核酸類(lèi)藥物-wenkub.com
2025-02-03 16:41 本頁(yè)面
【正文】 ? 產(chǎn)生胞二磷膽堿的反應(yīng)體系 （ g/L）：葡萄糖 140；MgSO47H2O 6； 5’CMPNa2 20；磷酸膽堿 20；紅酵母菌體（析干） 50；反應(yīng)體系中保持磷酸緩沖液 pH 、于 30℃ 反應(yīng) 28h，產(chǎn)胞二磷膽堿 ，對(duì) 5‘CMP收率 %。結(jié)構(gòu)式見(jiàn)下圖： （六）胞二磷膽堿－生產(chǎn)工藝 ? （一）酶合成法 ? 胞二磷膽堿 由微生物菌體（如啤酒酵母）所提供的酶系催化胞苷酸和磷酸膽堿而合成 ? 反應(yīng)體系 為：磷酸二氫鉀 氫氧化鈉緩沖液（ ）200mol/ml， CMP 20μmol/ml ，磷酰膽堿 30 μmol/ml ，葡萄糖 100μmol/ml ， MgSO4 ? 臨床已試用于腫瘤、血液病、病毒肝炎及痘類(lèi)毒性感染等多種疾患 ,對(duì)帶狀皰疹有較好的療效 ,對(duì)病毒性肝炎 ,病毒性角膜炎和扁平苔蘚有明顯療效 ,對(duì)乙型腦炎 ,流行性腮腺炎 ,類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等有療效 . （六）胞二磷膽堿 ? 1954年 Kennedy博士等人發(fā)現(xiàn)了 胞二磷膽堿 ， 隨后化學(xué)合成并確定了分子結(jié)構(gòu) 。 （五）聚肌胞苷酸 (聚肌胞 ,PolyI:C） ? 生產(chǎn)工藝： ? 5‘核苷二磷酸吡啶鹽的制備 ? 5’核苷酸 (5’肌苷酸或 5’胞苷酸 )+嗎啡林 +雙環(huán)己基羰二 ? 亞胺 5’核苷酸嗎啡林鹽 +三正丁胺磷酸鹽無(wú) ? 水吡啶 5’核苷二磷酸吡啶鹽 (CDP吡啶鹽 ,IDP吡啶鹽 ) 乙醇 ,830C回流 （五）聚肌胞苷酸 (聚肌胞 ,PolyI:C） ? ? （ 1）酶的制備 :培養(yǎng)大腸桿菌 ? 抽提液 ? 收集 破細(xì)胞 鏈霉素沉淀去核酸 硫酸銨分布鹽析 DEAE纖維素層析 （五）聚肌胞苷酸 (聚肌胞 ,PolyI:C） ? （ 2）固定化載體的制備 ? 瓊脂糖融化 ? 固定化載體 ? （ 3）多核苷酸磷酸化酶的固定化 ? 將分離純化的酶液滴加入冰浴中的載體 ,得到共價(jià)結(jié)合的固定化多核苷酸磷酸化酶 . ? 斯班 80 甲苯 ,四氯化碳 攪拌冷卻后與環(huán)氧氯丙烷鉸鏈制成珠狀 對(duì) β硫酸酯乙砜基苯胺 醚化 NaNO2+HCL重氮化 （五）聚肌胞苷酸 (聚肌胞 ,PolyI:C） I:C的制備 ? （ 1）底物預(yù)處理 ? CDP吡啶鹽轉(zhuǎn)成鋰鹽， IDP吡啶鹽轉(zhuǎn)成鈉鹽。由于易被胃腸道粘膜和肝中胞嘧啶核苷脫氨酶作用而失活，故口服無(wú)效，只能注射。 最優(yōu)秀菌株是乙酰短桿菌AJ1442。 （三）三氮唑核苷 ? 1．采用前段與后段由兩個(gè)不同的酶催化，即前段使用 嘧啶核苷磷酸化酶 （ upase），后段使用 嘌呤核苷磷酸化酶（ Pynpase），而且已經(jīng)篩選到一株同時(shí)產(chǎn)生這兩種酶的菌株，即產(chǎn)氣腸桿菌。 （三）三氮唑核苷 ? 三氮唑核苷 的另一特點(diǎn)是 對(duì)病毒作用點(diǎn)多 ， 不易使病毒產(chǎn)生抗藥性 。 (Ⅴ )再在甲醇胺中進(jìn)行環(huán)化 ,得關(guān)鍵中間體 8,2’O環(huán)化腺苷 (Ⅵ )。 （二）阿糖腺苷 ? (2) 以 5’AMP為原料的化學(xué)合成法 ? 將 5’AMP(Ⅰ )進(jìn)行選擇性的對(duì)甲苯磺?；磻?yīng) ,得到主要產(chǎn)物 2’O對(duì)甲苯磺?；佘?5’單磷酸酯 (Ⅱ )。 或稱(chēng)腺嘌呤阿拉伯糖苷 . （二）阿糖腺苷－ 作用與用途 ? 阿糖腺苷 是 廣譜 DNA病毒抑制劑 ，臨床上用于治療皰疹性角膜炎，單純皰疹病毒感染引起的腦炎和乙型肝炎，與 IFN一樣，能夠直接作用于病毒。 （一）疊氮胸苷（ AZT） ? 后來(lái)，美國(guó)又批準(zhǔn)一個(gè)治療艾滋病的新藥，稱(chēng)為 雙脫氧胸苷 （ DDS），是 HIV復(fù)制的抑制劑，可代替 AZT。 ? 1990年 5月 《 新英格蘭醫(yī)學(xué)雜志 》 發(fā)表了第 2個(gè)治療愛(ài)滋病的藥物，稱(chēng)雙脫氧肌苷（ DDI），商品名稱(chēng) Videx，由美國(guó)國(guó)立癌癥研究所于 1985年發(fā)現(xiàn)的。是第一種被美國(guó) FDA批準(zhǔn)用于臨床的治療艾滋病 的新藥。 ? 以 產(chǎn)氨短桿菌 為出發(fā)株，用 發(fā)酵法 直接產(chǎn)生 AMP或 GMP是很困難的。 2．發(fā)酵法生產(chǎn)鳥(niǎo)苷和黃苷（ G， X） ? 鳥(niǎo)苷生產(chǎn)菌性狀 ：以肌苷產(chǎn)生菌為出發(fā)菌株，再增加德夸菌素抗性， 解除 GMP對(duì)酶 PRPP轉(zhuǎn)酰胺酶 、 IMP脫氫酶 、 GMP合成酶 的反饋抑制 ? 黃苷生產(chǎn)菌性狀與鳥(niǎo)苷產(chǎn)生菌株相類(lèi)似，關(guān)鍵是要 缺失 GMP合成酶 。 ? ②短小芽孢桿菌受 PO43的抑制。 ? 而枯草桿菌的 腺嘌呤、 黃嘌呤缺陷型，當(dāng)培養(yǎng)基中提供 限量鳥(niǎo)嘌呤 時(shí)就累積腺苷。 ? 枯草桿菌 的嘌呤核苷酸合成途徑。 氯化氧磷 肌苷，懸浮于磷酸三乙酯中 肌苷酸（ IMP ） 0 ℃ 核苷的制備 ? 核苷 是多種核苷類(lèi)藥物的原料，這些藥物通常是生物自身能夠合成的組成遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)類(lèi)似物，目前已用于臨床的此類(lèi)藥物有幾十種 ? 另外，核苷的 發(fā)酵法 生產(chǎn)水平大大高于同類(lèi)結(jié)構(gòu)核苷酸的發(fā)酵水平，因此肌苷酸鈉，鳥(niǎo)苷酸鈉可分別由肌苷和鳥(niǎo)苷經(jīng) 化學(xué)磷酸化 方法合成，ATP由 腺苷酯法 合成。 ? 菌種 B： 5’核苷酸分解力微弱， GMP合成酶活
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