【正文】 我感謝可以有這樣一個空間 ， 讓我對所有給予我關(guān)心、幫助的人說聲 “ 謝謝 ” ！ 今后 ， 我會繼續(xù)努力 ， 好好工作 ！ 好好學(xué)習(xí) ！ 好好生活 ??！ 呂龍 2020 年 5 月于重慶 ． 北碚 。 沒有你們 ， 就不會有今天的我 ！ 我一直感恩 ， 感恩于我可以擁有一個如此溫馨的家庭 ， 讓 我所有的一切都可以在你們這里得到理解與支持 ， 得到諒解和分擔(dān) 。 只是今后大家就難得再聚在一起吃每年元旦那頓飯了吧 ， 沒關(guān)系 ， 各奔前程 ， 大家珍重 。 四年了 ， 仿佛就在昨天 。而你開朗的個性和寬容的態(tài)度 ， 幫助我能夠很快的融入我們這個實驗室 。 感謝我的母校 — 西南大學(xué) 。 在這寶貴的 四 年生活中 ， 首先我要感謝我的導(dǎo)師 —— 杜木英 教授 。 參考文獻 [1] Rizzo DM, Slaughter GW. Root, disease and canopy gaps in deve1oped areas of Yosemite vally, California [J]. Forest Ecology and Mnaagement, 2020 (146): 159167. [2] 卯曉嵐 .中國經(jīng)濟真菌 [J].北京 :北京科學(xué)出版社 ,1998,135140. [3] 黃燕 ,羅強 ,胥成浩 等 .固體發(fā)酵蜜環(huán)菌多糖提取工藝 研究 [J].四川食品與發(fā)酵 ,2020. [4] 李福后 ,王偉霞 ,許冰 .蜜環(huán)茵的研究進展 [J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) ,2020,35(25):77417749. [5] 鄒容 ,康冀川 .蜜環(huán)菌研究進展 [J].山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報 ,2020,24(4):260264. [6] 王永強，何秀玲，靳遠祥 .家蠶蛋白質(zhì)組研究現(xiàn)狀與趨勢 [J].蠶業(yè)科學(xué) ,2020,32(4):541457． [7] PAZOSF, STERNBERGMJ. Automated prediction of protein function and detection of functional sites from structure[J]. Proe Natl Acad Sci USA, 2020, 10l(41): 1475414759. [8] 徐錦堂 ,冉硯珠 ,王孝文 .天麻種子發(fā)芽的營養(yǎng)來源及其與蜜環(huán)菌的關(guān) [J].中草 藥 ,1980,11(3): 125128． [9] 蘭進 ,徐錦堂 ,李京淑 .蜜環(huán)菌和天麻共生營養(yǎng)關(guān)系的放射性自顯影研究 [J].真菌學(xué)報 ,1994，13(3):219222． [10] 王 賀 ,許京秋 ,徐錦堂 .天麻大型細胞消化蜜環(huán)菌過程中溶酶體小泡的作用 [J].植物學(xué) 報 ,1992, 34(6):405049. [11] 王秋穎 ,郭順星 ,關(guān)鳳斌 .不同來源蜜環(huán)菌對天麻產(chǎn)量影響的研究 [J].中草 藥 ,2020,32(9): 838841． [12] 孫士青 ,陳貫紅 .不同蜜環(huán)菌對天麻生物產(chǎn)量及天麻素含量的影響 [J].山東科 學(xué) ,2020,16(2): 710． [13] 洪毅 ,沈業(yè)壽 ,樊葉楊等 .蜜環(huán)菌菌索多糖分離純化及其部分理化性質(zhì) [J].中國食 用菌 1998,18 (1):3840． [14] 李立恒 ,王 征 ,謝達平等 .蜜環(huán)菌深層發(fā)酵液多糖的分離純化和組成 [J].湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué) 報 , 16 2020,30(3):275277. [15] Rechman UR, Chirstopher F, Thurston. Puirifcation of Laccase, from Armillariella mellea [J]. Gen Microbio, 1992 (138): 1251. [16] 操玉平 ,于敏 .蜜環(huán)茵多糖的研究進展 [J].中國食用菌 ,2020,27(5):911. [17] 于敏 ,沈業(yè)壽 ,梅一德．蜜環(huán)菌多糖的免疫增強作用研究 [J].生物學(xué)雜志 ,2020,4150. [18] 陶文娟 ,沈業(yè)壽 .蜜環(huán)菌糖復(fù)合物的糖鏈降解及其對 d葡萄糖苷酶的抑制作用 [J].中國生物工程雜志 ,2020,286290. [19] 顧學(xué)裘等 .抗衰老、抗癌中藥的研究及展望 [J].中國醫(yī)藥科技出版 ,1989,2031. [20] 秦國夫 ,趙俊 ,田淑敏 等 .中國蜜環(huán)菌的新生物種 [J].菌物系統(tǒng) ,2020,19(4):509516． [21] 林志彬 ,章達敏 ,夏 冬 .蜜環(huán)菌多糖對小鼠免疫功能的影響 [J].中國藥理學(xué) 報 ,1988,4(2):93 96． [22] 臧金平 ,袁生 ,連賓 .蜜環(huán)菌的研究進展 [J].微量元素與健康研究 ,2020,3559. [23] 鐘仙龍 ,陳海燕 ,葉雅紅 ,蜜環(huán)菌產(chǎn)多糖培養(yǎng)條件優(yōu)化的研究進 展 [J].麗水學(xué)院學(xué)報 ,2020. [24] 張德春 .天麻有性繁殖最佳時間及條件和方法 [J]. 食用菌 ,2020,2. [25] Michel Dubois, Gilles KA, Hamilton JK, era1. Analytical chemistry colorimettic method for determination of sugars and related subctances[J]. Ana1. Chem. 1956, 23(3): 350. [26] 譚周進 ,謝達平 ,王 征 .蜜環(huán)菌胞外多糖的發(fā)酵條件研究 [J].微生物 報 ,2020,2. 17 致謝 ： 縉云 山依舊 ， 嘉陵 水長流 ！ 轉(zhuǎn)眼間 ， 我已在 縉云 山腳下的 西 南大學(xué)度過了 四 個年頭 。 蠶蛹粉是很好的有機氮源 ， 玉米 漿 在充當(dāng)?shù)次镔|(zhì)時 ， 由于其較大的淀粉顆粒 ， 在生長的開始階段不提供營養(yǎng)物質(zhì) ， 到了后期生長才提供營養(yǎng)物質(zhì) ， 所以使得蜜環(huán)菌在生長過程中都能有很好的營養(yǎng)保證 。糊精和紅薯粉組合有利于多糖的合成 ， 但糊精的糊化作用影響了蜜環(huán)菌的正常生長 ， 使得菌絲干重太低 ， 而紅薯粉的營養(yǎng)物質(zhì)豐富 ， 和其它碳源組合后沒有顯現(xiàn)優(yōu)勢 ， 可能是因為與其他碳源的比例不當(dāng) 。 (3)篩選最佳碳源組合 實驗中 ， 葡萄糖和蔗糖組合的菌絲干重最高 ， 多糖得率也好 ，多糖得率僅次于糊精和紅薯粉組合 。 比相關(guān)文獻記錄 15 的培養(yǎng)時間縮短了 13 天 ， 因此得出在本實驗條件 下，蜜環(huán)菌 M7 菌種的最適培養(yǎng)天數(shù)為 5 天， 提高了實驗效率 。 5 結(jié)論 (1)在本實驗條件培養(yǎng)下 ， 蜜環(huán)菌 M7 菌種 在菌絲干重和多糖得率兩方面優(yōu)于其它四種菌種 ， 有利于后期實驗對于蜜環(huán)菌多糖量的要求 ， 因此選擇蜜環(huán)菌 M7 菌種為最佳 培養(yǎng) 菌種 。 表 7 不同溫度對蜜環(huán)菌 M7 菌種的影響情況 Table 7 Different temperature on M7 strain effect of Armillaria 溫度 /℃ 22 24 26 28 30 菌絲干重 /g 多糖得率 /% 3 .549 由表 7 可知，隨著 培養(yǎng) 溫度的升高 ， 蜜環(huán)菌菌絲干重和菌絲得率均不斷增加 ， 但在26℃ 以后，繼續(xù)升溫，菌絲干重和多糖得率均呈現(xiàn)下降趨勢 。 發(fā)酵溫度的選擇 。 以花生粉和玉米粉 漿 組合為氮源培養(yǎng)蜜環(huán)菌M7 菌種時 ， 雖然其多糖得率最高 ， 但其菌絲干重太低 ， 多糖 合成 量較低 。 以最佳碳源組合為碳源 ， 以不同氮源組合作為氮源培養(yǎng)蜜環(huán)菌 M7 菌種 ， 培養(yǎng) 14 五天后分別測量菌種的菌絲干重和多糖 得率 ， 結(jié)果如表 6 所示 。 蠶蛹粉 +花生粉 菌球顏色為淺棕色 ， 菌球大 ， 癟扁 ， 突刺粗短 。 蠶蛹粉 +玉米粉 菌球白色 ， 無明顯突刺 ， 絨毛細而均勻 ， 多數(shù)菌球小個別菌球大 。 蠶蛹粉 +豆餅粉 菌球白色 ， 多數(shù)菌球小 ， 絨毛細 。 13 圖 3 不同氮源組合培養(yǎng)下蜜環(huán)菌菌球 Figure 3 Armillaria fungus ball of Different binations of nitrogen sources 表 5 不同 氮 源組合培養(yǎng)下蜜環(huán)菌菌絲顏色 、 形態(tài) 、 大小情況 Table 5 Armillaria hyphae’s color， shape and size of different bination of nitrogen sources 氮源組合 菌球顏色 、 形態(tài) 、 大小情況 花生粉 +豆餅粉 菌球白色 ， 多數(shù)菌球小 ， 絨毛細 。 在實驗過程中 ， 由于糊精作為碳源物質(zhì)時 ， 發(fā)生了明顯的糊化 反應(yīng) ， 影響實驗觀察 ， 因此 ， 選擇葡萄糖和蔗糖組合作為最佳碳源組合 ， 其在培養(yǎng)蜜環(huán)菌時多糖合成量也是最大的 。 其中 ， 在葡萄糖和蔗糖組合培養(yǎng)下 ， 菌絲干重最大 ， 葡萄糖和糊精組合次之 ；而多糖得率方面 ， 在糊精和紅薯粉組合培養(yǎng)下 ， 多糖得率 大于 其他組合 ， 但是其菌絲干重最小 ， 說明紅薯粉和糊精組合有利于蜜環(huán)菌 體內(nèi) 合成多糖 ， 但不利于其自身生長 。 以不同碳 源組合作為碳源培養(yǎng)蜜環(huán)菌 M7 菌種 ， 培養(yǎng)五天后分別測量菌種的菌絲干 重和 多糖 得率 ， 結(jié)果如表 4 所示 。 葡萄糖 + 糊精 菌球顏色為白色 ， 刺粗壯 ， 菌球較大 、 均勻 。 紅薯粉 +葡萄 糖 菌球顏色為白色 ， 有突起 ， 刺小且短 ， 菌球大小中等 。 11 圖 2 不同碳源組 合培養(yǎng)下蜜環(huán)菌菌球 Figure 2 Armillaria fungus ball of Different binations of carbon sources 12 表 3 不同碳源組合培養(yǎng)下蜜環(huán)菌菌絲顏色 、 形態(tài) 、 大小情況 Table 3 Armillaria hyphae’s color, shape and size of different bination of