【正文】 某些苷類化合物，如甘草苷類也可用葡聚糖凝柱層析純化，提高總甘草苷類純度。主要用于大分子有效成分和有效部位的分離純化。如用 D101 樹脂柱層析純化黃芪甲苷，用乙醇洗脫，其純度可達(dá) 80% 以上；用 D101 或 LD601 樹脂柱層析純化人參皂苷，所得人參總皂苷純度可達(dá) 80% 以上。因此，大孔樹脂應(yīng)進(jìn)行預(yù)處理，洗去殘留物檢查合格后方可使用。在研制含有多糖中藥的注射劑時(shí)，如含黃芪的注射劑、含人參的注射劑，其中多糖采用聚酰胺柱層析，用水作洗脫劑，可將多糖中的蛋白質(zhì)、鞣質(zhì)等雜質(zhì)除去，大大提高了多糖的純度 , 人參多糖含量可達(dá) 75% ，黃芪多糖含量可達(dá) 65% 。利用上述性質(zhì)可采用不同溶劑吸附，不同溶劑或不同 pH 值溶劑洗脫，即可達(dá)到分離純化目的?！　【埘０罚猃?6 ）也是經(jīng)常使用的優(yōu)良吸附劑，優(yōu)點(diǎn)是性質(zhì)穩(wěn)定，無有害殘留物，可重復(fù)使用多次。在中藥粗提物的分離純化工藝中使用的吸附劑有活性炭、硅膠、氧化鋁、分子篩、凝膠聚酰胺、交聯(lián)聚維酮、大孔樹脂等。例如，在丹參注射液或丹紅注射液的制備工藝中，醇提后水沉?xí)r比較困難，用 ZTC1+1 天然澄清劑效果十分理想，在 4 ～ 6 小時(shí)內(nèi)即可澄清，對丹參酮、丹參酚類等有效成分幾乎無影響，而且可除去大部分鞣質(zhì)、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，藥液濃縮后再經(jīng)堿性醇沉淀處理則可完全除去鞣質(zhì)等雜質(zhì)，所得丹參或丹紅提取物（中間體）制備的注射液久置不會變色，也不會產(chǎn)生沉淀。如人參、遠(yuǎn)志藥材提取其皂苷時(shí)，加入稍過量的氨溶液，使 pH 在弱堿性可防止酸性皂苷的水解，又如在提取銀杏葉中的黃酮和內(nèi)酯時(shí)，加入適量的蛋氨酸并同時(shí)加入適量的枸櫞酸可阻止其白果內(nèi)酯的水解，使內(nèi)酯峰的比例與葉中天然比例基本一致。如烏頭總生物堿的提取，加入適量的鹽酸成鹽，可大大提高總生物堿的提取轉(zhuǎn)移率，又如用甘草提取甘草酸類，加入適量的氨水亦可大大提高甘草酸類的提取轉(zhuǎn)移率，再如由黃連藥材提取小檗堿，用 % 硫酸水溶液提取使提取轉(zhuǎn)移率高達(dá) 95% 。　　 2 、浸出輔助劑類輔料的選用　　有利于溶劑（主要是水或乙醇）將藥材中有效成分或有效部位提出，增加其提取轉(zhuǎn)移率的輔料稱為浸出輔助劑，是研制某些中藥注射劑必不可少的一類輔料，包括酸類，如鹽酸、硫酸、硝酸、磷酸、乙酸、檸檬酸、酒石酸、蘋果酸等；堿類，如濃氨溶液、氫氧化鈉、碳酸鈉、氫氧化鈣等；脫脂類，如石蠟、石油醚、乙醚、丙酮等?！　〉谝淮未汲恋玫降拇侄嗵?，干燥，溶解、冷藏、澄清或離心除去沉淀后，澄清濃縮后用葡聚糖凝膠柱層析或聚酰胺吸附、干燥，上柱，用水洗脫，洗脫液濃縮，再用乙醇沉淀，沉淀用無水乙醇浸洗 1 ～ 2 次，即得。使用的乙醇濃度，隨多糖的分子量而定，如黃芪多糖的分子量高，可使用 75 ～ 80% 乙醇沉淀，最后一次沉淀用無水乙醇浸洗 1 ～ 2 次即得。醇沉溶液含苷類和黃酮，可采用進(jìn)一步醇沉、丁醇萃取、聚酰胺柱層析等工藝進(jìn)一步分離純化。兩種溶劑分別提取，有利于人參總皂苷和人參多糖的進(jìn)一步分離純化，人參總皂苷和人參多糖的提取轉(zhuǎn)移率均可達(dá) 90% 以上。含多糖中藥材的提取，一般情況是用水作溶劑煎煮提取 2 ～ 3 次，但有時(shí)亦不盡然，當(dāng)含多糖的中藥還含有其他難以用水提出的有效成分或用較高濃度乙醇才能提出的有效成分或有效部位，則首先用適宜濃度的乙醇將醇溶性有效成分或有效部位提出后，再用水煎煮提取多糖?！　≡偃鐝难雍刂刑崛⊙雍乜偵飰A，是用 14% 氨水浸潤延胡素粉末，使生物堿鹽全部轉(zhuǎn)成堿基，然后用乙醚 乙醇（ 80:20 ）復(fù)合溶劑滲漉，回收溶劑后，干燥，所得粗生物再用乙醚回流，回收乙醚，干燥即得較純的總生物堿。　　 c. 粗提物經(jīng)醇沉純化，所得提取物（中間體）與紅參提取物（中間體）制得的人參四類注射劑不僅透明度佳，久置不沉淀，而藥理試驗(yàn)效果滿意，毒性很低?！　⒄諅鹘y(tǒng)的四逆湯提取方法，設(shè)計(jì)四逆提取液（中間體）如下：　　 a. 首先將干姜進(jìn)行水蒸氣蒸餾，制備芳香水，再重蒸餾，收取重蒸餾的芳香水備用；　　 b. 取附片、甘草、姜渣和重蒸餾后的芳香水殘液，用水煎煮提取 3 次，以附片總生物堿為衡量指標(biāo)，結(jié)果附子總生物堿提取轉(zhuǎn)移率可達(dá) 85% 左右?！　≡谘兄迫藚⑺哪孀⑸鋭r(shí)，其中四逆湯中含有附片、甘草、干姜三位藥材，其中附片是君藥，主要有效成分為附子總生物堿，包括烏頭堿（ Aconitine ）、次烏頭堿（ Hypaconitine ）、塔拉烏頭胺（ Talalisamine ）、新烏頭堿（ Mesaconitine ）等多種生物堿，是強(qiáng)心、升壓、抗心律失常、抗休克、抗心肌缺血、擴(kuò)張外周血管的主要有效成分。應(yīng)根據(jù)藥材藥用部位、所含生物存在的形式以及生物堿的溶解性，選擇適宜溶劑或同時(shí)使用浸出輔劑進(jìn)行提取。大多數(shù)生物堿呈堿性反應(yīng)，分子中的氮原子與氨分子中的氮原子一樣，有一對孤電子，對質(zhì)子有一定程度的親和力，當(dāng)與酸反應(yīng)中和后，氮原子可由三價(jià)轉(zhuǎn)為五價(jià)而成鹽；大多數(shù)生物堿不溶或難溶于水，但可溶于乙醇、乙醚、丙酮等有機(jī)溶劑，而生物堿鹽類則相反；在藥材中，大多數(shù)生物堿與有機(jī)酸結(jié)合成鹽的形式存在，少數(shù)與無機(jī)酸結(jié)合成鹽，有些生物堿堿性弱，以游離狀態(tài)存在，還有部分與糖結(jié)合成苷類的形式存在。因此，黃芩苷的提取可采用水煎煮提取 3 次，提取轉(zhuǎn)移率可達(dá) 90% 以上，然后采用酸堿處理，乙醇洗滌，得到的黃芩苷類提取物（中間體），以黃芩苷計(jì)，其純度可達(dá) 80% 以上。　　黃芩（ Scutellaria baicalensis Georgi ）的藥用部位為干燥根，主要有效成分為黃酮類化合物，主要以苷的形式存在，其抗菌消炎以黃芩苷（ Baicalin ）為主，其含量一般在 4 ～ 5% 。經(jīng)試驗(yàn)，用水煎煮提取 3 次，以總黃酮計(jì)，提取率可達(dá) 90% 以上，經(jīng)醇沉、丁醇萃取、聚酰胺吸附層析，所得淫羊藿提取物（中間體）總黃酮純度可達(dá) 30% 以上，用于制備注射液澄明度好，色度淺，久置不變色不析出沉淀；同時(shí)，用水煮者可同時(shí)將淫羊藿多糖提出，經(jīng)醇沉而可將黃酮與多糖分離，不但有利于后續(xù)對黃酮和多糖的純化，而且省時(shí)省事，降低成本?！　∫蜣剿幱貌课粸槿?，所含黃酮類有效成分以黃酮苷類形式存在，此外還含有多糖類有效成分，這些成分均溶于水?！　±?，開發(fā)含銀杏葉、淫羊霍、黃芩藥材的注射劑，盡管以上三位藥均含黃酮為主要有效成分，但使用的提取溶劑和提取工藝是不同的，分離純化工藝亦是不同的。一般講，游離苷元難溶或不溶于水，易溶于乙醇，因此，常用不同濃度的乙醇提取，黃酮苷類一般可溶于水也可溶于醇，可用水或不同濃度的乙醇提取，用水煎煮提取，亦將蛋白質(zhì)、糖類等水溶性雜質(zhì)一同提出，常用醇沉法、丁醇萃取法、聚酰胺柱層析法進(jìn)行分離純化；用乙醇回流提取，亦將樹脂、蠟質(zhì)、葉綠素、植物甾醇等脂溶性雜質(zhì)提出，常用水沉法、堿溶酸沉法、丁醇萃取法、聚酰胺吸附層析法、交聯(lián) PVP 吸附層析法等分離純化?！　∫陨蠈?shí)例表明，三種不同藥材雖然均含苷類有效成分，但不能采用同一的溶劑和工藝提取，應(yīng)進(jìn)行篩選試驗(yàn)，采用適宜的溶劑和工藝提取，采用適宜的分離純化工藝，使所得提取物（中間體）最大限度地保留有效成分，盡可能除去蛋白質(zhì)、鞣質(zhì)、樹脂等無效成分，盡可能提高中間體的純度，為注射劑的成型工藝奠定可靠的基礎(chǔ)。經(jīng)篩選試驗(yàn)，如用乙醇回流提取，得提取液固形物很高，脂溶性成分多，難以采用醇提水沉進(jìn)行分離純化，所得紅景天苷提取物（中間體）純度低，用此中間體制成的注射液，不但達(dá)不到檢測指標(biāo)成分占總固體的 25% ，而且放置后會產(chǎn)生沉淀；采用水提醇沉分離純化，雖然能將紅景天苷有效成分提出，但提取率低，僅在 60% 左右，而且醇沉分離純化困難，部分脂溶性成分難以除去，所得紅景天苷提取物純度低，制成的注射液與醇提水沉法相似，不符合要求。黃芪采用水煎煮 3 次，乙醇回流提取 3 次，以黃芪甲苷含量為考察依據(jù)，提取率均可達(dá)到 70% 以上，但水提醇沉?xí)r甲苷損失小，經(jīng) 3 次醇沉分離純化得黃芪苷提取物（中間體）純度高，制成的注射液非常澄明，久置不會產(chǎn)生沉淀，而醇提水沉?xí)r不但甲苷損失大，而且難以將脂溶性成分除盡，所得黃芪苷提取物（中間體）純度低，制成的注射液放置后會產(chǎn)生沉淀；同時(shí)，黃芪采用水提醇沉分離純化，不但可同時(shí)將黃芪皂苷類、黃芪黃酮類和多糖有效成分一并提出，經(jīng)醇沉可將多糖與前述兩類有效成分分離，有利于后續(xù)的純化，而且縮短了工藝時(shí)間，降低了物耗，降低了成本。如果人參采用水提取，提取率僅能達(dá)到 70% 左右，而且在醇沉分離純化時(shí)，當(dāng)人參多糖等成分沉淀時(shí)，包裹不少皂苷，所得人參多糖純度較低，含量僅為 60% 左右，色澤較深，為黃色或淺黃色，由于中間體色澤深，制的注射液色澤也較深。用水或不同濃度的乙醇提取要進(jìn)行實(shí)地的篩選試驗(yàn)，不僅要考慮提取率，還要考慮有利于下一步的分離純化，同時(shí)還要考慮藥材中除苷類有效成分外的其他有效成分，所選用的提取溶劑應(yīng)將其他有效成分