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離子交換層析分離技術(參考版)

2025-01-21 18:37本頁面
  

【正文】 線性和階梯式梯度溶液分離牛血清白蛋白的圖譜 第五節(jié) 離子交換拄層析應用 一 、 去離子水的制備 二 、 制備 、 純化生命物質 二、測定蛋白質的等電點 思考題 離子交換劑有那幾部分組成?何為陽離子和陰離子交換劑? 弱酸性和弱堿性的纖維素離子交換劑分別適宜在那些 PH范圍內應用?為什么? 解釋選擇系數(shù)、轉型及再生的含義? 梯度緩沖液液如何配制? 用陽離子交換樹脂分離下列氨基酸對,用 的緩沖液洗脫時那種氨基酸先被洗脫下來 ?( 10) (1)Asp和 Lys (2)Arg和 Met (3)Glu和 Val (4)Gly和 Leu (5)Ser和 Ala 試設計利用離子交換劑分離一種含等電點分別為、 、 ,并簡述理由。 目的:使離子交換劑帶上所希望的離子或基團 二、分離物質的交換 ? 分批法 ? 柱層析法 ? 實際交換量只能按理論交換量的 25% 50%計算 。 第四節(jié) 離子交換拄層析操作方式 一 、 離子交換劑的處理 、 轉型和再生 二 、 分離物質的交換 三 、 物質的洗脫與收集 一、離子交換劑的處理和轉型 ? 一般程序:水泡 , 懸浮 , 酸或堿浸泡 , 洗滌至中性 ? 疏水性離子交換劑 用 24倍的 2mol/L NaOH或 2mol/L HCl溶液處理 ? 親水性離子交換劑 用 ; ? 轉型與再生:由一種反離子轉到另一種反離子的過程 。 緩沖液離子強度的選擇 ① 起始緩沖液能使樣品中有效成分與離子交換劑結合 , 一般小于 。 ② PH值與目標物 pI的關系 ( pH=pI177。據此,強陽性和強陰性離于交換劑應分別選擇 H型和 OH型;弱酸性和弱堿性離子交換劑應分別選擇Na型和 Cl型。 ))或體積(離子交換介質的質量()測得的蛋白質質量()交換容量(mlgmggm m ol ?/第三節(jié) 離子交換劑與緩沖液的選擇 一 、 離子交換劑的選擇 二、緩沖液的選擇 一、離子交換劑的選擇 ? 必須考慮的影響因素 1. 陰 、 陽離子交換劑的選擇 2.
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