離子交換層析分離技術(shù)ppt(1)(參考版)
2025-01-21 19:26本頁(yè)面
【正文】 線性和階梯式梯度溶液分離牛血清白蛋白的圖譜 第五節(jié) 離子交換拄層析應(yīng)用 一 、 去離子水的制備 二 、 制備 、 純化生命物質(zhì) 二、測(cè)定蛋白質(zhì)的等電點(diǎn) 思考題 離子交換劑有那幾部分組成？何為陽(yáng)離子和陰離子交換劑？ 弱酸性和弱堿性的纖維素離子交換劑分別適宜在那些 PH范圍內(nèi)應(yīng)用？為什么？ 解釋選擇系數(shù)、轉(zhuǎn)型及再生的含義？ 梯度緩沖液液如何配制？ 用陽(yáng)離子交換樹脂分離下列氨基酸對(duì)，用 的緩沖液洗脫時(shí)那種氨基酸先被洗脫下來 ?（ 10） (1)Asp和 Lys (2)Arg和 Met (3)Glu和 Val (4)Gly和 Leu (5)Ser和 Ala 試設(shè)計(jì)利用離子交換劑分離一種含等電點(diǎn)分別為、 、 ，并簡(jiǎn)述理由。 目的：使離子交換劑帶上所希望的離子或基團(tuán) 二、分離物質(zhì)的交換 ? 分批法 ? 柱層析法 ? 實(shí)際交換量只能按理論交換量的 25％ 50％計(jì)算 。 第四節(jié) 離子交換拄層析操作方式 一 、 離子交換劑的處理 、 轉(zhuǎn)型和再生 二 、 分離物質(zhì)的交換 三 、 物質(zhì)的洗脫與收集 一、離子交換劑的處理和轉(zhuǎn)型 ? 一般程序：水泡 ， 懸浮 ， 酸或堿浸泡 ， 洗滌至中性 ? 疏水性離子交換劑 用 24倍的 2mol/L NaOH或 2mol/L HCl溶液處理 ? 親水性離子交換劑 用 ； ? 轉(zhuǎn)型與再生：由一種反離子轉(zhuǎn)到另一種反離子的過程 。 緩沖液離子強(qiáng)度的選擇 ① 起始緩沖液能使樣品中有效成分與離子交換劑結(jié)合 ， 一般小于 。 ② PH值與目標(biāo)物 pI的關(guān)系 （ pH=pI177。據(jù)此，強(qiáng)陽(yáng)性和強(qiáng)陰性離于交換劑應(yīng)分別選擇 H型和 OH型；弱酸性和弱堿性離子交換劑應(yīng)分別選擇Na型和 Cl型。 ））或體積（離子交換介質(zhì)的質(zhì)量（）測(cè)得的蛋白質(zhì)質(zhì)量（）交換容量（mlgmggm m ol ?/第三節(jié) 離子交換劑與緩沖液的選擇 一 、 離子交換劑的選擇 二、緩沖液的選擇 一、離子交換劑的選擇 ? 必須考慮的影響因素 1． 陰 、 陽(yáng)離子交換劑的選擇 2．
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