蛋白組學(xué)翻譯后修飾(參考版)
2025-05-17 06:23本頁面
【正文】 糖基化的蛋白質(zhì)組學(xué)研究 糖基化蛋白的生物學(xué)意義 ? 在真核細(xì)胞中，有一半以上的蛋白質(zhì)被糖基化 ? 蛋白質(zhì)糖基化在蛋白質(zhì)折疊、蛋白質(zhì)定位和轉(zhuǎn)運、蛋白質(zhì)溶解性、抗原性以及細(xì)胞與細(xì)胞的相互作用等方面都有著重要的作用 ? 細(xì)胞膜的許多蛋白質(zhì)是以糖蛋白形式存在 ? 糖低聚物在細(xì)胞間信號傳遞中也起了重要的作用 ? 成為免疫系統(tǒng)調(diào)控和癌癥治療的最重要的線索之一 ? 糖鏈比核酸和蛋白質(zhì)在結(jié)構(gòu)上更具有可變性，復(fù)雜性 糖苷鍵類型 ? N連接：天冬酰胺序列子 AsnXThr/Ser ? O連接 :Ser/Thr ? 糖基磷脂酰肌醇錨 (glycosyl phophotidylinositol, GPI)：通常是一些細(xì)胞膜蛋白或細(xì)胞壁蛋白，通過肌醇和細(xì)胞膜磷脂層結(jié)合 蛋白質(zhì)糖基化研究的基本目標(biāo) ? 尋找編碼糖蛋白的基因（即基因組信息）； ? 尋找糖基化位點（即糖基化位點信息） ； ? 解析糖鏈及糖基化肽段的結(jié)構(gòu)（即結(jié)構(gòu)信息） ； ? 研究糖基化的功能（即功能信息） 蛋白質(zhì)組學(xué)分析糖蛋白 ? 糖含量 ? 糖苷鍵類型 ? 糖基化位點 糖含量的測定 ? 比較糖苷內(nèi)切酶作用前后糖蛋白的分子量 核糖核酸酶 B中糖基含量測定 糖苷鍵酶 F作用前 糖苷鍵酶 F作用后 糖苷鍵酶 F：切斷 N連接五糖核心最內(nèi)側(cè)的GlcNAcGlcNAc，剩一個GlcNAc 糖基化類型及其位點的分析 ? 糖苷內(nèi)切酶和蛋白酶結(jié)合的方法 ? 先用糖苷內(nèi)切酶消化，再用蛋白酶消化，通過分析糖苷酶作用前后 MS發(fā)生位移的肽段，即可確定含糖基化的肽段 ? 結(jié)合串聯(lián)質(zhì)譜，可進(jìn)
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