第八章微生物遺傳(參考版)
2025-04-10 04:00本頁面
【正文】 9 / 9。宿主細(xì)胞應(yīng)該對人、畜、農(nóng)作物無害或無致病性等。對基因工程的建立與發(fā)展具有重要意義的幾項(xiàng)關(guān)鍵技術(shù)：DNA的特異切割；DNA的分子克?。ㄈ斯まD(zhuǎn)化方法的建立）；DNA的快速測序；DNA合成技術(shù)；聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）（DNA的體外擴(kuò)增）；DNA的定位誘變技術(shù)。特點(diǎn)：提純的噬菌體DNA以轉(zhuǎn)化的（而非感染）途徑進(jìn)入細(xì)胞并表達(dá)后產(chǎn)生完整的病毒顆粒。3．細(xì)菌的遺傳轉(zhuǎn)化（genetic transformation）同源或異源的游離DNA分子(質(zhì)粒和染色體DNA)被自然或人工感受態(tài)細(xì)胞攝取，并得到表達(dá)的水平方向的基因轉(zhuǎn)移過程自然遺傳轉(zhuǎn)化（natural genetic transformation）人工轉(zhuǎn)化（artificial transformation）進(jìn)行轉(zhuǎn)化必要的二方面條件：感受態(tài)的受體細(xì)胞:自然感受態(tài)的出現(xiàn)是細(xì)胞一定生長階段的生理特性，受細(xì)菌自身的基因控制； 人工感受態(tài)則是通過人為誘導(dǎo)的方法，使細(xì)胞具有攝取DNA的能力，或人為地將DNA導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)。2． 細(xì)菌的轉(zhuǎn)導(dǎo)（transduction）由噬菌體介導(dǎo)的細(xì)菌細(xì)胞間進(jìn)行遺傳交換的一種方式：一個細(xì)胞的DNA通過病毒載體的感染轉(zhuǎn)移到另一個細(xì)胞中。雜交Hfr菌株內(nèi)的F因子因不正常切割而脫離染色體時(shí)，形成游離的但攜帶一小段染色體基因的F因子，特稱為F′因子。雜交后的受體細(xì)胞(或接合子)大多數(shù)仍然是F175。細(xì)胞進(jìn)行接合。雜交（參見P 217）Hfr菌株的F因子插入到染色體DNA上，因此只要發(fā)生接合轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)移過程，就可以把部分甚至全部細(xì)菌染色體傳遞給F細(xì)胞并發(fā)生重組，由此而得名為高頻重組菌株。雜交的結(jié)果：給體細(xì)胞和受體細(xì)胞均成為F+細(xì)胞理化因子的處理可將F因子消除而使F+菌株變成F175。雜交F+菌株的F因子向F175。 細(xì)胞表面同樣有性菌毛。? Hfr菌株，F(xiàn)因子插入到染色體DNA上，細(xì)胞表面有性菌毛。F因子既可以脫離染色體在細(xì)胞內(nèi)獨(dú)立存在，也可插入（整合）到染色體上.F因子的四種細(xì)胞形式: ? F175。涉及一批修復(fù)基因及產(chǎn)物：recA（RecA，單鏈DNA的結(jié)合活性，以及由此而出的蛋白酶活性）lexA（LexA，調(diào)節(jié)蛋白，與操作子結(jié)合阻止基因的轉(zhuǎn)錄,可以被RecA –DNA切割成2個部分,此時(shí)無阻遏功能）uvrA（UvrA）uvrB（UvrB）uvrC（UvrC）RecA與DNA的結(jié)合能夠抑制DNA聚合酶III的3’5’外切酶活性,使DNA聚合酶順利通過損傷部位,以錯誤為代價(jià)的快速修復(fù)過程,導(dǎo)致突變而保存生命.七、細(xì)菌基因轉(zhuǎn)移和重組細(xì)菌的四種水平基因轉(zhuǎn)移形式接合：細(xì)胞與細(xì)胞的直接接觸（由F因子介導(dǎo)）轉(zhuǎn)導(dǎo)：由噬菌體介導(dǎo)轉(zhuǎn)化：游離DNA分子 + 感受態(tài)細(xì)胞原生質(zhì)體融合：細(xì)胞原生質(zhì)體融合1．細(xì)菌的接合作用(conjugation) 機(jī)制 (大腸桿菌的接合機(jī)制)接合作用是由一種被稱為F因子的質(zhì)粒介導(dǎo)，F(xiàn)因子的分子量通常為5107()，上面有編碼細(xì)菌產(chǎn)生性菌毛（sex pili）及控制接合過程進(jìn)行的20多個基因。DNA的嘧啶二聚體仍然需經(jīng)過其他的修復(fù)系統(tǒng)加以修復(fù)，或經(jīng)過細(xì)胞的分裂而稀釋。六、DNA損傷及其修復(fù)主要的四種類型：光復(fù)活作用；切除修復(fù)；重組修復(fù)； SOS修復(fù)光修復(fù)（光能）：光復(fù)活作用暗修復(fù)（ATP）：切除修復(fù)，重組修復(fù)，SOS修復(fù)1. 光復(fù)活作用：光解酶在黑暗中專一性識別嘧啶二聚體，并與之結(jié)合，形成酶DNA復(fù)合物，當(dāng)有光照時(shí)，酶利用光能將二聚體拆開，恢復(fù)原狀，酶再釋放出來2. 切除修復(fù)暗修復(fù)的一種，是細(xì)胞內(nèi)主要的 修復(fù)系統(tǒng)。(3) 回復(fù)突變(reverse mutation或back mutation)：突變體失去的野生型性狀，可以通過第二次突變得到恢復(fù)，這種第二次突變稱為回復(fù)突變。美國加利福尼亞大學(xué)的Bruce Ames教授于1966年發(fā)明，因此稱為Ames試驗(yàn)具體操作：檢測鼠傷寒沙門氏菌(Salmonella typhmurium)組氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株
化學(xué)相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1