分子生物學(xué)實驗報告陳倩倩(參考版)
2025-03-26 05:28本頁面
【正文】 沉淀離心后，需用70％乙醇洗滌，以除去鹽類及揮發(fā)性較小的異丙醇。四， 沉淀DNA通常使用預(yù)冷無水乙醇，在低溫條件下長時間放置可使DNA沉淀完全。溴化乙錠是一種強烈的誘變劑，有毒性，使用含有這種染料的溶液時，應(yīng)戴手套進行操作。也不要快速擠出吸頭內(nèi)的樣品，避免擠出的空氣將樣品沖出樣品孔。皮膚如不小心沾到酚，應(yīng)立即用堿性溶液、肥皂或大量清水沖洗。四， 而對于染色體DNA 的條帶亮度比較暗淡來說，我們組分離掉的染色體還很成功。二， 超螺旋狀態(tài)的pUC19質(zhì)粒，與標準的對比由亮度可知，我們提取的量大體上還不錯。但是仍有不足之處，蛋白質(zhì)雜質(zhì)含量較多，其原因較多，一個是由于我們未用平衡酚去除蛋白質(zhì)，而是使用了酚、氯仿、異戊醇的混合液，致使蛋白質(zhì)殘留較多。五，實驗結(jié)果及分析RNA條帶或開環(huán)質(zhì)粒DNA或DNA斷片染色體DNA條帶Puc19超螺旋質(zhì)粒λDNA hindⅢλDNA/ HindⅢ Marker一， 我們組的實驗結(jié)果所得的質(zhì)粒DNA純度還算理想。先在其中一個管中加入50微升TE然后帶起溶解倒入另一管，用剩下的50微升TE洗滌第一管，再倒入另一管。5， 加入兩倍體積冰無水乙醇，混勻。確保酚被抽提干凈，此三個步驟，可以根據(jù)具體情況適當重復(fù)，省簡。苯酚具有強氧化性，在此步驟中是使蛋白質(zhì)變性，從而使蛋白質(zhì)沉淀下來2， 加等體積的苯酚：氯仿（1:1）混勻7000rmp離心15min，上清液轉(zhuǎn)入新管。用記號筆在沉淀周圍做好記號③ 質(zhì)粒純化加入RNaseA使其終濃度為50微克每毫升，平分為兩個小
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