分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)(參考版)
2025-01-16 07:55本頁(yè)面
【正文】 蛋白質(zhì)表達(dá)模式研究流程 。 Pulldown技術(shù) 該技術(shù)是固化的、已標(biāo)記的誘餌蛋白或標(biāo)簽蛋白（生物素、 PolyHis或 GST），從細(xì)胞裂解液中釣出與之相互作用的蛋白。 作為規(guī)?；δ艿鞍踪|(zhì)組學(xué)研究的手段的蛋白質(zhì)芯片技術(shù)，是 DNA芯片技術(shù)的擴(kuò)展，即在 固體支持物 表面高密度地固定化排列 探針蛋白點(diǎn)陣 ，以特異地捕獲樣品中的 靶蛋白 ，然后通過(guò)檢測(cè)器對(duì)靶蛋白進(jìn)行定性或定量分析。 熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù) ? 熒光共振能量轉(zhuǎn)移是指兩個(gè)熒光發(fā)色基團(tuán)在足夠靠近時(shí)，當(dāng)供體分子吸收一定頻率的光子后被激發(fā)到更高的電子能態(tài)，在該電子回到基態(tài)前，通過(guò)偶極子 相互作用，實(shí)現(xiàn)了能量向鄰近的受體分子轉(zhuǎn)移（即發(fā)生能量共振轉(zhuǎn)移）。 將“誘餌”蛋白固定化，基于“誘餌”蛋白與“獵物”蛋白之間的相互作用，可將展示庫(kù)中與固定化的“誘餌”蛋白有相互作用的“獵物”蛋白分離純化出來(lái)，再對(duì)“獵物”蛋白進(jìn)行質(zhì)譜鑒定。 ? 兩種離子發(fā)生方法： 基質(zhì)輔助激光解吸附 /離子化（ MALDI)、電噴霧離子化（ ESI) 噬菌體展示技術(shù) 噬菌體展示技術(shù)是將編碼目的蛋白的基因與編碼噬菌體表面蛋白的基因融合后，以 融合蛋白 的形式表達(dá)在 噬菌體表面 的一種技術(shù)。 蛋白質(zhì)分析 ? 蛋白質(zhì)經(jīng)雙向電泳之后 ， 用蛋白質(zhì)水解酶裂解成肽段 ， 可用于質(zhì)譜分析 。 染色質(zhì)免疫共沉淀（ ChiP） ? 在活細(xì)胞狀態(tài)下固定 蛋白質(zhì) DNA復(fù)合物 ，并將其隨機(jī)切斷為一定長(zhǎng)度范圍內(nèi)的染色小片段，然后通過(guò)免疫學(xué)方法沉淀此 復(fù)合體 ，特異性富集目的蛋白結(jié)合的 DNA片段，通過(guò)對(duì)目的片段的純化與檢測(cè)，從而獲得蛋白質(zhì)與 DNA相互作用的信息。 凝膠阻滯 ? 在凝膠電泳中，如果 DNA與某種蛋白質(zhì)相結(jié)合，由于分子量增大，它在凝膠中的遷移作用便會(huì)受到阻滯，在電泳中移動(dòng)的距離變小，表現(xiàn)為相對(duì)滯后。 可簡(jiǎn)
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