吸光光度法yongppt課件(參考版)
2025-05-09 18:14本頁(yè)面
【正文】 （ 3）由于溶液本身的化學(xué)反應(yīng)引起的偏離 溶液中的吸光物質(zhì)因 解離、絡(luò)合或締合 使?jié)舛劝l(fā)生改變，而使吸光度發(fā)生變化 所產(chǎn)生的偏離。 偏離原因：（ 1）非單色光引起的偏離 由于 單色器色散能力 的限制 和出口狹縫需 要保持一定的寬度， 所以目前各種分光光 度計(jì)得到的 入射光 ， 實(shí)際上都是具有某一 波段的 復(fù)合光 。mol1106(g) Fe(g/mol) 25 [Fe2+]= cFe=————— 朗伯 比爾定律的適用條件 1) 單色光 : 應(yīng)選用 ?max處或肩峰處測(cè)定 2) 吸光質(zhì)點(diǎn)形式不變： 離解、絡(luò)合、締合會(huì)破壞線性關(guān)系， 應(yīng)控制條件 (酸度、濃度、介質(zhì)等 ) 3) 稀溶液： 濃度增大，分子之間作用增強(qiáng) 37 [例如 ]已知含 Fe2+，用鄰二氮非顯色后形成 Fe(Phen)3 用 2cm比色皿在 λ508nm測(cè)得 A= ，求 ε=？ [解 ] μg ε105：超高靈敏； ε=(6～ 10） 104 ：高靈敏； ε2 104 ：不靈敏 。 εmax表明了該 吸收物質(zhì)最大限度的吸光能力 ， 也反映了光度法測(cè)定該物質(zhì)可能達(dá)到的最大靈敏度 。 在溫度和波長(zhǎng)等條件一定時(shí) ， ε僅與吸收物質(zhì)本身的性質(zhì)有關(guān) ， 與待測(cè)物濃度無(wú)關(guān)； ?3） 同一吸收物質(zhì)在不同波長(zhǎng)下的 ε值是不同的 。 S 的單位為： mg cm1 e 與吸光物質(zhì)的性質(zhì)、入射光波長(zhǎng) 及溫度等因素有關(guān)。L1 為單位時(shí)， K 用 e 表示； ? 得 A = e b c e 稱為摩爾吸收系數(shù) bcA ?e L 因此， Lambert — Beer 定律是進(jìn)行定量分析的理論基礎(chǔ)。 ④ 吸光度 A（ Absorbance）的定義： toIIA lg?TTA lg1lg ???0IIT t? T： 0 10% 100% A： ∞ 1 0 因?yàn)? 所以 26 ? 吸光度 A具有加和性 若溶液中含有多組分有色化合物 MR1, MR2, … … MRn 它們都會(huì)對(duì)同一波長(zhǎng)的光有吸收作用。 ?max =525 nm (綠色光 ) 22 *六、 光吸收的基本定律 朗伯 — 比爾 (Lambert— Beer)定律 ①光通過溶液的情況 : rtao IIII ???/Ia為吸收光強(qiáng)度 It為透過光強(qiáng)度 Ir為反射光強(qiáng)度 → ︱ ︱ ← 液層厚度 b 因?yàn)?
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