【正文】 2) 抗藥性的機(jī)理 ① 菌體內(nèi)產(chǎn)生鈍化或分解藥物的酶 ② 改變膜的透性而導(dǎo)致抗藥性產(chǎn)生 ③ 被藥物作用的部位發(fā)生改變 ④ 形成救護(hù)途徑 ⑤ 主動(dòng)外排系統(tǒng) 。 (6) 微生物抗藥性 對(duì)藥物的適應(yīng)性即是抗藥性 。 (4) 干擾素： 作用于病毒的物質(zhì) ， 抑制病毒的復(fù)制 。如氨芐青霉素。 ? 物理方法： ? 化學(xué)方法： ? 生物方法：以供試菌的制菌強(qiáng)度為標(biāo)準(zhǔn) 稀釋法 比濁法 擴(kuò)散法（管蝶法）：牛津杯 擴(kuò)散法 ③ 抗菌譜 抗生素的作用范圍即抗菌譜 。 ④如何解釋磺胺藥物的降效和失效現(xiàn)象 ? 磺胺藥物與 PABA濃度關(guān)系 ? 外源 PABA、 二氫蝶酸、二氫葉酸、嘌呤、嘧啶、核苷酸、絲氨酸、甲硫氨酸 ? 基因突變 (2) 抗生素 1) 定義 抗生素是生物在其生命活動(dòng)中產(chǎn)生的一種次生代謝產(chǎn)物或其人工衍生物 ， 能對(duì)他種生物的生命活動(dòng)產(chǎn)生抑制作用或致死作用 。 ③ 磺胺具有高度選擇毒力的原因 磺胺類藥物是氨苯磺胺衍生物，其結(jié)構(gòu)與對(duì)氨基苯甲酸（ PABA） 類似，而 PABA是葉酸分子組成。 3) 抗代謝藥物的三種作用 ? 競爭酶的活性中心 ? 假冒正常代謝物 ? 代謝途徑終產(chǎn)物結(jié)構(gòu)類似物的反饋調(diào)節(jié) 4） 抗代謝藥物的代表 — 磺胺類藥物的作用機(jī)制： ① 磺胺的作用機(jī)制： 磺胺是細(xì)菌的生長因子對(duì)氨基苯甲酸 （ PABA） 的結(jié)構(gòu)類似物 ， 它可以與細(xì)菌葉酸合成途徑中的二氫蝶酸合成酶發(fā)生競爭性反應(yīng) ， 生成 “ 假二氫葉酸 ” ， 使細(xì)菌的葉酸無法正常合成 ， 從而抑制其生長 。 (1)抗代謝藥物 1) 什么是抗代謝藥物 ？ 又稱代謝拮抗物 、 代謝類似物 ， 是指在結(jié)構(gòu)上與生物體所必需的代謝物相似 ， 可以與正常代謝途徑中特定的酶發(fā)生競爭性反應(yīng) ， 從而阻礙酶的功能 、 干擾代謝的正常進(jìn)行的物質(zhì) 。 理想的消毒劑：殺菌力強(qiáng) ， 使用方便；價(jià)廉；對(duì)人 、 畜無害；能長期保存；溶解度大；無腐蝕性等 。 最低致死劑量 （ MLD） —— 評(píng)定某化學(xué)藥物毒性強(qiáng)弱 指在一定條件下，某化學(xué)藥物能引起試驗(yàn)動(dòng)物群體100%死亡率的最低劑量。 最低抑制濃度 （ MIC） —— 評(píng)定某化學(xué)藥物藥效強(qiáng)弱 指在一定條件下 ， 某化學(xué)藥劑抑制特定微生物的最低濃度 。 （ 一 ） 影響消毒與滅菌的因素： 化學(xué)藥品及濃度的高低； 處理微生物的時(shí)間長短； 微生物的種類； 微生物所處的環(huán)境 。 過濾除菌 （ 三 ） 輻射滅菌： 紫外線、放射性同位素、微波等。 b. 過濾除菌法： 各種濾器 濾膜過濾裝置、燒結(jié)玻璃板過濾器、石棉板過濾器、素?zé)蛇^濾器、硅藻土過濾器 缺點(diǎn)：無法去除病毒和噬菌體 。 (4)影響加壓蒸汽滅菌效果的因素： 1)滅菌物體含菌量的影響； 2)滅菌鍋內(nèi)空氣排除程度的影響； 3)滅菌對(duì)象 pH的影響； ， 微生物較不易死亡； pH＜ ， 易引起微生物死亡 。 這所需要升高的溫度數(shù) ， 即為 Z值 。測定 D值時(shí)的加熱溫度，即在 D的右下角表明。 2） 熱死溫度： 又稱熱死點(diǎn) ， 指在一定時(shí)間內(nèi) （ 一般為 10min） ， 殺死某微生物水懸浮液群體所需的最低溫度 。 c) 連消法的優(yōu)點(diǎn)： ① 因采用高溫瞬時(shí)滅菌，故既可殺滅微生物，又可最大限度減少營養(yǎng)成分的破壞，從而提高了原料的利用率 ； ② 由于總的滅菌時(shí)間較分批滅菌法明顯減少 ， 所以縮短了發(fā)酵罐的占用周期 ， 從而提高了它的利用率； ③ 由于蒸汽負(fù)荷均勻．故提高了鍋爐的利用率； ④ 適宜于自動(dòng)化操作； ⑤ 降低了操作人員的勞動(dòng)強(qiáng)度 。 主要操作是將培養(yǎng)基在發(fā)酵罐外連續(xù)不斷地進(jìn)行加熱 、維持和冷卻 ， 然后才進(jìn)入發(fā)酵罐 。 ：在發(fā)酵行業(yè)里也稱 “ 連消法 ” 。 2) 加壓法： a) 適用范圍： 適合于一切微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室 、 醫(yī)療保健機(jī)構(gòu)或發(fā)酵工廠中對(duì)培養(yǎng)基及多種器材 、 物料的滅菌 。 a) 適用范圍：適用于不耐熱培養(yǎng)基的滅菌 。 b)條件： 100℃ 下數(shù)分鐘 。 （ 2） 種類： 1)常壓法 ： 用較低的溫度處理牛乳或其他液態(tài)食品 ， 殺死其中可能存在的無芽孢病原菌而又不損害營養(yǎng)與風(fēng)味的消毒方法 。 濕熱滅菌： 即以 100℃ 以上的加壓蒸氣進(jìn)行滅菌 。 （ 2） 應(yīng)用范圍： 1） 烘箱內(nèi)熱空氣滅菌法 （ 150~170℃ ， 1~2hr） ： 金屬器械 、 洗凈的玻璃器皿 。 低溫： 缺氧： 干燥： 高滲透壓 ： 高酸度： 高醇度： 加防腐劑： （ 五 ） 化療 ： 利用具有選擇毒性化學(xué)藥物或抗生素來抑制宿主體內(nèi)病原微生物的生長繁殖 ， 借以達(dá)到治療的一種措施 。 防腐是在某些化學(xué)物質(zhì)或物理因子作用下，能防止或抑制微生物生長的一種措施，它能防止食物腐敗或防止其他物質(zhì)霉變。具有消毒作用的化學(xué)物質(zhì)稱為消毒劑 。 （三）消毒 ： —— 殺死一切病原微生物。滅菌后的物體不再有可存活的微生物。 一、幾個(gè)基本概念 （二）滅菌 ： —— 殺死所有微生物。 厭氧菌大規(guī)模的液體培養(yǎng)裝置 發(fā)酵罐 瑞士比歐公司小型發(fā)酵罐 中試發(fā)酵罐 第五節(jié) 有害微生物的控制 （一）抑制和殺滅： 抑制是在亞致死劑量因子作用下導(dǎo)致微生物生長停止，但在移去這種因子后生長仍可以恢復(fù)的生物學(xué)現(xiàn)象。 （ 2）深層液體通氣培養(yǎng)： —— 發(fā)酵罐 發(fā)酵罐結(jié)構(gòu)： 鋼質(zhì)圓筒形直立容器，有扁球形的底和蓋，其高與直徑之比一般為 1： 2~，還有一套必要的附屬裝置。 厭氧的堆積培養(yǎng)法： 白酒生產(chǎn)中的大型深層地窯堆積式固體發(fā)酵。 （ 4）臺(tái)式發(fā)酵罐： 厭氧菌的液體培養(yǎng)： ? 有機(jī)還原劑：巰基乙酸、半胱氨酸、維生素 C或皰肉（牛肉小顆粒）等 ) ? 無機(jī)還原劑：鐵絲等 ? 氧氣隔絕措施：封以凡士林 — 石蠟層 五、生產(chǎn)實(shí)線中的微生物培養(yǎng)裝置 （一）固態(tài)培養(yǎng)法 好氧菌的曲法培養(yǎng)： （ 1）原理： 將接過種的固體基質(zhì)薄薄地?cái)備佋谌萜鞅砻?，這樣，既可使微生物獲得充分的氧氣，又可讓微生物在生長過程中產(chǎn)生的熱量及時(shí)釋放。即將三角瓶內(nèi)培養(yǎng)液用 8層紗布包住瓶口，以取代一般的棉花塞（利于通氣和防止雜菌污染），同時(shí)降低瓶內(nèi)的裝液量，把它放到往復(fù)式或旋轉(zhuǎn)式搖床上作有節(jié)奏的振蕩，以達(dá)到提高溶氧量的目的。此法一般也僅適宜培養(yǎng)兼性厭氧茵。此法的通氣效果一股均不夠理想，僅適合培養(yǎng)兼性厭氧茵。 （ 3）亨蓋特（ Hungate） 滾管技術(shù) （ 4）厭氧罐技術(shù)： （ 5）厭氧手套箱技術(shù)： 厭氧培養(yǎng)設(shè)備 添加刃天青后的培養(yǎng)基放置 3天后 厭氧手套箱 (二 )液體培養(yǎng) 好氧菌的液體培養(yǎng)： 在進(jìn)行液體培養(yǎng)時(shí)，一般可通過增加液體與氧的接觸面積或提高氧分壓來提高溶氧速率，具體措施有： ①淺層液體培養(yǎng)； ②利用往復(fù)式或旋轉(zhuǎn)式搖床對(duì)三角瓶培養(yǎng)物作振蕩培養(yǎng)； ③在深層液體培養(yǎng)器的底部通入加壓空氣，并用氣體分布器使其以小氣泡形式均勻噴出； ④對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行機(jī)械攪拌，并在培養(yǎng)器的壁上設(shè)置阻擋裝置。 2） Spray皿或 Bray皿：利用皿底有兩個(gè)相互隔開的空間，其中之一故焦性沒食子酸，另 — 則放 NaoH溶液，待在皿蓋平板上接入待培養(yǎng)的厭氧菌后，立即密閉之。 （ 1）高層瓊脂柱： 用加有還原劑的固體或半固體培養(yǎng)基裝入試管中，以培養(yǎng)相應(yīng)的厭氧菌。 厭氧菌的培養(yǎng)： 培養(yǎng)厭氧菌除了一是需要特殊的培養(yǎng)裝置，二是還要配制特殊的培養(yǎng)基。 : 用二氧氣碳驅(qū)代氧氣；用氮?dú)怛?qū)代氧氣；用真空驅(qū)代氧氣；用氫氣驅(qū)代氧氣；用混和氣體驅(qū)代氧氣。 ： 用焦性沒食子酸吸收氧氣；用磷吸收氧氣；用好氧菌與厭氧混合培養(yǎng)吸收氧氣；用植物組織如發(fā)芽的種子吸收氧氣；用產(chǎn)生氫氣與氧化合的方法除氧。 微生物在培養(yǎng)時(shí)，不需要氧氣參加。三角燒瓶液體培養(yǎng)多數(shù)是通過搖床振蕩，使外界的空氣源源不斷地進(jìn)入瓶中。 微生物在培養(yǎng)時(shí)，需要有氧氣加入，否則就不能生長良好。 二、微生物培養(yǎng)技術(shù)發(fā)展的特點(diǎn)： 從少量培養(yǎng)發(fā)展到大規(guī)模培養(yǎng)；