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微生物與免疫學(xué)(微生物部分)—中國(guó)藥科大學(xué)(參考版)

2025-04-07 23:22本頁(yè)面
  

【正文】 溶源轉(zhuǎn)變與轉(zhuǎn)導(dǎo)的不同?a)不攜帶任何供體菌的基因;b)這種噬菌體是完整的,而不是缺陷的;。溶源轉(zhuǎn)變:一個(gè)與轉(zhuǎn)導(dǎo)相似又不同的現(xiàn)象。細(xì)菌轉(zhuǎn)導(dǎo)的二種類(lèi)型:普遍轉(zhuǎn)導(dǎo):通過(guò)極少數(shù)完全缺陷噬菌體對(duì)供體菌任何小片段DNA進(jìn)行“誤包”,而將其遺傳性狀傳遞給受體菌的現(xiàn)象,稱(chēng)為普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)。(四)轉(zhuǎn)導(dǎo)(transduction)以噬菌體為媒介,將供體菌的DNA片段攜帶到受體細(xì)胞,通過(guò)交換與整合,從而使受體菌獲得供體菌的部分遺傳性狀。Hfr菌株,F(xiàn)因子插入到染色體DNA上,細(xì)胞表面有性菌毛。252。F+菌株,接合作用接收F因子而變成雄性菌株(F+);252。F菌株,F(xiàn)因子的四種細(xì)胞形式252。噬菌體DNA被感受態(tài)細(xì)胞攝取,而非感染途徑,產(chǎn)生有活性的病毒顆粒,現(xiàn)在把DNA轉(zhuǎn)移至動(dòng)物細(xì)胞的過(guò)程也稱(chēng)轉(zhuǎn)染。調(diào)節(jié)感受態(tài)的一類(lèi)特異蛋白稱(chēng)感受態(tài)因子。感受態(tài)細(xì)胞(petent cell)具有攝取外源DNA能力的細(xì)胞。通過(guò)轉(zhuǎn)化方式而形成的雜種后代,稱(chēng)轉(zhuǎn)化子(transformant)?;蛑亟M凡把兩個(gè)不同性狀個(gè)體內(nèi)的遺傳基因轉(zhuǎn)移到一起,經(jīng)過(guò)遺傳分子間的重新組合,形成新遺傳型個(gè)體的方式,稱(chēng)為基因重組(gene rebination)或遺傳重組(genetic rebination),簡(jiǎn)稱(chēng)重組。誘變劑與致癌物質(zhì)——Ames試驗(yàn)具體操作:檢測(cè)鼠傷寒沙門(mén)氏菌(Salmonella typhmurium)組氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株(his)的回復(fù)突變率,his菌株在不含組氨酸的培養(yǎng)基中不能生長(zhǎng),或只有極少數(shù)的自發(fā)回復(fù)突變子生長(zhǎng),如果回復(fù)突變率因某種化學(xué)誘變劑(或待測(cè)物)的作用而增加,那么這種化學(xué)藥物可判斷為具有致癌性。產(chǎn)量突變型(metabolite quantitative mutant)基因突變后,在代謝產(chǎn)物產(chǎn)量上明顯有別于原始菌株的突變株,稱(chēng)為產(chǎn)量突變型。形態(tài)突變型(morphological mutant)指由于突變而引起的個(gè)體或菌落形態(tài)的變異。Ts突變株即溫度敏感突變株(temperature sensitive mutant,Ts mutant)是一類(lèi)典型的條件致死突變株。3.:“r”的上標(biāo)表示抗性;strs抗性突變型(resistant mutant)指野生型菌株因發(fā)生基因突變,對(duì)某化學(xué)藥物或致死物理因子,產(chǎn)生抗性的變異類(lèi)型。缺陷型在選擇培養(yǎng)基(一般為基本培養(yǎng)基)上不生長(zhǎng),為負(fù)選擇標(biāo)記。 基因型:所需營(yíng)養(yǎng)物的前三個(gè)英文小寫(xiě)斜體字母表示:hisC(組氨酸缺陷型,其中的大寫(xiě)字母C同一表型中不同基因的突變)167。營(yíng)養(yǎng)缺陷型(auxotroph)某一野生型菌株因發(fā)生基因突變而喪失合成一種或幾種生長(zhǎng)因子(堿基或氨基酸)的能力,只有從周?chē)h(huán)境或培養(yǎng)基中獲得這些營(yíng)養(yǎng)或其前體物(precursor)才能正常生長(zhǎng)繁殖的變異類(lèi)型,稱(chēng)為營(yíng)養(yǎng)缺陷型。第二節(jié)三、轉(zhuǎn)座因子(transposable element)又稱(chēng)跳躍基因,位于染色體或質(zhì)粒上的一段能改變自身位置的DNA序列,廣泛分布于原核和真核細(xì)胞中。 (4)代謝質(zhì)粒: 攜帶有能降解某些基質(zhì)的酶的基因,尤其對(duì)一些有毒化合物進(jìn)行降解,在環(huán)保方面有重要意義。抗性質(zhì)粒在細(xì)菌間的傳遞(接合型抗藥質(zhì)粒)是細(xì)菌產(chǎn)生抗藥性的重要原因之一。F因子能以游離狀態(tài)(F+)和以與染色體相結(jié)合的狀態(tài)(Hfr)存在于細(xì)胞中,所以又稱(chēng)之為附加體(episome)。質(zhì)粒的主要類(lèi)型(1)致育因子(Fertility factor,F(xiàn)因子):又稱(chēng)F質(zhì)粒,其大小約100kb,這是最早發(fā)現(xiàn)的一種與大腸桿菌的有性生殖現(xiàn)象(接合作用)有關(guān)的質(zhì)粒。特點(diǎn)如下:A 共價(jià),閉合,環(huán)狀,雙鏈cccdsDNA,常見(jiàn)的有超螺旋、開(kāi)環(huán)兩種存在形式; B 自我復(fù)制(嚴(yán)緊型質(zhì)粒,松弛型質(zhì)粒); C 不相容性(干擾近緣質(zhì)粒);D 非細(xì)胞生長(zhǎng)所必需;E 質(zhì)??勺孕邢Щ蛉斯とコ?;F 可轉(zhuǎn)移性,質(zhì)??蓮囊粋€(gè)細(xì)菌轉(zhuǎn)移到另一個(gè)細(xì)菌。二、原核生物的質(zhì)粒1.染色質(zhì):纖維狀結(jié)構(gòu),也叫染色絲,由最基本的單位(核小體)成串排列而成。第一節(jié));粘質(zhì)沙雷氏菌,25℃培養(yǎng)時(shí)產(chǎn)生深紅色的靈桿菌素。通常表現(xiàn)為全部個(gè)體的行為。遺傳性變異(基因型變異):微生物的基因型發(fā)生改變,可遺傳。表型(phenotype):又稱(chēng)表現(xiàn)型,指生物體所具有的外表特征和內(nèi)在特性的總和,是其遺傳型在合適環(huán)境下通過(guò)代謝和發(fā)育而得到的具體表現(xiàn)。變異:生物體在外因或內(nèi)因的作用下,引起遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)或數(shù)量的改變,亦即遺傳型的改變。2.掌握:遺傳、變異的概念;遺傳物質(zhì)在微生物中的存在形式;基因符號(hào)及有關(guān)術(shù)語(yǔ);轉(zhuǎn)座因子概念。 (MIC)):評(píng)定某化學(xué)藥物藥效強(qiáng)弱的指標(biāo),指在一定條件下,某化學(xué)藥劑抑制特定微生物的最低濃度。(二) 物理方法(dry heat sterilization)(moist heat sterilization) A 巴氏消毒法: 63℃/30min,72℃/1530s, 82℃/3s B 煮沸消毒法: 100℃,30min 難以殺滅芽胞 C 流通蒸氣消毒法: 100℃,1530min 難以殺滅芽胞 D 間歇蒸汽滅菌法: 100℃,1530min,37℃過(guò)夜培養(yǎng)(3次) E 高壓蒸氣滅菌法:(1)含糖培養(yǎng)基:113℃, 20~30min(2)一般培養(yǎng)基:121℃,15~30min濕熱比干熱滅菌好的原因:1 細(xì)菌蛋白質(zhì)在有水的情況下易于凝固變性 2 濕熱穿透力強(qiáng)3 濕熱蒸氣有潛熱存在,水蒸氣凝固成水釋放潛熱,迅速提高被滅菌物體的溫度(三) 化學(xué)方法二、對(duì)微生物的控制(一) 常用概念滅菌(sterilization):殺滅所有的微生物,包括細(xì)菌的芽孢;消毒(disinfection):殺滅病原微生物; 防腐(antiseptic):抑制微生物的生長(zhǎng)繁殖; 化療(Chemotherapy):化療是指利用具有選擇毒性的化學(xué)物質(zhì)如磺胺、抗生素等對(duì)生物體內(nèi)部被微生物感染的組織進(jìn)行治療,以殺死組織內(nèi)的病原微生物,但對(duì)機(jī)體本身無(wú)毒害作用的治療措施。3. 活菌計(jì)數(shù)法:液體稀釋后采用涂布法、傾注平板法,測(cè)定菌落形成單位。2. 比濁法:在一定波長(zhǎng)下,測(cè)定菌懸液的光密度(OD值)表示菌量。(三) 測(cè)定方法1. 顯微計(jì)數(shù)法:采用細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血球計(jì)數(shù)板,在顯微鏡下對(duì)微生物數(shù)量進(jìn)行直接計(jì)數(shù)(計(jì)算一定容積里樣品中全部微生物的數(shù)量)。]167。 連續(xù)培養(yǎng):在微生物的整個(gè)培養(yǎng)期間,通過(guò)不斷補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和以同樣的速率移出培養(yǎng)物使微生物能以恒定的生長(zhǎng)速率生長(zhǎng),并能持續(xù)生長(zhǎng)下去的一種培養(yǎng)方法。 分批培養(yǎng):封閉培養(yǎng),一定容積的培養(yǎng)基,一次收獲。 半固體:多采用穿刺培養(yǎng),往往用于微生物的鑒定和菌種保藏、判斷動(dòng)力。 固體:常用于微生物的分離、純化、保存和種子制備。當(dāng)培養(yǎng)基中同時(shí)含有這兩類(lèi)碳源(或氮源)時(shí),微生物在生長(zhǎng)過(guò)程中會(huì)形成二次生長(zhǎng)現(xiàn)象。 4+等)——稱(chēng)為速效碳源(或氮源);有的需要經(jīng)過(guò)一定的適應(yīng)期后才能獲得利用能力( Ⅳ 衰亡期(stationary phase)目的:(SCP、乳酸等)、次生代謝產(chǎn)物 穩(wěn)定期是產(chǎn)物的最佳收獲期;、堿基、氨基酸等物質(zhì)進(jìn)行生物測(cè)定 穩(wěn)定期是最佳測(cè)定時(shí)期。167。 Ⅱ 對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期(Logarithmic phase167。:20min左右167。167。一、微生物的生長(zhǎng)(一) 群體生長(zhǎng)規(guī)律167。 第五章 微生物的生長(zhǎng)與控制生長(zhǎng)(growth):生物個(gè)體物質(zhì)有規(guī)律地、不可逆增加,導(dǎo)致個(gè)體體積擴(kuò)大的生物學(xué)過(guò)程。(4)專(zhuān)性厭氧菌:缺乏SOD、細(xì)胞色素氧化酶和過(guò)氧化氫酶,氧氣有毒,如破傷風(fēng)梭菌。(2)微需氧菌:需要少量氧氣,如霍亂弧菌。液體培養(yǎng)基:用于生產(chǎn);固體培養(yǎng)基 (液體培養(yǎng)基+2%瓊脂):用于菌種保藏、純種分離、菌落特征觀察以及活細(xì)胞計(jì)數(shù)等方面;半固體培養(yǎng)基 (液體培養(yǎng)基+ %瓊脂):多用于細(xì)菌有無(wú)動(dòng)力的檢查。 培養(yǎng)基培養(yǎng)基:由人工配制的、適合微生物生長(zhǎng)繁殖、代謝用的混合營(yíng)養(yǎng)料。(分子量小,脂溶性,極性小)二、 促進(jìn)擴(kuò)散 (facilitated diffusion)eg:氨基酸,單糖,維生素,無(wú)機(jī)鹽等三、 主動(dòng)運(yùn)輸 (active transport)eg:大多數(shù)氨基酸,糖類(lèi),部分離子(Na+,K+,HPO4 2等)四、基團(tuán)轉(zhuǎn)位 (group translocation)有一個(gè)復(fù)雜的運(yùn)輸系統(tǒng)來(lái)完成物質(zhì)的運(yùn)輸;在運(yùn)輸中發(fā)生化學(xué)變化;eg:糖252。252。即碳源、氮源、能源、生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽和水。第四章(2)致病性與免疫性:性行為、血液、母嬰傳播。囊膜內(nèi)面為P17蛋白構(gòu)成的衣殼,其內(nèi)有核心蛋白(P24)包裹RNA。乙肝恢復(fù)期+感染過(guò)HBV+接種過(guò)乙肝疫苗或乙肝已恢復(fù)(三)人類(lèi)免疫缺陷病毒HIV是獲得性免疫缺陷綜合癥即艾滋病(AIDS)的病原體,屬逆轉(zhuǎn)錄病毒科(Retroviridae
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