待靜置平衡后，逐漸分成互不相溶的兩相，下相富含PEG，上相富含葡聚糖。（√ ）40．離心是基于固體顆粒和周圍液體密度存在差異而實現(xiàn)分離的。（√ ）38．蛋白質(zhì)為兩性電解質(zhì)，改變pH可改變其荷電性質(zhì)，pH﹤pI蛋白質(zhì)帶負電。（√ ）36．蛋白質(zhì)為兩性電解質(zhì)，改變pH可改變其荷電性質(zhì)，pH﹥pI蛋白質(zhì)帶正電。（√ ）34．凍結(jié)的作用是破壞細胞膜的疏水鍵結(jié)構(gòu)，降低其親水性和通透性。（ ）32．高壓勻漿法可破碎高度分枝的微生物。（ ）30．重蒸餾法常為制備無鹽水的方法。（√ ）28．當(dāng)某一蛋白質(zhì)分子的酸性氨基酸殘基數(shù)目等于其堿性氨基酸殘基數(shù)目時。（√ ）26．蛋白質(zhì)變性后溶解度降低，主要是因為電荷被中和及水膜被去除所引起的。（ ）23．酸性、中性、堿性氨基酸在強堿性陰離子交換樹脂柱上的吸附順序是堿性氨基酸＞中性氨基酸＞酸性氨基酸（ ）24活性氧化鋁可分三種類型：堿性氧化鋁、中性和酸性氧化鋁。（ ）21．蛋白質(zhì)類的生物大分子在鹽析過程中，最好在高溫下進行，因為溫度高會增加其溶解度。（√）19．溶劑的極性從小到大為丙醇＞乙醇＞水＞乙酸。（ ）17．生物物質(zhì)中最常用的干燥方法是減壓干燥。（ ）15．應(yīng)用有機溶劑提取生化成分時，一般在較高溫度下進行。（ ）13．在生物制劑制備中，常用的緩沖系統(tǒng)有磷酸鹽緩沖液；碳酸鹽緩沖液；鹽酸鹽緩沖液；醋酸鹽緩沖液等。（√）11．用冷溶劑溶出固體材料中的物質(zhì)的方法又稱浸煮。（√）9．液膜能把兩個互溶但組成不同的溶液隔開。（）7．臨界壓力是液化氣體所需的壓力。（） 5．極性溶劑與非極性溶劑互溶。（√）3．珠磨法中適當(dāng)?shù)卦黾友心┑难b量可提高細胞破碎率。162．在選用凝膠層析柱時，為了提高分辨率，宜選用的層析柱是 （ A ）A、粗且長的 B、粗且短的 C、細且長的 D、細且短的