第五章開題報告與科研設(shè)計的實施-資料下載頁
2025-03-23 12:01本頁面
【正文】 2和CNE1細(xì)胞用多個不同濃度藥物提取物與CNE39。2和CNE1細(xì)胞共培養(yǎng)．根據(jù)宴驗要求于不同時間內(nèi)收集細(xì)胞進(jìn)行以下實驗．宴驗設(shè)空白對豫組和5FU(氟尿嘧啶)陽性對照組． (4)藥物對鼻咽蚵細(xì)胞生長的抑制丌j MTT法惻定藥物塒鼻咽癌細(xì)胞生長的抑制率}用MTT法測定藥物對鼻咽癌細(xì)胞生長曲線的影響l用軾瓊脂培養(yǎng)法測定藥物對鼻咄癌細(xì)胞集蔣形成的抑制率 (5)藥物對鼻咽癌細(xì)胞弼亡豆其相關(guān)調(diào)控基因表達(dá)的影響 用濾式細(xì)胞j去檢刪細(xì)胞罰亡率；用瓊脂糖凝膠電泳法觀察嗣亡細(xì)胞的DNA梯狀’’憊帶；用朦位末端標(biāo)記法檢測細(xì)胞擱亡的數(shù)量及凋亡率{用免痤組化法和West…h(huán)i t法檢測P53疆cl—Caspas}3的表選． (6)藥物對鼻嘲癌細(xì)胞周期及其相關(guān)悄節(jié)蛋白的彤響 用流式細(xì)胞法檢測細(xì)胞周期百分比}用PCR和w…t…bl t法檢測cyclinDl、cyclinBl，CDCPZZ，pl6等的表達(dá)． (7)藥物x寸舜咽府細(xì)胞端粒酶活性韭hTERTmRNA裘這的髟響分別用TRAP。PCR ELISA和RT PCR方法檢查端牡酶活性丑hTERTrmmNA的喪達(dá)． 3研寬方索的可行性分析 ——49— 本實驗研究的中草藥復(fù)方中的幾昧中草藥均經(jīng)實驗證實對鼻咀唐細(xì)胞生長有顯著的抑制作用，組成復(fù)方后其抗鼻咽瘤作用很可能更為顯著，故本實驗要證實該中草藥復(fù)方抑制鼻刪癌細(xì)胞生長的作用應(yīng)是可行的．在此基礎(chǔ)上t進(jìn)一步研究其抑制鼻咽癌細(xì)胞生長的機制．宴驗選擇的“細(xì)胞凋亡”、“細(xì)胞周期”和“端粒酪活性”等指標(biāo)均是與細(xì)朐生挺和腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)的問題，而且也是目前抗腫瘤機制研究的常用內(nèi)容，因此研究內(nèi)容和技術(shù)路線的設(shè)計是合理可行的．車實驗擬采用的檢測細(xì)胞生陸的三種方法均是得到公認(rèn)的經(jīng)典方法，具有很好的客觀性和穩(wěn)定性．?dāng)M用于測定細(xì)胞凋亡，細(xì)胞周期和端拉酶括性的實驗方法既有經(jīng)典的免痤組化法，也有先進(jìn)的分子生物學(xué)方法，具有高敏感性和客觀性，加之我們已熟悉和王l}立了這些拄術(shù)方法，能保證實驗結(jié)果的可靠性。 4預(yù)期站采 (1)證實該中草藥復(fù)方具有顯著抑制鼻咽癌細(xì)胞生長作用。 (2)查叨談中草藥復(fù)方抑制鼻咽癌細(xì)胞生長是否是通過影響細(xì)胞捌亡的調(diào)控基四而誘導(dǎo)鼻咽癌細(xì)胞弼亡所致． (3)了解該中草藥復(fù)方抑制鼻咽癌細(xì)胞生長的一些重要藥理機制． 口、完成譚題需要的條件 車室8具備完成本實驗所需的基本實驗條件，如CNE一2和CNE1細(xì)胞系、細(xì)胞培養(yǎng)室、細(xì)胞生物實驗室和分子生物學(xué)實驗室盈相關(guān)的儀器設(shè)備．一些大型赍重儀器如流式細(xì)胞儀等可由學(xué)校實驗中心提供使用，藥物提取、分析的儀器和技術(shù)由學(xué)校藥物研究室講助和提供．藥物原材料資源充足．可以采船或購買，實驗所需試劑均可從市場購到．研究經(jīng)費不足部分可由導(dǎo)師課題經(jīng)贄補克． 五、工作進(jìn)度計劃殛經(jīng)費茄算 1．工作進(jìn)虛 第三學(xué)期：完成實驗準(zhǔn)備．藥物原材料和試劑采購．有效成分提取、分析及標(biāo)準(zhǔn)制定． 第四學(xué)期：完成藥物對鼻咽癌細(xì)胞生長抑制實驗和藥物對鼻咽癌細(xì)胞凋亡及其訶控影響實驗． 第五學(xué)期t完成藥物對鼻咽癌細(xì)胞周期和端粒酶活性髟響實驗． 第六學(xué)期；完成需補充的實驗、資料整理，論文撰寫及論文磐辯． 2經(jīng)費預(yù)算 見表51。表}1實驗經(jīng)贄預(yù)算項 目 預(yù)算經(jīng)贊(元)藥物原材料費提取，檢測贊實驗試劑費論文印刷、答辯費合計 l3 D00第二節(jié)科研設(shè)計的實施 科研選胚、實驗設(shè)計以及開題報告完成以后，研究生或科研人員就要集中精力進(jìn)行實驗與觀察t即進(jìn)行科研設(shè)計的實施．根據(jù)醫(yī)學(xué)科研的特點，實驗與觀察分為實驗研究、臨床試驗和現(xiàn)場調(diào)查。各類實驗均有其自身的特點和規(guī)律，因此，實驗人員必須了解這些特點和規(guī)律．遵循有關(guān)的實驗原則，本節(jié)分別對醫(yī)學(xué)科研的三種類型實驗的特點、規(guī)律以及在實施中應(yīng)注意的技術(shù)方法和原則做簡介。一、實驗研究 醫(yī)學(xué)科研的實驗研究利用物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)基礎(chǔ)實驗方法，以闡明人體疾病與健康的機制。在實驗研究中，許多研究設(shè)計都要謝過動物實驗來實施。通過對動物的實驗觀察和分 50一
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