【正文】 1978年于武漢大學生物系畢業(yè)，1982年1月獲得中科院遺傳所遺傳學碩士學位，1988年在美國俄亥俄大學獲分子與細胞生物學博士學位，19。曾獲得過美國Indiana大學獎學金，美國糖尿病學會獎學金，March of Dime基金會博士生獎學金，Bayer Premier Circle獎，Bayer質(zhì)量管理優(yōu)秀獎，AMGEN年度特殊股票獎以及AMGEN優(yōu)秀成就獎等獎勵。該藥在獲得FDA批準后的兩季度已創(chuàng)收5千萬美元以上。20022003年負責EPOGEN全面質(zhì)量管理，包括FDA申報、生產(chǎn)、檢測技術(shù)更新，該藥年創(chuàng)收達40億美元；2003年以來，主管并完成了30多個不同形式的產(chǎn)品（包括小分子、重組蛋白、單克隆抗體、融合蛋白等藥物）從臨床前研究到商品化的不同發(fā)展時期的IND申報和發(fā)布。具有13年的藥物發(fā)現(xiàn)、發(fā)展、商業(yè)化、全球藥品許可報批，以及大型組織的管理經(jīng)驗。1987年獲得南開大學生物化學專業(yè)學士學位，1994年獲得美國Indiana大學醫(yī)學院生物化學與分子生物學專業(yè)博士學位。一種利用囊膜病毒出芽特性高效獲得動物膜蛋白的方法五攻關(guān)張耀洲20浙江省省長基金張耀洲40浙江省科委重大項目張耀洲25省科委重點項目張耀洲15省科委重點項目張耀洲用蠶表達rhGMCSF生白藥物有效分子機制的研究教育部跨世紀人才基金張耀洲30用蠶表達EPO制備口服藥物研究教育部骨干教師基金張耀洲6省部級以上科技獎勵一覽表序號獲獎項目名稱等級完成的名次備注1蛋白質(zhì)雙向電泳中關(guān)鍵技術(shù)的研究浙江省高等學校科研成果獎第一名20072昆蟲桿狀病毒分子生物學研究浙江省科學技術(shù)進步二等獎第一名20063家蠶生物反應(yīng)器制備生物制品的方法國家技術(shù)發(fā)明二等獎第一名20044家蠶生物反應(yīng)器高效表達的條件優(yōu)化和產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用研究浙江省政府二等獎第一名20025昆蟲桿狀病毒基因研究國家教育部科技進步二等獎第一名19976用蠶表達hGMCSF生產(chǎn)口服生白藥物研究浙江省政府二等獎第一名19987用蠶表達丙肝抗原制藥口服藥物和檢測試劑研究國家教育部科技進步三等獎第一名19998傳染性法氏囊病毒VP2的克隆及其在蠶體中的表達和疫苗功能研究浙江省政府二等獎第二名2000獲得國家發(fā)明專利一覽表序號專利名稱專利號公開(公告)日專利權(quán)人(排序)發(fā)明人(排序)1用蠶表達丙肝抗原制備口服藥物的方法第一名第一名2用家蠶表達重組人血小板生成素制備藥物方法五攻關(guān)張耀洲100浙江省重大科技創(chuàng)新基地—生物醫(yī)學工程，浙江省教技發(fā)［05］1號浙江省人民政府張耀洲2000國家自然科學基金張耀洲8國家自然科學基金張耀洲14國家自然科學基金張耀洲8家蠶桿狀病毒P10基因和多角體基因互作調(diào)控30670095國家自然科學基金張耀洲8家蠶表達hGMCSF口服吸收協(xié)同蛋白因子的分子生物學Z204267浙江省基金重點項目張耀洲25用家蠶表達的生白藥物有效分子機制研究 浙江省自然科學基金張耀洲4浙江省自然科學基金張耀洲浙江省九獲得國家發(fā)明專利11項，公開國家發(fā)明專利6項，均為第一完成人。完成科研項目21項，在研項目4項，其中國家級13項，省部級10項。主要從事家蠶基因組學和生物反應(yīng)器制藥平臺技術(shù)的研究?！渡锘瘜W研究與應(yīng)用》主編，中國藥學會高級會員，國家“百千萬人才工程”第一梯隊成員，國家教育部“跨世紀優(yōu)秀人才”計劃成員，國務(wù)院特殊津貼獲得者，霍英東優(yōu)秀青年教師基金獲得者，浙江省有突出貢獻中青年專家，浙江省中青年學術(shù)帶頭人，浙江省“151人才”工程第一梯隊成員。五、對家蠶蛹的cDNA,microRNA及其特種編輯蛋白的研究首次構(gòu)建家蠶蛹cDNA文庫，發(fā)現(xiàn)2000多條新的基因，對其中的100多條基因進行了初步的功能研究；建立了一套新的家蠶蛋白組學研究方法――八孔道加樣和兩步法抽提法，大大提高圖譜蛋白點的檢出率；首次鑒定確認46種家蠶蛹的microRNA及其表達模式，并獲得1000多條可能的microRNA調(diào)控靶基因；同時發(fā)現(xiàn)了一種全新的RNA編輯方式:A to I，揭示RNA編輯可能在進化中行使一個雙重的角色，既產(chǎn)生蛋白表達的多樣性，又維持蛋白在進化上的保守性。這種新的表達系統(tǒng)還可用于表達一些難表達難純化的蛋白，如膜蛋白。三、桿狀病毒出芽方式建立一個全新的膜蛋白分離技術(shù)利用桿狀病毒出芽時帶走宿主細胞膜成為病毒囊膜這一特征，發(fā)明了宿主細胞膜的分離技術(shù)，獲得并鑒定了6880種家蠶蛹膜相關(guān)蛋白，確定了1883種為膜蛋白，其中333種為全新的首次報道的膜蛋白。由此研發(fā)的人用禽流感疫苗已經(jīng)完成臨床前所有研究工作，實驗室效果顯著，可以作為一種高效，廉價的和安全的人用禽流感疫苗，具備了申報臨床研究條件。是蛋白質(zhì)藥物研究的一大突破。建立首個家蠶生物反應(yīng)器制品生物技術(shù)標準，并實現(xiàn)了規(guī)?；a(chǎn)。（2）首次高效表達hGMCSF細胞因子。研究方向和創(chuàng)新點總結(jié)以家蠶作為生物反應(yīng)器，利用分子生物學手段，構(gòu)建了系統(tǒng)的家蠶桿狀病毒高效表達藥用外源蛋白體系，建立了全方位的具有自主知識產(chǎn)權(quán)的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)化平臺。首次構(gòu)建家蠶蛹cDNA文庫，發(fā)現(xiàn)2000多條新的基因，對其中的100多條基因進行了初步的功能研究，為闡明家蠶蛹期蛋白的互作網(wǎng)絡(luò)和家蠶生長發(fā)育過程中的基因調(diào)控打下基礎(chǔ)；建立了一套新的家蠶蛋白組學研究方法，該方法采用八孔道加樣方式，使得樣品蛋白質(zhì)回收率比傳統(tǒng)的水化上樣高出約20%，同時開發(fā)了一種新的家蠶卵蛋白樣品制備方法――兩步法抽提法，該方法與傳統(tǒng)的“一步提取法”相比，大大提高圖譜蛋白點的檢出率， 采用該方法我們獲得了迄今為止分離蠶卵樣品最多點的蛋白質(zhì)組圖譜，這將有利于更多生物相關(guān)蛋白的發(fā)現(xiàn)以及鑒定；首次鑒定確認46種家蠶蛹的microRNA及其表達模式，并獲得1000多條可能的microRNA調(diào)控靶基因，為研究microRNA對家蠶生長發(fā)育中的基因調(diào)控打下基礎(chǔ)，相關(guān)論文發(fā)表1個月被下載次數(shù)高達1000多次，被評為高訪問率論文。同時建立的家蠶生物反應(yīng)器多角體結(jié)晶特征表達技術(shù)平臺體系能高效真核表達和有效分離純化得到大量接近天然的重組膜蛋白，也為膜蛋白的研究提供了一個新的技術(shù)平臺。然而，由于其疏水特性和含量低，膜蛋白的分離純化是一個眾所周知的難題，也使得膜蛋白的研究陷入困境。通過該平臺，我們已經(jīng)研發(fā)出人用禽流感疫苗并完成臨床前所有研究工作，實驗室效果顯著，可以作為一種高效，廉價的和安全的人用禽流感疫苗，具備了申報臨床研究條件。一旦大規(guī)模爆發(fā)這類傳染性疾病，采用傳統(tǒng)的疫苗生產(chǎn)體系根本不可能及時生產(chǎn)出充足的疫苗來應(yīng)對突然出現(xiàn)的緊急疫情。預(yù)計明年將獲得3＋5新藥證書（I類生物制品）。目前已經(jīng)高效表達60余種藥用基因蛋白。上述研究極大的推動了家蠶桿狀病毒表達系統(tǒng)的應(yīng)用和基因工程生物制藥的發(fā)展，為實現(xiàn)基因工程藥物的產(chǎn)業(yè)化提供了新的思路。科學意義我們構(gòu)建的可救活家蠶桿狀病毒線性化重組病毒，使重組病毒篩選率幾乎為100％，同時表達效率提高40％，表達量極高，每kg蛹可以獲得外源蛋白或重組病毒量達到100mg，成本低，且表達產(chǎn)物和天然蛋白接近，生物活性高。結(jié)果證實了我們方法的可行性。另外，我們推測，和基于歐幾里得距離的方法相比，基于相關(guān)角的序列相似性分析方法能夠更好地消除DNA序列長度的影響。(5) 基于一種2D圖形表示法的DNA序列的相似性和不相似性分析研究基于一種DNA序列的2D圖形表示法，我們進行了敏感性分析，結(jié)果表明該表示法的高性能考慮了DNA序列小的修飾。該方法簡單，方便快速。(4) 蛋白序列相似性分析研究基于所選氨基酸物理化學屬性，我們開發(fā)了一種動態(tài)的蛋白序列2D圖形表示法。但是，磷細胞分化的其他一些元素如ASHl基因仍然能在突變型家蠶中正常表達。另外，我們同時研究磷家蠶ASH1基因，該基因被認為在家蠶翅膀發(fā)育過程中起關(guān)鍵作用。在突變體中，Caspase3/7 蛋白的活性在化蛹后第1天達到最大，其活性是野生型的10倍多。在家蠶蛹的早期階段，程序性細胞死亡參與了家蠶娥翅膀磷的發(fā)育，在每一個階段，野生型和突變型家蠶都有很大的不同。相關(guān)研究成果發(fā)表在BMC Genomics上。總得來說，基于基因內(nèi)容，基因組重排和編碼蛋白的相似性，AnpeNPV屬于Group I NPV，和HycuNPV, EppoNPV, OpMNPV與CfMNPV最相似。這些dr區(qū)AT含量高，存在于基因組的基因間區(qū)，推測可能是非hr的復制起始區(qū)，非hr的復制起始區(qū)在GrleGV, CpGV和AdorGV等GV中存在。另外，AnpeNPV編碼兩個conotoxinlike基因同源物ctl1和ctl2，其僅僅在HycuNPV、OpMNPV和LdMNPV中發(fā)現(xiàn)。 to 539。經(jīng)分析顯示，僅僅有6個基因存在于所有的鱗翅目NPV中，12個基因存在于所有的Group I NPV中。因此，仍然有29個保守基因存在與所有桿狀病毒中，仍然有33個保守基因存在于所有鱗翅目桿狀病毒中。我們對AnpeNPV的全基因組進行了測定，該基因組全長126,629 bp，%，大于大部分的桿狀病毒。目前為止，還沒有柞蠶桿狀病毒AnpeNPV全基因組序列的報到。相關(guān)研究成果發(fā)表在J. Cellular 。 μM濃度下，agkistins能夠以劑量效應(yīng)有效的抑制BAECs的遷移、擴增和生長。Agkistin的DNA序列分析表明，它有一個含有RGD序列的去整合素結(jié)構(gòu)域（12191467aa）。目前通過去整合素抑制血管生成已成為治療腫瘤的研究熱點之一。去整合素能夠通過其RGD三肽拮抗血管內(nèi)皮細胞表面的整合素與細胞外基質(zhì)黏附，并誘發(fā)其凋亡，從而抑制血管新生血管的生長。六、其他研究(1) 蛇毒去整合素agkistins的表達及功能研究我們開展了蛇毒去整合素結(jié)構(gòu)域agkistins的表達及功能研究。此外，用熒光顯微鏡觀察dsRNA在細胞內(nèi)的定位，發(fā)現(xiàn)在轉(zhuǎn)染24 h后dsRNA開始在細胞核的周圍呈不連續(xù)的聚集狀態(tài)。結(jié)果表明，在野生型病毒BmNPV感染家蠶細胞實驗中，Ap2 和AH 這2個dsRNA能夠有效地抑制病毒DNA的復制，并且在轉(zhuǎn)染dsRNA后第4天抑制效果最佳，它們使病毒滴度(PFU/mL值)降低了103~104，而另外的dsRNA(Ap1)沒有明顯的抑制效果。相關(guān)研究成果發(fā)表在RNA上。我們同時闡述了一個非保守編輯位點的轉(zhuǎn)換模式。另外，比較分析表明，RNA編輯位點通常出現(xiàn)在蛋白編碼區(qū)高度保守的區(qū)域。令人驚奇的是，它們中有5個編輯位點在烏賊（軟體動物）中是保守的，而且可能和其他物種中的起源無關(guān)，這表明昆蟲和烏賊（軟體動物）之間的RNA編輯在進化上是保守的。我們分析了不同昆蟲3億多年進化過程中Kv2 K+通道蛋白基因的A to I 編輯情況，這些昆蟲包括：Drosophila melanogaster, Culex pipiens (Diptera), Pulex irritans (Siphonaptera), Bombyx mori (Lepidoptera), Tribolium castaneum (Coleoptera), Apis mellifera (Hymenoptera), Pediculus humanus (Phthiraptera)和Myzus persicae (Homoptera)。相關(guān)研究成果發(fā)表在RNA上。我們不僅闡明了A to I RNA 編輯在進化上可需要性的機制，同時證明怎樣預(yù)測核A to I 編輯位點，在這些編輯位點中，RNA編輯發(fā)生將維持蛋白在相近物種中的保守性。進化分析表明，DNA水平的G to A 突變可能被轉(zhuǎn)錄后修飾的A to I RNA編輯校正，編輯得到的I(G)可以以硬接線方式依次插入到基因組，導致A to G的突變。A to I RNA編輯作為一種遺傳基因重編碼能夠改變蛋白序列高度保守的編碼區(qū)域。相關(guān)研究成果發(fā)表在BMC Genomics上。在預(yù)測的miRNA靶基因中，有61個基因存在多個靶位點，這61個預(yù)測的靶基因應(yīng)該作為將來功能研究的首選基因。我們通過生物信息學方法預(yù)測了1671個家蠶基因mRNA的3’UTR中存在的miRNA結(jié)合位點，共發(fā)現(xiàn)547個基因存在986個miRNA結(jié)合位點。進一步，我們發(fā)現(xiàn)在Northern blotting中，用來檢測miRNA的DNA探針甲基化能夠提高探針檢測的靈敏度。Northern blotting顯示某些家蠶miRNA只在家蠶某些特定的發(fā)育階段表達，揭示這些miRNA可能呈發(fā)育時序特異性表達（如bmomiR277）。鑒定出的新的小RNA命名為bmomiR100like ，它是以miRNA agamiR100為探針，采用生物芯片和Northern blotting鑒定出，但是其前體序列不能折疊為miRNA前體常見的發(fā)夾結(jié)構(gòu)。(3) 家蠶RNA相關(guān)研究（a）家蠶microRNA的鑒定與功能研究microRNA(miRNA)是一類能調(diào)控基因表達的小分子RNA，目前為止，在家蠶中只有l(wèi)et7 通過Northern blotting得到驗證。這些研究為家蠶蛋白的表達和功能分析打下基礎(chǔ)。通過比對分析，上述構(gòu)建的三個蛋白庫中分別有6649, 250和868個蛋白能夠和質(zhì)譜序列進行匹配，%, %, 和43%。家蠶基因組草圖預(yù)測得到的蛋白庫，共14,632 潛在蛋白；第二個蛋白庫為從我們構(gòu)建的家蠶蛹cDNA文庫得到的蛋白庫，共4,074個30個aa以上的潛在蛋白；第三個蛋白庫為UniProt蛋白庫中下載的家蠶蛋白，共2111個蛋白。本研究中我們通過質(zhì)譜鑒定了家蠶ORF庫和cDNA序列虛擬ORF庫。相關(guān)研究成果發(fā)表在BMC Genomics上。通過RTPCR，我們研究了