第五章開(kāi)題報(bào)告與科研設(shè)計(jì)的實(shí)施(參考版)
2025-03-26 12:01本頁(yè)面
【正文】 在實(shí)驗(yàn)研究中，許多研究設(shè)計(jì)都要謝過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)來(lái)實(shí)施。各類(lèi)實(shí)驗(yàn)均有其自身的特點(diǎn)和規(guī)律，因此，實(shí)驗(yàn)人員必須了解這些特點(diǎn)和規(guī)律．遵循有關(guān)的實(shí)驗(yàn)原則，本節(jié)分別對(duì)醫(yī)學(xué)科研的三種類(lèi)型實(shí)驗(yàn)的特點(diǎn)、規(guī)律以及在實(shí)施中應(yīng)注意的技術(shù)方法和原則做簡(jiǎn)介。 (2)查叨談中草藥復(fù)方抑制鼻咽癌細(xì)胞生長(zhǎng)是否是通過(guò)影響細(xì)胞捌亡的調(diào)控基四而誘導(dǎo)鼻咽癌細(xì)胞弼亡所致． (3)了解該中草藥復(fù)方抑制鼻咽癌細(xì)胞生長(zhǎng)的一些重要藥理機(jī)制． 口、完成譚題需要的條件 車(chē)室8具備完成本實(shí)驗(yàn)所需的基本實(shí)驗(yàn)條件，如CNE一2和CNE1細(xì)胞系、細(xì)胞培養(yǎng)室、細(xì)胞生物實(shí)驗(yàn)室和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室盈相關(guān)的儀器設(shè)備．一些大型赍重儀器如流式細(xì)胞儀等可由學(xué)校實(shí)驗(yàn)中心提供使用，藥物提取、分析的儀器和技術(shù)由學(xué)校藥物研究室講助和提供．藥物原材料資源充足．可以采船或購(gòu)買(mǎi)，實(shí)驗(yàn)所需試劑均可從市場(chǎng)購(gòu)到．研究經(jīng)費(fèi)不足部分可由導(dǎo)師課題經(jīng)贄補(bǔ)克． 五、工作進(jìn)度計(jì)劃殛經(jīng)費(fèi)茄算 1．工作進(jìn)虛 第三學(xué)期：完成實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備．藥物原材料和試劑采購(gòu)．有效成分提取、分析及標(biāo)準(zhǔn)制定． 第四學(xué)期：完成藥物對(duì)鼻咽癌細(xì)胞生長(zhǎng)抑制實(shí)驗(yàn)和藥物對(duì)鼻咽癌細(xì)胞凋亡及其訶控影響實(shí)驗(yàn)． 第五學(xué)期t完成藥物對(duì)鼻咽癌細(xì)胞周期和端粒酶活性髟響實(shí)驗(yàn)． 第六學(xué)期；完成需補(bǔ)充的實(shí)驗(yàn)、資料整理，論文撰寫(xiě)及論文磐辯． 2經(jīng)費(fèi)預(yù)算 見(jiàn)表51。PCR ELISA和RT PCR方法檢查端牡酶活性丑hTERTrmmNA的喪達(dá)． 3研寬方索的可行性分析 ——49— 本實(shí)驗(yàn)研究的中草藥復(fù)方中的幾昧中草藥均經(jīng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)對(duì)鼻咀唐細(xì)胞生長(zhǎng)有顯著的抑制作用，組成復(fù)方后其抗鼻咽瘤作用很可能更為顯著，故本實(shí)驗(yàn)要證實(shí)該中草藥復(fù)方抑制鼻刪癌細(xì)胞生長(zhǎng)的作用應(yīng)是可行的．在此基礎(chǔ)上t進(jìn)一步研究其抑制鼻咽癌細(xì)胞生長(zhǎng)的機(jī)制．宴驗(yàn)選擇的“細(xì)胞凋亡”、“細(xì)胞周期”和“端粒酪活性”等指標(biāo)均是與細(xì)朐生挺和腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)的問(wèn)題，而且也是目前抗腫瘤機(jī)制研究的常用內(nèi)容，因此研究?jī)?nèi)容和技術(shù)路線(xiàn)的設(shè)計(jì)是合理可行的．車(chē)實(shí)驗(yàn)擬采用的檢測(cè)細(xì)胞生陸的三種方法均是得到公認(rèn)的經(jīng)典方法，具有很好的客觀(guān)性和穩(wěn)定性．?dāng)M用于測(cè)定細(xì)胞凋亡，細(xì)胞周期和端拉酶括性的實(shí)驗(yàn)方法既有經(jīng)典的免痤組化法，也有先進(jìn)的分子生物學(xué)方法，具有高敏感性和客觀(guān)性，加之我們已熟悉和王l}立了這些拄術(shù)方法，能保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。2和CNE1細(xì)胞共培養(yǎng)．根據(jù)宴驗(yàn)要求于不同時(shí)間內(nèi)收集細(xì)胞進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)．宴驗(yàn)設(shè)空白對(duì)豫組和5FU(氟尿嘧啶)陽(yáng)性對(duì)照組． (4)藥物對(duì)鼻咽蚵細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制丌j MTT法惻定藥物塒鼻咽癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制率}用MTT法測(cè)定藥物對(duì)鼻咽癌細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)的影響l用軾瓊脂培養(yǎng)法測(cè)定藥物對(duì)鼻咄癌細(xì)胞集蔣形成的抑制率 (2)有效成分分析和質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定用液相和氣相色譜分析藥物提取物中的主要成分，“主要成分含量或特征性峰值作為藥物的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)．保證本制劑的穩(wěn)定性，以供下述實(shí)驗(yàn)應(yīng)用a (3)細(xì)胞培養(yǎng)與藥物處理培養(yǎng)』、低、高分化鼻咽癌細(xì)胞系CNE2和CNE1細(xì)胞 二．諜題的目的和意義 本課腰在原有工作的基礎(chǔ)上，將己經(jīng)證實(shí)具有顯著抗鼻咽癌作用的幾種中草藥組成復(fù)方，研究其對(duì)彝咽府細(xì)胞系生長(zhǎng)的影響殛其可能的分子機(jī)制，為該藥的開(kāi)發(fā)捱供實(shí)驗(yàn)依據(jù)．奉研究對(duì)利用中草藥防治鼻刪癌和開(kāi)拓鼻咽癌脅治的新途徑均有重要的理論和實(shí)際意義， 三、研究方案 1研完日標(biāo) (1)確定中草藥復(fù)方體外對(duì)彝咽癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用。 率室曾利用人低分化鼻咽癌上皮細(xì)跑系(cN E39。而且中草藥通常沒(méi)有放射線(xiàn)和化學(xué)藥物對(duì)機(jī)體所產(chǎn)生的不良反應(yīng)．這給人們尋找腫痛防治新途徑提供了新的思路．然而利用中草藥治療鼻咽癌的研究迄今鮮有報(bào)道．用其復(fù)方制劑_}爵療鼻咽癌的研究更為少見(jiàn)端粒酶活性被抑制．盂志強(qiáng)等發(fā)現(xiàn)恤脾理氣中藥方(由白術(shù)、山檣、黨參、擔(dān)殼、茯苓等組成)可使肝癌細(xì)胞端粒酶的活性受抑，從而抑制腫瘟細(xì)胞的增殖。目前研究喪明，絕大多數(shù)惡性腫出細(xì)胞具有端粒酶活性，因而認(rèn)為腫船的發(fā)生與端粒酶的澈括有關(guān)，赦抑制腫瘤細(xì)胞的端粒酶活性也是抗腫痛研究的新靶點(diǎn)．戴恩來(lái)研究證明扶正抑癌湯(由黃芪、當(dāng)歸、莪術(shù)、
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