工業(yè)微生物菌種保藏技術(shù)(ppt52)-工藝技術(shù)(參考版)
2024-08-20 21:15本頁面
【正文】 3．淘汰已衰退的個體 ，如低溫抗性篩選。 方法 2．通過宿主體內(nèi)生長進行復(fù)壯 。 4．采用有效的菌種保藏方法 ， 有必要研究和采用更有效的保藏方法以防止菌種生產(chǎn)性狀的衰退 （二）菌種的復(fù)壯 1．純種分離 。 3．利用不同類型的細(xì)胞進行接種傳代 。 大量群體中的自發(fā)突變 菌種的復(fù)壯： a） 純種分離； b）通過寄主體進行復(fù)壯； 菌種衰退的特點： 實踐中關(guān)于防止菌種衰退和進行復(fù)壯的經(jīng)驗 （一）衰退的防止 1．控制傳代次數(shù) 2．創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件 在實踐中，有人發(fā)現(xiàn)如創(chuàng)造一個適合原種的生長條件，就可在一定程度上防止菌種衰退。 二、菌種的衰退與復(fù)壯 1） 從衰退的菌種群體中把少數(shù)個體再找出來，重新獲得具有原有典型性狀的菌種。 復(fù)壯的概念 狹義的復(fù)壯僅是一種消極的措施，它指的是在菌種已發(fā)生衰退的情況下，通過純種分離和測定生產(chǎn)性能等方法，從衰退的群體中找出少數(shù)尚未衰退的個體，以達到恢復(fù)該菌原有典型性狀的一種措施； 而廣義的復(fù)壯則應(yīng)是一項積極的措施，即在菌種的生產(chǎn)性能尚未衰退前就經(jīng)常有意識地進行純種分離和生產(chǎn)性能的測定工作，以期菌種的生產(chǎn)性能逐步有所提高。 開始時，在一個大群體中僅個別細(xì)胞發(fā)生負(fù)變，這時如不及時發(fā)現(xiàn)并采取有效措施，而一味移種傳代，則群體中這種負(fù)變個體的比例逐步增大，最后讓它們占了優(yōu)勢，從而使整個群體表現(xiàn)出嚴(yán)重的衰退。 衰退還表現(xiàn)在抗不良環(huán)境條件（抗噬菌體、抗低溫等）能力的減弱等。 生長速度緩慢，產(chǎn)孢子越來越少。 其他原有的典型性狀變得不典型時，也是衰退。這說明菌種的生產(chǎn)性狀也是不進則退的。 相反，如不自覺、認(rèn)真地去進行人工選擇，大量的自發(fā)突變菌株就會趁機泛濫，最后導(dǎo)致菌種的衰退（ degeneration）。 第十節(jié) 菌種的衰退與復(fù)壯 在生物進化的歷史長河中，遺傳性的變異是絕對的，而它的穩(wěn)定性反而是相對的；退化性的變異是大量的，而進化性的變異卻是個別的。 成功的菌種長期保藏方法之有價值的指標(biāo)包括在保藏 6個月 、 1年或更長時間后存活百分率(或存活單位 )。 加速保藏試驗可用于預(yù)測保藏過程中保藏培養(yǎng)物的穩(wěn)定性 。 在保藏時定期檢測菌種活力 ， 以確定保藏培養(yǎng)物的保藏期限和保藏方法的可靠性 ， 以及確定在實際保藏過程中出現(xiàn)的細(xì)胞死亡程度和遺傳穩(wěn)定性 。 不同菌種保藏方法比較 細(xì)菌的保藏 保藏方法 適合菌種 定期移植保藏法 固氮菌屬 芽孢桿菌屬 棒狀桿菌屬 歐文氏菌屬 黃桿菌屬 微球菌屬 分枝桿菌屬 假單孢桿菌屬 根瘤菌屬 埃希氏桿菌屬 液體石蠟保藏法 無色細(xì)菌屬 氣單孢菌屬 芽孢桿菌屬 纖維單孢菌屬 色桿菌屬 埃希氏桿菌屬 克雷伯氏菌屬 微球菌屬 丙酸桿菌屬 鏈球菌屬 變形桿菌屬 根瘤菌屬 弧菌屬 凍結(jié)保藏法 醋酸桿菌屬 無色細(xì)菌屬 色桿菌屬 纖維粘菌屬 芽孢桿菌屬 鏈球菌菌屬 發(fā)光桿菌屬 變形桿菌屬 假單孢桿菌屬 冷凍干燥保藏法 醋酸桿菌屬 節(jié)桿菌屬 短桿菌屬 芽孢桿菌屬 鏈球菌菌屬 棒狀桿菌屬 柄細(xì)菌屬 乳桿菌屬 分枝桿菌屬 變形桿菌屬 假單孢桿菌屬 歐文氏菌屬 纖維單孢菌屬 干燥保藏法 產(chǎn)芽孢細(xì)屬 液氮保藏法 大多數(shù)細(xì)菌 放線菌菌種的保藏 保藏方法主要有： 沙土管法、冷凍干燥法、液氮冷凍法 放線菌菌種的長期保藏依保藏放線菌的分生孢子為主要方式。 而且在運用基因工程菌進行發(fā)酵時 ， 抗生素的加入可幫助維持質(zhì)粒復(fù)制與染色體復(fù)制的協(xié)調(diào) 。 一般情況下當(dāng)細(xì)胞丟失這些質(zhì)粒時 ， 生長速度會加快 。 基因工程菌的保藏 由載體質(zhì)粒等攜帶的外源 DNA片段通常是遺傳不穩(wěn)定的 、 且很易丟失其外源質(zhì)粒復(fù)制子 。烘干后碾碎，用 100目篩子過篩，
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