生物醫(yī)學(xué)概論生化第2章生物大分子(參考版)
2025-01-07 14:18本頁面
【正文】 端核苷酸序列 。包括 催化性 DNA和 催化性 RNA兩大類。 * 舉例 有機(jī)磷化合物 ?? 羥基酶 解毒 解磷定 (PAM) 重金屬離子及砷化合物 ?? 巰基酶 解毒 二巰基丙醇 (BAL) 目 錄 2. 可逆性抑制作用 * 概念 抑制劑以 非共價(jià)鍵 與 酶 可逆性結(jié)合 ， 使酶的活性降低或喪失； 抑制劑可用透析 、 超濾等方法除去 。 目 錄 （六）抑制劑對酶促反應(yīng)的影響 ?酶的抑制劑 (inhibitor) 凡能使酶的催化活性下降而不引起酶蛋白變性的物質(zhì)稱為酶的抑制劑。 臨床上的低溫麻醉 ? 減少組織細(xì)胞的代謝程度 ， 使機(jī)體耐受手術(shù)時(shí)氧和營養(yǎng)物質(zhì)的缺乏 目 錄 （四） pH對酶促反應(yīng)速度的影響 解離狀態(tài)： ? 蛋白質(zhì)的極性基團(tuán) ? 輔助因子的荷電狀態(tài) ? 底物的解離狀態(tài) 而不同的解離狀態(tài)或直接影響酶與底物的結(jié)合 , 或影響酶的空間結(jié)構(gòu) , 從而改變酶的活力 目 錄 ?最適 pH (optimum pH)：酶催化活性最大時(shí)的環(huán)境 pH。C 溫度對淀粉酶活性的影響 目 錄 ?最適溫度 (optimum temperature)： 酶促反應(yīng)速度最快時(shí)的環(huán)境溫度。 ?關(guān)系式為： V = k3 [E] 0 V [E] 當(dāng) [S][E]時(shí)， Vmax = k3 [E] 酶濃度對反應(yīng)速度的影響 目 錄 ?雙重影響 溫度升高 ， 酶促反應(yīng)速度 升高 由于酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì) ， 溫度升高 ， 可引起酶的變性 ， 從而反應(yīng)速度 降低 。 ② 意義： a) Km是酶的特征性常數(shù)之一； Km 只與酶的性質(zhì)有關(guān) , 與酶的濃度無關(guān) b) Km可近似表示酶對底物的親和力 （反比） c) 同一酶對于不同底物有不同的 Km值。 Menten) 中間產(chǎn)物 酶促反應(yīng)模式 —— 中間產(chǎn)物學(xué)說 E + S k1 k2 k3 ES E + P （一）底物濃度對酶促反應(yīng)速度的影響 目 錄 ※ 1913年 Michaelis和 Menten提出反應(yīng)速度與底物濃度關(guān)系的數(shù)學(xué)方程式 ， 即米－曼氏方程式 ， 簡稱 米氏方程式 (Michaelis equation)。 ※ 研究一種因素的影響時(shí)，其余各因素均恒定，即遵循齊同對比原則。 目 錄 （一）酶能降低反應(yīng)的活化能 三、酶的作用機(jī)理 （二）中間產(chǎn)物學(xué)說 目 錄 研究酶促反應(yīng)速度及其影響因素的作用規(guī)律。 凝血系統(tǒng)和纖維蛋白溶解酶： 有的酶原可以視為酶的儲(chǔ)存形式。 ?酶原的激活 在一定條件下，酶原向有活性酶轉(zhuǎn)化的過程。 活性中心外的必需基團(tuán) 目 錄 目 錄 （三） 同工酶 同工酶 定義 同工酶 (isoenzyme)是指催化相同的化學(xué)反應(yīng)，而酶蛋白的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)及免疫學(xué)性質(zhì)不同的一組酶。 （二）酶的活性中心 目 錄 酶分子必需基團(tuán)在空間結(jié)構(gòu)上彼此靠近，構(gòu)成 特定的空間構(gòu)象 ，能 與底物特異結(jié)合 并將底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物 的區(qū)域。 目 錄 （四）可調(diào)性 ?對酶生成與降解量的調(diào)節(jié) ?酶催化效力的調(diào)節(jié) ?通過改變底物濃度對酶進(jìn)行調(diào)節(jié)等 酶促反應(yīng)受多種因素的調(diào)控，以適應(yīng)機(jī)體對不斷變化的內(nèi)外環(huán)境和生命活動(dòng)的需要。 立體結(jié)構(gòu)特異性 (stereo specificity)： 作用于 立體異構(gòu)體 中的一種。 目 錄 （二）特異性 絕對特異性 (absolute specificity)： 只能作用于 特定結(jié)構(gòu)的底物 ，進(jìn)行一種專一的反應(yīng)，生成一種特定結(jié)構(gòu)的產(chǎn)物 。 酶比一般催化劑更有效 地降低反應(yīng)的 活化能 。 ? 酶的催化 不需要 較高的反應(yīng)溫度 。 目 錄 酶與一般催化劑的共同點(diǎn) ? 在反應(yīng)前后沒有質(zhì)和量的變化； ? 只能催化熱力學(xué)允許的化學(xué)反應(yīng)； ? 只能加速可逆反應(yīng)的進(jìn)程，而不改變反應(yīng)的平衡點(diǎn)。 ? 核酸分子雜交的應(yīng)用 目 錄 分子雜交實(shí)驗(yàn) ① ② ③ 目 錄 DNA芯片技術(shù) 目 錄 5? Primer 1 5? Primer 2 Cycle 2 Cycle 1 5? 5? 5? 5? 5? 5? Template DNA PCR技術(shù)的工作原理 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 目 錄 Cycle 3 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 25～ 30 次循環(huán)后，模板 DNA的含量可以擴(kuò)大 100萬倍以上。 ?監(jiān)定兩種核酸分子間的序列相似性 。 這種現(xiàn)象稱為 核酸分子雜交 。 目 錄 ?在 DNA變性后的復(fù)性過程中 ， 將不同種類的DNA單鏈分子或 RNA分子放在同一溶液中 ， 只要兩種單鏈分子之間存在著一定程度的堿基配對關(guān)系 ， 在適宜的條件可以在不同的分子間形成 雜化雙鏈 (heteroduplex)。 ?減色效應(yīng)： DNA復(fù)性時(shí) ， 其溶液 A260降低 。 解鏈溫度 (melting temperature， Tm) 目 錄 ? 鏈長越長 ， 解鏈溫度越高 ? G+C 含量越高 ， 解鏈溫度越高 。 ? DNA解鏈時(shí)的 紫 外吸收變化 目 錄 ? DNA的解 鏈 曲線 連續(xù)加熱 DNA的過程中以溫度相對于 A260值作圖 ， 所得的曲線稱為 解鏈曲線 。 DNA變性只改變其二級結(jié)構(gòu)，并不改變它的堿基序列。 這一特性常用作核酸的定性和定量分析。 ?rRNA 與核糖體蛋白結(jié)合組成 核糖體(ribosome)， 為蛋白質(zhì)的合成提供場所 。 ?tRNA上的反密碼子通過堿基互補(bǔ)識(shí)別mRNA上的密碼子 。 目 錄 ?核苷酸鏈中形成多處莖環(huán) (stemloop)結(jié)構(gòu) 。 目 錄 （二） tRNA的結(jié)構(gòu)與功能 ?轉(zhuǎn)運(yùn) RNA(transfer RNA, tRNA)在蛋白質(zhì)合成過程中作為各種氨基酸的載體 , 將氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)至核糖體 。 ? mRNA的初級產(chǎn)物為 不均一核 RNA(hnRNA)。 目 錄 動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)主要的 RNA種類及功能 RNA種類 縮寫 分布 功能 信使 RNA mRNA 細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、線粒體 蛋白質(zhì)合成模板 轉(zhuǎn)運(yùn) RNA tRNA 細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、線粒體 轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸 核糖體 RNA rRNA 細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、線粒體 核糖體組成成分 不均一核 RNA hnRNA 細(xì)胞核 成熟 mRNA的前體 核內(nèi)小 RNA snRNA 細(xì)胞核 參與 hnRNA的剪接、轉(zhuǎn)運(yùn) 目 錄 （一） mRNA的結(jié)構(gòu)與功能 ?信使 RNA(messenger RNA, mRNA)是細(xì)胞內(nèi)合成蛋白質(zhì)的模板 。 ? RNA比 DNA小的多 。 目 錄 三、
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