微生物實驗論文word版(參考版)
2025-01-19 05:31本頁面
【正文】 參考文獻(xiàn)、姚曉華、韋秉興、覃培升、屈達(dá)才，2009，稻草秸稈纖維素分解菌的分離篩選，基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)，28（3）：477—480，秦魏，2008，降解纖維素真菌的分離篩選及其環(huán)境適應(yīng)性初探，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)公報，24（5）. 纖維素酶降解機(jī)制及纖維素酶分子結(jié)構(gòu)與功能研究進(jìn)展. 自然科學(xué)進(jìn)展，2003，13(1):21. 纖維素分解菌的分離與特性初探. 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)學(xué)報, 2004,01:019。我們下一步想做的是提取16sRNA，根據(jù)16sRNA的序列特征確定兩種菌的歸屬直至確定種。通過本實驗我們分離到了能分解纖維素的細(xì)菌，得到了他們的純培養(yǎng)。生理生化實驗證明，平板上的黃色菌種和X菌種的水解圈都很大，表明它們的產(chǎn)酶能力都較強(qiáng)，并且黃色菌種水解圈更為清晰表明其酶系較為齊全。不同菌株對纖維素類物質(zhì)的分解能力不一樣。 剛果紅纖維素培養(yǎng)基作為篩選菌種的培養(yǎng)基，可以很快識別出菌種講解纖維素能力的高低，大大方便了篩選得到較純菌種的工作。之后接種到土豆培養(yǎng)基上進(jìn)行純培養(yǎng)。于是，我們重新做了稀釋，最終選擇稀釋了105，106，107 倍等稀釋倍數(shù)較大的富集液用涂布器涂布在纖維素剛果紅平板培養(yǎng)基上，培養(yǎng)了三天后觀察到較明顯的四種菌落，粉紅色菌落，黃色菌落，白色菌落和產(chǎn)生有水解圈的X菌。見圖7?？傮w，黃色菌在不同pH條件下纖維素分解酶活性大小為pH6pH5pH7pH8pH4。（2）滅菌后，在無菌條件下，將黃色菌接種于其中，再放入30℃恒溫箱中培養(yǎng)3天。 不同pH對菌生長的影響（1）培養(yǎng)基成分：無機(jī)鹽營養(yǎng)液1000mL（KH2PO4 2g、MnSO4 、ZnCl2 、CoCl2 、（NH4）2SO4 、MgSO47H2O 、CaCl2 、FeSO4 5mg、水1000mL，pH ）、長15cm的試管中加入上述無機(jī)鹽培養(yǎng)基5mL，加入一條去淀粉處理的濾紙（6cm1cm）垂直于試管中，用酸和堿調(diào)整它們的pH值，使之pH分別約為4，5，6，7，8，9，10，并做好標(biāo)記。圖6 甲基紅實驗結(jié)果表3甲基紅實驗結(jié)果（“+”表示陽性，“—”表示陰性）名稱 結(jié)果黃色菌（菌4）—白色菌（菌1）—粉色菌（菌2）+水解圈菌（菌3）+結(jié)果分析：見圖6，表3滴入甲基紅試劑后，培養(yǎng)黃色菌和白色菌的培養(yǎng)液變?yōu)辄S色，而培養(yǎng)粉色菌和x菌的培養(yǎng)液成為紅色，這說明了四種細(xì)菌在培養(yǎng)的早期均產(chǎn)生有機(jī)酸，但粉色菌和x菌在培養(yǎng)后期仍能維持酸性pH4，而黃色菌和白色菌則轉(zhuǎn)化有機(jī)酸為非酸性末端產(chǎn)物，如乙醇、丙酮酸等，使pH升至大約6。(3)將1支葡萄糖蛋白胨水溶液培養(yǎng)基培養(yǎng)物內(nèi)加入甲基紅試劑2滴，培養(yǎng)基變?yōu)榧t色這為陽性，變?yōu)辄S色的為陰性。見圖5，表2 圖5 淀粉水解實驗結(jié)果表2淀粉水解實驗結(jié)果（“+”表示陽性，“—”表示陰性）項目水解結(jié)果黃色菌（菌4）+白色菌（菌1）+粉色菌（菌2）—水解圈菌（菌3）+結(jié)果分析：其中，加入碘液后不久，黃色菌和x菌就出現(xiàn)明顯的水解圈，不久，白色菌也出現(xiàn)水解圈。關(guān)產(chǎn)淀粉培養(yǎng)物中菌長的程度，打開平板蓋子，滴入少量碘液于平板中，輕輕旋轉(zhuǎn)平板，使碘液均勻鋪滿整個平板。用
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