蛋白質(zhì)綜合實驗ppt課件(參考版)
2024-11-28 20:14本頁面
【正文】 ? 實驗十六：目的要求、原理、操作步驟、結果結果、注意事項。 實驗結果 電泳條帶 聚丙烯酰胺凝膠電泳血清蛋白質(zhì)區(qū)帶分布圖 實驗報告的內(nèi)容 ? 實驗二：目的要求、原理、操作步驟、結果與計算、注意事項。 3． TEMED要密封保存，過硫酸銨溶液最好當天配制，以防止氧化失效。可貯存 1～ 2個月。大量操作時應在通風櫥中進行。 8． 脫色：將膠取出，蒸餾水沖洗數(shù)次后，放入脫色液中， 數(shù)小時換液一次，直至背景清晰為止（或直接用少許水煮到背景清晰為止）。用剪刀輕輕撬起膠模的 下方一側，一個玻璃板即可取下，用刀片輕輕將膠的兩側劃一下，掀起膠的一角，慢向前推同時注水，靠水流壓力和潤滑作用，將玻璃板與膠分開。 6. 電泳 :連接直流穩(wěn)壓電源，矮板連負極，打開電源開關。 5. 上樣：將樣品梳拔出，用電極緩沖液沖洗樣品孔。倒入濃縮膠插好樣品梳，注意避免汽泡出現(xiàn)，室溫下聚合 20min。 3. 制備濃縮膠：配制好 4%濃縮膠。 (電泳槽按要求清洗干凈 )。 8．脫色液： 20%甲醇， 7%～ 10%的冰乙酸 (現(xiàn)用現(xiàn)配 ) 9．凝膠配制：實驗用分離膠為 10%，濃縮膠為 3%（現(xiàn)用現(xiàn)配） (一 )凝膠的制備 (二 )加樣 (三 )電泳 (四 )剝膠 (五 )染色 (六 )脫色 基本實驗步驟 實驗步驟 ：將兩塊洗凈的玻璃板，按要求對齊，夾好。 6．樣品染色液（ 考馬斯亮蘭染色液） ： %考馬斯亮蘭 R一 250， 454ml 50%甲醇， 46ml冰乙酸定容到 5O0ml。 4． 10%過硫酸銨 (AP) ：用少量煮過 10分鐘并冷卻的蒸餾水配制，在 4℃ 可存 34周， 100ml。 由于具有以上三種效應，所以此方法分離效果好，分辨率高，血清蛋白在紙上電泳僅能分成 5～ 7個組分，而在聚丙烯酰胺凝膠電泳中可分出 12～ 30個組分。 本實驗采用聚丙烯酰胺凝膠不連續(xù)體系與非解離體系，電泳遷移率的大小與帶電粒子的大小、形狀和帶凈電荷的數(shù)量等因素有
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