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吸光光度ppt課件(參考版)

2025-01-17 11:25本頁面
  

【正文】 。 可得絡(luò)合物的組成 ( 摩爾比 ) 。 ][L[ H L ] LHL ???? ??A 其他應(yīng)用 : 根據(jù)分布系數(shù)的概念 ][L[ H L ] LHL ???? ??A][H][H][HLHL ???????? ? aaa KcKKcA ??(4)假設(shè)高酸度時 , 弱酸全部以酸式形式存在 , 則 : AHL= εHLc (5)在低酸度時 , 弱酸全部以堿式形式存在 , 則 : AL= εLc ][H][H][H LHL???????? ?aaa KAKKAA光度法測定一元弱酸離解常數(shù)的基本公式 。 HL = H++L [ H L ]]] [ L[Ha???K(1) 配制一系列總濃度 (c)相等 , 而 pH不同的 HL溶液 (2) 測定各溶液的 pH值 。 食品分析 待測食品樣品 +生物試劑 → 特征顏色,比色分析。 臨床分析 ( 1)試樣 +載片 (不同層有分析所需試劑 )→ 出現(xiàn)特征顏色。 根據(jù)吸光度的加合性求解聯(lián)立方程組得出各組分的含量。 兩波長同時掃描即可獲得導數(shù)光譜。無需參比池。 將不同波長的兩束單色光 (λ λ 2) 快束交替通過同一吸收池而后到達檢測器。 示差吸光光度法 高含量組分的測定 示差法為什么能較準確地測定高濃度組分呢? 普通光度法 : cs: Ts = 10%, cx : Tx=5%, 示差法 : cs : Ts =100%, cx : Tr=50%, 透射比讀數(shù)標尺擴大了十倍 。 設(shè): 待測溶液濃度為 cx, 標準溶液濃度為 cs(cs cx)。 是否存在最佳讀數(shù)范圍?何值時誤差最??? dlg4 340d ? TTT.cc ??lg4 3 40? 吸光度測量的誤差 最佳讀數(shù)范圍與最佳值 : 設(shè): ΔT =1%, Δc/c ~T 關(guān)系曲線 T 在 15%~ 65% 之間時 , 濃度相對誤差較小, 最佳讀數(shù)范圍 : 濃度相對誤差最小時的透射比 Tmin為: Tmin= %, Amin= 控制測量吸光度大小的方法: ① 選擇不同寬度的比色皿 ② 改變測試溶液的濃度 ③ 改變?nèi)肷涔獠ㄩL 其他吸光光度法 ( 1) 目視比色法 ( 2) 特點 :不符合 LB定律 , 可測 102105 , 106108 : RE=510%, 光度法 25% , 操作簡便 、 快捷 。 使干擾離子生成無色配合物或無色離子 。 溶液中存在著離解、聚合、互變異構(gòu)、配合物的形成等化學平衡時,使吸光質(zhì)點的濃度發(fā)生變化。L1時,吸光質(zhì)點間可能發(fā)生締合等相互作用,直接影響了對光的吸收。L1)時才基本符合。 消除 : ( 1)選擇好的單色器; ( 2)選擇 λ max為測定波長; ( 3)吸光度讀數(shù)范圍 避免產(chǎn)生膠體和沉淀:由于反射和散射 , 形成 “ 假吸收 ” 。 討論: 選用譜帶 a的復(fù)合光進行測量 , 得到右圖的工 作曲線 , A與 c基本呈直線關(guān)系 。 (4) 為克服非單色光引起的偏離,首先 應(yīng)選擇比較好的單色器。 若濃度較高,即使| ? ε | 很小, A總 ≠A 1 ,且隨著 c值增大, A總 與 A 1的差異愈大,表現(xiàn)為 Ac曲線上部 (高濃度區(qū) )彎曲愈嚴重。 討論: (3) | ? ε | 很小時,即 ε 1≈ ε 2: 可近似認為是單色光。 非單色光作為入射光引起的偏離: 假設(shè)由波長為 λ1和 λ2的兩單色光 組成的入射光通過濃度為 c的溶液,則: A1= lg( I 01 /I t1 )= ε1 bc A2= lg(I 02 /I t2 )= ε2 bc 故: 式 中: I 0 I 0
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