【正文】 [基本內(nèi)容]一、真菌及其檢驗(yàn)的基本特征 1. 生物學(xué)性狀 2. 分類與致病 3. 微生物學(xué)檢查二、念珠菌和隱球菌及其他醫(yī)學(xué)上重要的酵母 1. 念珠菌 2. 隱球菌 3. 其他酵母三、二相性真菌及其他腐生性霉菌 1. 二相性真菌 2. 曲霉菌 3. 毛霉目霉菌四、皮膚真菌 1. 臨床意義 2. 真菌檢驗(yàn)27 / 27。曲霉菌：致病性。致病性，微生物學(xué)檢查。主要致病性真菌：皮膚絲狀菌：形態(tài)培養(yǎng)特性、致病性。[要點(diǎn)與基本要求]概述：生物學(xué)性狀，形態(tài)、結(jié)構(gòu)、培養(yǎng)、繁殖方式、抵抗力。[重點(diǎn)]熟悉真菌的主要生物學(xué)性狀。3．根據(jù)病史及典型的臨床表現(xiàn)即可診斷，不典型者可做病理學(xué)或免役組化檢查，以及PCR檢測(cè)，尚不能用組織細(xì)胞分離培養(yǎng)。五、人乳頭瘤病毒（HPV）1．屬乳多空病毒科，是二十面立體對(duì)稱裸病毒，雙股環(huán)狀DNA，有70多個(gè)型，具有干擾正常細(xì)胞癌抑制蛋白的功能。（2）用鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤進(jìn)行病毒培養(yǎng)，并用DIFA法檢查病毒抗原。3．感染動(dòng)物或人后，引起狂犬病，傷口越深、距頭部越近，潛伏期越短。4．病毒分離培養(yǎng)采用原代猴腎細(xì)胞培養(yǎng)后，轉(zhuǎn)種猴腎傳代細(xì)胞增殖。2．HRV是引起嬰幼兒急性胃腸炎的病原體，經(jīng)糞口傳播。三、輪狀病毒（RV）1．RV屬呼腸病毒科，為雙層衣殼，呈車輪狀外觀，核酸為雙股RNA，11個(gè)基因片段，根據(jù)VP6核心結(jié)構(gòu)蛋白的特異性將起分為A、B、C、D、E五個(gè)組。2．可引起多種血液病，HTLVI與成人T細(xì)胞白血病淋巴瘤、熱帶下肢痙攣性癱瘓及HTLVI相關(guān)的脊髓病等有關(guān)，HTLVII與毛細(xì)胞白血病及慢性T4細(xì)胞淋巴瘤等有關(guān)。（3）PCR是目前檢測(cè)HIV最敏感的方法，有助于HIV感染的早期診斷。通常是先經(jīng)過(guò)2~3次ELISA初篩，再用WB或IFA確證。主要有3個(gè)傳播途徑。[基本要點(diǎn)]一、人類免役缺陷病毒（HIV）1．主要生物學(xué)特性HIV為逆轉(zhuǎn)錄病毒，有獨(dú)特的三層結(jié)構(gòu)，核酸為兩條相同的單正股RNA，其復(fù)制與一般逆轉(zhuǎn)錄病毒相似，整合在細(xì)胞染色體中的前病毒可以非活化方式長(zhǎng)期潛伏于宿主細(xì)胞內(nèi)；該病毒只感染表面有CD4受體的細(xì)胞；HIV有兩型，HIVHIV2。[基本概念]1．內(nèi)基小體：狂犬病毒在易感動(dòng)物或人的中樞神經(jīng)細(xì)胞（主要是大腦海馬回的錐體細(xì)胞）中增殖，形成胞漿內(nèi)嗜酸性包涵體，稱內(nèi)基小體。方法主要有異嗜性抗體的檢測(cè)和特異性抗體檢測(cè)。（2）病毒分離可用不含病毒的胎兒B細(xì)胞分離培養(yǎng)，并用ACIF進(jìn)行鑒定。與EB病毒感染有關(guān)的疾病主要有傳染性單核細(xì)胞增多癥、非洲兒童惡性淋巴瘤和鼻咽癌。四、EB病毒1．EB病毒具有皰疹病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征；只能在人及部分靈長(zhǎng)類的B細(xì)胞內(nèi)或含EB病毒基因組的類淋巴母細(xì)胞中增殖；分為A、B兩個(gè)血清型；病毒表達(dá)抗原包括潛伏期表達(dá)抗原和增殖性感染相關(guān)抗原。（2）用人胚腎或人胚肺細(xì)胞進(jìn)行分離培養(yǎng)，接種物為病灶早期內(nèi)容物，用McAb進(jìn)行鑒定。帶狀皰疹僅發(fā)生于曾有水痘病史或隱性感染VZV的人，多見(jiàn)于成人和老人。三、水痘帶狀皰疹病毒（VZV）1．具有皰疹病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征，只有一個(gè)血清型，能在人二倍體腎和肺細(xì)胞中增殖，受染細(xì)胞出現(xiàn)核內(nèi)嗜酸性包涵體和多核巨細(xì)胞。（2）分離培養(yǎng)采用人成纖維細(xì)胞，初次分離時(shí)常需1個(gè)月才出現(xiàn)CPE，可用免疫熒光法進(jìn)行鑒定。2．感染廣泛，常呈隱性感染，也可導(dǎo)致持續(xù)性感染或潛伏感染，包括先天性感染、產(chǎn)時(shí)感染和產(chǎn)后感染。（3）血清學(xué)診斷不能用于HSV復(fù)發(fā)性診斷，雙份血清抗體的測(cè)定有助于原發(fā)性HSV感染的診斷，HSV1和HSV2間存在廣泛的交叉反應(yīng)。3．微生物學(xué)檢查（1）用免疫電鏡、免疫熒光法或酶免疫法直接檢查皰疹液、皮膚粘膜病灶刮取物、活檢組織中的病毒或特異性抗原。2．HSV1主要感染腰以上部位，原發(fā)性感染多見(jiàn)于嬰幼兒，多為隱性感染，感染后常導(dǎo)致病毒潛伏，潛伏病毒可被激活增殖，可導(dǎo)致復(fù)發(fā)性局部皰疹，往往發(fā)生于同一部位。一、單純皰疹病毒（HSV）1．能在多種細(xì)胞中增殖，有原代細(xì)胞（兔腎、貂肺、人胚肺或腎）、二倍體細(xì)胞和傳代細(xì)胞（HepBHK21等），形成典型CPE。第八節(jié) 皰疹病毒[授課學(xué)時(shí)] 1學(xué)時(shí) [學(xué)習(xí)重點(diǎn)] 各種皰疹病毒的生物學(xué)特性及其微生物學(xué)檢查方法?？梢鹦陆鲅獰幔珶o(wú)腎綜合征。3．微生物學(xué)檢查用A549和VeroE6進(jìn)行分離病毒，用間接免疫熒光法檢測(cè)特異性IgG和IgM抗體，用RTPCR技術(shù)進(jìn)行快速診斷。四、漢坦病毒1．主要生物學(xué)特性為布尼亞病毒科漢坦病毒屬，單負(fù)股RNA包膜病毒，呈多形態(tài)性，包膜上有血凝素；可在A54VeroE6及地鼠腎細(xì)胞中生長(zhǎng)；黑線姬鼠、小鼠、乳鼠對(duì)其敏感，鼠肺和腎中可檢出大量病毒；國(guó)際上確認(rèn)的血清型有漢坦病毒（HTN）、漢城病毒（SEO）、普馬拉病毒（PUV）、希望山病毒（PH）。病毒分離的方法有巨蚊胸內(nèi)接種、C6/36細(xì)胞分離和乳鼠腦內(nèi)接種。二、森林腦炎病毒傳播媒介為森林硬蜱，屬自然疫源性疾??；小鼠和雞胚對(duì)其敏感；微生物學(xué)檢查方法與乙腦病毒相似。（2）血清學(xué)診斷：2ME敏感的血凝抑制試驗(yàn)和IgM抗體捕獲ELISA實(shí)驗(yàn)可用于乙腦的早期診斷；補(bǔ)體結(jié)合抗體恢復(fù)期效價(jià)上升≥4倍時(shí)為陽(yáng)性；中和試驗(yàn)僅用于流行病學(xué)調(diào)查。3．微生物學(xué)檢查：（1）分離與鑒定：采用乳鼠腦內(nèi)接種和金黃地鼠腎原代細(xì)胞及蚊傳代細(xì)胞進(jìn)行分離培養(yǎng)，用交叉中和試驗(yàn)、血凝抑制試驗(yàn)等進(jìn)行鑒定，也可用IFA對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)物進(jìn)行鑒定?！Ⅷ澓往Z的紅細(xì)胞，在地鼠腎、幼豬腎等原代細(xì)胞，以及AP61或C6/36蚊傳代細(xì)胞中均能增殖，最易感的動(dòng)物為乳鼠。[基本概念]蟲媒病毒：是指一大群通過(guò)吸血的節(jié)肢動(dòng)物叮咬人、家畜及野生動(dòng)物而傳播疾病的病毒，具有自然疫源性。HEV的檢測(cè)標(biāo)本與檢查方法基本同HAV，但對(duì)陰性結(jié)果的判斷要慎重，有時(shí)不能排除感染的存在。HCV檢測(cè)標(biāo)本主要是血清與血漿，檢查方法主要有兩類：血清學(xué)方法（EIA或RIA）測(cè)定抗HCV及PCR法測(cè)定HCV RNA，并進(jìn)行基因分型。三、微生物學(xué)檢查：HAV感染的糞便標(biāo)本或肝活檢組織可采用電鏡或IF、EIA檢查，以及PCR和核酸雜交的方法；對(duì)于血清標(biāo)本可用ELISA方法檢查抗HAV IgM和總抗HAV。HDV感染的傳播途徑與HBV相似，只在感染了HBV的人中才能發(fā)生，與 HBV可同時(shí)感染，也可重疊感染，引起嚴(yán)重或進(jìn)行性肝病。HBV感染與原發(fā)性肝癌有關(guān)。二、臨床意義：HAV通過(guò)消化道感染，引起隱性感染或急性肝炎癥狀。HDV為缺陷病毒，敏感動(dòng)物有黑猩猩、東方土撥鼠。尚不能用細(xì)胞培養(yǎng)，少數(shù)靈長(zhǎng)類動(dòng)物對(duì)其敏感。[基本要點(diǎn)]一、生物學(xué)特性：HAV屬小RNA病毒科，單正股RNA，只有1個(gè)血清型，目前已有多種細(xì)胞可用于HAV培養(yǎng)，復(fù)制周期長(zhǎng)，眾多靈長(zhǎng)類對(duì)HAV敏感。第六節(jié) 肝炎病毒[授課學(xué)時(shí)] 1學(xué)時(shí) [學(xué)習(xí)重點(diǎn)] 常見(jiàn)肝炎病毒的生物學(xué)特性及其檢驗(yàn)方法。為區(qū)別脊髓灰質(zhì)炎病毒和其它腸道病毒常用NT、IF和PCR法等。2．病毒的分離與鑒定：多種傳代細(xì)胞對(duì)腸道病毒敏感，CPE典型。多數(shù)人感染腸道病毒后并不出現(xiàn)癥狀，表現(xiàn)為隱性感染。二、臨床意義：腸道病毒從消化道侵入，并在整個(gè)消化道中增殖，病毒侵入血流，進(jìn)入腸道外組織增殖，不同的腸道病毒對(duì)各種器官組織的嗜性不同，引起腸外多器官系統(tǒng)的疾病。 [基本概念]1．腸道病毒：由微小RNA病毒科中的67種獨(dú)特的血清型組成，包括脊髓灰質(zhì)炎病毒、柯薩奇病毒A組和B組、埃可病毒及新型腸道病毒5個(gè)亞屬或亞群，各亞群中又分不同血清型。4．血清學(xué)診斷：可用 CF、EIA、HI、NT等試驗(yàn)方法。2周內(nèi)仍無(wú)CPE可進(jìn)行盲傳。2．直接檢查病毒抗原與核酸：可采用電鏡和免疫電鏡、免疫熒光和酶免疫試驗(yàn)、PCR與核酸電泳的方法。（二）臨床意義：可感染人體各個(gè)器官，出現(xiàn)相應(yīng)不同的臨床癥狀；常年流行，主要通過(guò)呼吸道傳播和接觸該病毒污染物而感染。（3）血清學(xué)診斷除檢測(cè)IgG外，尚能檢測(cè)急性期血清中IgM、IgA抗體，進(jìn)行早期診斷。（1）用免疫學(xué)方法直接檢查鼻咽上皮細(xì)胞中的病毒抗原。2．臨床意義：經(jīng)呼吸道傳播，引起上呼吸道感染，繼而引起下呼吸道感染，感染嬰兒有時(shí)會(huì)出現(xiàn)呼吸暫停?？捎妹庖邔W(xué)方法直接檢測(cè)標(biāo)本脫落細(xì)胞中的病毒抗原；也可用血清學(xué)方法進(jìn)行診斷，但與其它副粘病毒存在一定的交叉反應(yīng)。2．臨床意義：通過(guò)呼吸道傳播，引起上呼吸道感染。（3）快速診斷采用免疫熒光法或酶免疫方法檢測(cè)標(biāo)本病毒抗原；用分子雜交或RTPCR法檢測(cè)病毒RNA；免疫電鏡查病毒顆粒；用血清學(xué)方法檢測(cè)特異性抗體。3．微生物檢查（1）于發(fā)病頭3天內(nèi)采集鼻腔洗液、咽拭子、鼻拭子、喉拭子等標(biāo)本。2．臨床意義：在呼吸道柱狀上皮細(xì)胞內(nèi)復(fù)制，很少入血，但在代謝過(guò)程中產(chǎn)生的毒素樣物質(zhì)可進(jìn)入血流引起全身癥狀。[基本要點(diǎn)]常見(jiàn)的呼吸道病毒有正粘病毒科的流感病毒，副粘病毒科的副流感病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、呼吸道合胞病毒，以及腺病毒、冠狀病毒、風(fēng)疹病毒、呼腸病毒等。2．抗原漂移：抗原變異幅度小，系量變，不形成新的亞型。[基本概念]1．呼吸道病毒：是一群能侵犯呼吸道的病毒?？刹捎秘?fù)染色法、免疫電鏡法、超薄切片法。通過(guò)光學(xué)顯微鏡用組織、細(xì)胞學(xué)方法檢查感染組織或脫落細(xì)胞中的特征性病毒包涵體（包括包涵體的位置和染色性）。最常用的方法是ELISA法，用病毒特異性抗體包被固相載體，在一定條件下捕獲臨床標(biāo)本中的游離病毒抗原，再用標(biāo)記的酶標(biāo)抗體或未標(biāo)記抗體與標(biāo)記的抗免疫球蛋白檢測(cè)。試驗(yàn)時(shí)必須設(shè)嚴(yán)格的對(duì)照，才能