菊花嫩莖快繁技術(shù)的研究生物技術(shù)及應(yīng)用(參考版)
2025-04-07 23:51本頁面
【正文】 參考文獻：[1]李時珍. 本草綱目[M]. 第二冊. 北京:人民衛(wèi)生出版社, 1979: 929.[2] 李金格等. 我國菊花研究狀況和發(fā)展趨勢文獻計量分析. 《現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技》,2008 ,16(2): 1007 5739[3] 孫滿芝,尹成濤. 植物組培過程中玻璃化現(xiàn)象的發(fā)生與解決措施. 山東林業(yè)科技,2001,(6):1920[4] 建德鋒,趙文若,趙海鋒,. 北方園藝,2007,(9) :200～201[5] 張素琴等. 非洲菊組織培養(yǎng)抑制褐變現(xiàn)象的研究. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué),2007 ,35 (2) :56[6] 劉忠榮,洪波. 培養(yǎng)因素對菊花組織培養(yǎng)的影響. 廣西農(nóng)業(yè)科學(xué),2004,(1):1921[7] 王艷玲,奚廣生. 不同濃度6BA對菊花分枝的影響. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué), 2008, 36 (20) : 8465[8] 胡軍榮. , 2008, 14 (5)[9] ,2007,23 (12):63[10] ,2007,(6) :208～210致 謝 感謝生養(yǎng)了我的父母是你們給了我學(xué)習(xí)上的支持，感謝培養(yǎng)了我的母校給我們即將踏上社會的引導(dǎo)，感謝指導(dǎo)了我的老師們，是你們辛勤的汗水換來了我們對未來的憧憬，感謝和我一同度過三年美好時光的同學(xué)。特別是在接種時如果發(fā)現(xiàn)嫩莖很難插進培養(yǎng)基那么下次應(yīng)該適當(dāng)?shù)慕档铜傊壤绨l(fā)現(xiàn)隨凝固但很軟就應(yīng)在下次增大比例 ，方案上的不一定都合適，要看實際情況而定。%瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)皿中濕度稍低。由此可見, 對某一品種的菊花進行組培時, 選用什么樣的激素種類和配比, 較難有一個固定的模式, 除了參照前人的經(jīng)驗外, 最好的辦法還是先進行小規(guī)模的試驗, 選出適宜的激素組合再擴大生產(chǎn)。激素水平對愈傷組織再分化關(guān)系密切, 隨激素水平的提高外植體的分化率增加,芽的分化系數(shù)也提高 , 但激素濃度過高和生長素與細胞分裂素配比失調(diào), 易導(dǎo)致玻璃化苗的產(chǎn)生。為了防止當(dāng)代培養(yǎng)基染菌，我們在培養(yǎng)基中附加50—150mg/l氨芐青霉素；為了防止生根培養(yǎng)基的試管苗染菌我們加入50mg/l 硫酸丁胺卡那霉素。2．4細菌、真菌污染及防治表5 初代、繼代培養(yǎng)中的污染統(tǒng)計培養(yǎng)類型污染分類總計概率染菌表現(xiàn)初代真菌污染%外植體周圍有白色絨毛狀菌絲，培養(yǎng)基出現(xiàn)綠、白菌斑細菌污染13%培養(yǎng)基表層呈水漬狀污染，外植體周圍滴形云霧狀污染繼代真菌污染19%培養(yǎng)基表層出現(xiàn)黃、白色油滴狀菌斑細菌污染30%培養(yǎng)基表層有粉紅色如水漬狀分布的菌斑在實驗過程中，我們會發(fā)現(xiàn)每次實驗下來總有幾瓶污染的，大多都是真菌和細菌污染。在組織培養(yǎng)的過程中,試管苗移栽的成功與否也是一個關(guān)鍵的環(huán)節(jié),因為試管苗在試管中不論生長多好,移栽若不成功則導(dǎo)致前功盡棄。最終篩選出此培養(yǎng)基較佳配方,繼代周期為25～30d ,增殖倍數(shù)4～7 倍。在實驗過程中發(fā)現(xiàn),6BA/ NAA 比值越大有利于芽分化。表4 菊花組培中生長素的濃度范圍(單位:mg/L )生長素NAAIBAIAA愈傷誘導(dǎo)和分化0. 01～ 20. 3～ 3生根0. 1～ 0. 3 (1/2M S)0. 1～ 0. 31. 06BA濃度0～0. 5 mg/L范圍內(nèi),菊花分枝數(shù)隨6BA濃度增高而增多,但超過這一濃度,菊花分枝數(shù)隨濃度增高而降低,說明菊花分枝數(shù)在一定范圍內(nèi)與6BA 濃度呈正相關(guān)。當(dāng)褐變現(xiàn)象不再發(fā)生時,要及時停止添加PVP ,以防長期使用 PVP 對外植體產(chǎn)生毒副作用。表2 初代培養(yǎng)記錄表：次數(shù)接種量真菌污染細菌污染褐變玻璃化正常成活率160107523660%260128823050%360910203965%460116313965%統(tǒng)計：240423118514460%從表2上我們看到第3，4組的褐變的數(shù)量比第1，2組的褐變數(shù)量少。為了防止褐變我們加入了VC溶液。在拿菊花莖尖和菊花葉片接種到初代培養(yǎng)基上在相同的條件下培養(yǎng)時，發(fā)現(xiàn)莖尖及莖段最為合適,其他外殖體在此培養(yǎng)基效果不明顯?！∫圃耘囵B(yǎng)待根長至1～2cm時開瓶進行練苗,先將瓶塞打開,讓其由無菌環(huán)境轉(zhuǎn)至有菌且濕度較低的環(huán)境之中約3d ,將苗取出,小心用流水洗去根表面的培養(yǎng)基殘留物,移栽到素沙中,適當(dāng)遮蔭,一星期后即可成活,成活率達95 %以上,一個
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