微生物免疫學(xué)實驗報告(參考版)
2025-04-07 23:22本頁面
【正文】 （肥達反應(yīng)）因此不能只根據(jù)肥達氏試驗的結(jié)果去作簡單肯定或否定的結(jié)論，必須結(jié)合當(dāng)?shù)亓餍星闆r，既往接觸史，以及臨床癥狀和體征，作出正確的判斷。（4）采血時間不同，肥達反應(yīng)的陽性率也不同，發(fā)病一周50%，第二周80%，第四周90%以上，恢復(fù)期凝集價最高，以后逐漸下降。（3）少數(shù)腸熱癥患者，由于發(fā)病初期曾使用大量抗生素，或機體有免疫缺陷病，或機體反應(yīng)性極弱等原因，抗體效價可以很低，甚至為陰性結(jié)果。不過，由這些原因所引起的陽性反應(yīng)主要是H抗體升高，O抗體效價一般不高，同時，每隔5~7天試血一次，其抗體效價一般不會隨病程而升高。但在分析結(jié)果時，應(yīng)注意以下兩點：（1）首先應(yīng)了解當(dāng)?shù)卣Ｈ诵r，一般凝集價超過正常凝集價時才有診斷意義。效價判定：以能出現(xiàn)“++”凝集現(xiàn)象的血清最高稀釋度為該血清的凝集效價。（++）弱，上液混濁，細菌少部分凝集。（++++）最強，上液澄清，細菌全部凝集沉淀于管底。：，用1ml吸管吹吸三次，混勻，……依次稀釋至第7管，第8管為對照。肥達反應(yīng)【方法】，分成4排，每排8支，依次編號?！窘Y(jié)果】熒光球大而發(fā)亮呈圓球狀，結(jié)構(gòu)較疏松，周圍近似卷發(fā)狀?！静牧吓c方法】，37℃培養(yǎng)10小時?！舅伎碱}】腸道桿菌有何共同特征？大腸、變形、痢疾、傷寒桿菌及乙型副傷寒桿菌的鑒別要點是什么？如果大腸桿菌、傷寒桿菌、乙型副傷寒桿菌和痢疾桿菌混雜在肉湯培養(yǎng)基中，你怎樣把它們分離出來，使各自成為純培養(yǎng)物?【附注】痢疾桿菌熒光菌球試驗【原理】將相應(yīng)抗體加在痢疾桿菌的培養(yǎng)液中，雖相互結(jié)合，但細菌不被殺死，在適宜溫度下仍能生長，形成痢疾桿菌微小菌團?！痉椒ā浚?）根據(jù)初步鑒定結(jié)果，選用相應(yīng)診斷血清做玻片凝集試驗。硫代硫酸鈉是一種還原劑，防止培養(yǎng)基中氧化物與H2S作用而影響FeS的生成。培養(yǎng)基中乳糖含量大，被分解后產(chǎn)酸多，因此不僅培養(yǎng)基下層變黃，而且斜面處也由紅變黃，基于上述現(xiàn)象，通常將培養(yǎng)基的斜面部分代表乳糖，下層部分代表葡萄糖?！驹怼靠耸想p糖鐵培養(yǎng)基中含有葡萄糖、乳糖、硫酸亞鐵及酚紅指示劑等成分。初步鑒定【材料】雙糖鐵培養(yǎng)基【方法】用接種針從可疑病原菌菌落中心點取細菌，穿刺接種雙糖鐵培養(yǎng)基（Kligler培養(yǎng)基），37℃培養(yǎng)1824小時后，觀察結(jié)果，并據(jù)此判定細菌屬性?！窘Y(jié)果】觀察平板上菌落，依據(jù)其大小、顏色、透明度等特點，初步識別可疑病原菌菌落，進行鑒定。（二）檢驗程序 腸道桿菌檢驗程序（三）檢驗方法：分離培養(yǎng)【材料】新鮮糞便標(biāo)本、SS瓊脂平板。表2 五種腸道桿菌生化反應(yīng)與動力鑒別表菌 名生 化 反 應(yīng)動力葡萄糖乳糖H2S尿素靛基質(zhì)大腸桿菌⊕⊕++變形桿菌⊕+/++/+副傷寒乙桿菌⊕++++傷寒桿菌+/++痢疾桿菌++/三、糞便標(biāo)本中腸道桿菌的分離鑒定（一）標(biāo)本采集盡可能在發(fā)病早期或治療前采集新鮮糞便，選取膿血或粘液部分，取材后應(yīng)立即送檢。同傷寒桿菌菌落。菌落無色，半透明，直徑2mm左右。【方法】觀察大腸桿菌、變形桿菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌及乙型副傷寒桿菌在EMB培養(yǎng)基上生長情況，注意菌落的形態(tài)、大小、顏色及透明度?！痉椒ā孔⒁馍鲜瞿c道桿菌形態(tài)、排列、染色的共同點，故腸道桿菌的染色鏡檢不能做為腸道桿菌之間的鑒別依據(jù)。實驗材料：顯微鏡、細菌標(biāo)本、玻片、試管、試管架、吸管、水浴箱、注射器、%碘酒、棉簽、生理鹽水、SS培養(yǎng)基、患者血清1：10稀釋、傷寒桿菌O菌液、H菌液、甲、乙型副傷寒H菌液。腸道桿菌的分離鑒定程序。 了解肥達試驗的原理、方法及臨床意義。教學(xué)難點肥達試驗的原理方法及結(jié)果分析教學(xué)方法請選擇你授課時所采用的教學(xué)方法（在括號中畫“√”）：講授法﹝﹞，討論法﹝﹞，演示法﹝﹞，案例法﹝﹞，發(fā)現(xiàn)法﹝﹞，探究法﹝﹞，談話法﹝﹞，實驗法﹝√﹞，參觀法﹝﹞，考察法﹝﹞，自學(xué)輔導(dǎo)法﹝﹞，練習(xí)法（習(xí)題或操作課）﹝﹞，讀書指導(dǎo)法﹝﹞，聽說法﹝﹞，寫生法﹝﹞，視唱法﹝﹞，工序法（技能課）﹝﹞，實習(xí)作業(yè)法﹝﹞，其他﹝﹞教學(xué)手段請選擇你授課時所采用的教學(xué)手段（在括號中畫“√”）：實物﹝﹞，多媒體﹝﹞，投影﹝﹞，影像﹝﹞，CAI課件﹝﹞，PPT﹝﹞，標(biāo)本﹝﹞，掛圖﹝﹞，模型﹝﹞，其他﹝√﹞討論、思考題、作業(yè)實驗報告參考文獻 (1)楊致邦，【M】..(2)【M】.中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)出版社，2013年.腸道桿菌的檢查實驗?zāi)康模?掌握腸道桿菌的形態(tài)、染色特性。腸道桿菌的分離鑒定程序。了解肥達試驗的原理、方法及臨床意義。授課進度第 周，第 次課（ 2 學(xué)時）授課日期年 月 日授課題目(教學(xué)章、節(jié)或主題)腸道桿菌的檢查教學(xué)目標(biāo)通過實驗讓學(xué)生掌握腸道桿菌的形態(tài)、染色特性。4 加血漿一滴、混勻，數(shù)分鐘后觀察結(jié)果。(四) 血漿凝固酶試驗3 取玻片一張，加生理鹽水一環(huán)。正常值為500單位以下。7 分別加5%，充分混勻，置37oC水浴箱中30min后觀察結(jié)果。第一排試管加待檢血清()分別稀釋為200、400、800倍；第二排試管加待檢血清()分別稀釋
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