培養(yǎng)基質(zhì)量保證與質(zhì)量控制-wenkub.com
2025-01-11 06:02 本頁(yè)面
【正文】 為避免反復(fù)凍溶，可分裝于小離心管中，置低溫保藏?？赏瑫r(shí)在一個(gè)平板上接種多個(gè)菌株，但劃線不能交叉 ? 按標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的培養(yǎng)時(shí)間和溫度對(duì)接種后的平板進(jìn)行培養(yǎng) 結(jié)果解釋 ? 培養(yǎng)后按以下方法計(jì)分： ? 0表示無(wú)生長(zhǎng) ? 1表示微弱生長(zhǎng) ? 2表示生長(zhǎng)良好 ? 目標(biāo)菌得分應(yīng)為 2，并有典型的菌落外觀、大小和形態(tài) ? 非目標(biāo)菌的生長(zhǎng)應(yīng)部分或全部被抑制 質(zhì)控菌株要求 ? 標(biāo)準(zhǔn)菌株：來(lái)自國(guó)際 /國(guó)家菌種保藏中心 (本標(biāo)準(zhǔn)要求為 ATCC菌株 )或經(jīng) ISO9002認(rèn)證的經(jīng)銷商提供的菌株 (有資質(zhì) ) ? 制備儲(chǔ)備菌株和工作菌株時(shí)一次制備多份，每株菌原則上不能重復(fù)使用 ? 通常工作菌株不能再傳代，但處理得當(dāng)可再次使用 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株 (Reference stock) ? 標(biāo)準(zhǔn)菌株在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過(guò)一次傳代獲得的一組完全相同的菌株 ? 傳代菌株應(yīng)當(dāng)完全具備標(biāo)準(zhǔn)菌株的所有性狀 ? 傳代時(shí)要保證一定的量 (減少傳代次數(shù) ) ? 每株菌株盡量避免多次使用 ? 采用不同的保存方法保存期限不同 ? 如凍干法 ,液氮法 ,穿刺法 ,液體石蠟法 ,斜面保存法等 (見(jiàn)后 ) 菌種保藏方法 ? 液氮保存法 ? 低溫保存法 ? 液體石蠟保存法 液氮保存法 保存 制備細(xì)胞懸液，甘油或二甲亞砜作保護(hù)劑 分裝無(wú)菌安瓿瓶，每管 預(yù)凍至 40℃ （控制溫度下降速率為 1℃ ／ min） 放入液氮生物貯存罐中氣相保存 恢復(fù) 直接浸入 38℃ 水浴中解凍 5～ 10min 轉(zhuǎn)接于適宜培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng) 注意：大多數(shù)屬種適于慢速凍結(jié)和快速解凍 適用菌種 病毒 支原體 各類細(xì)菌、放線菌、酵母菌、絲狀真菌 藍(lán)藻 動(dòng)物細(xì)胞 液體石蠟覆蓋保存法 ? 傳代保存的變相方法 ? 能夠適當(dāng)?shù)匮娱L(zhǎng)保存時(shí)間 ? 優(yōu)質(zhì)石蠟 121℃ 高壓滅菌 2小時(shí)， 160℃干燥箱中滅菌 1— 2小時(shí)，放冷備用 ? 液體石蠟的深度以 1cm左右 ? 保存期通常 6個(gè)月至一年 適用菌種 ? 霉菌、酵母菌、放線菌、部分細(xì)菌。 改良 MilesMisra法 操作方法 ? 測(cè)試菌株過(guò)夜培養(yǎng)物 10倍稀釋 ? 測(cè)試平板和參照平板劃分為 4個(gè)區(qū)域并標(biāo)記 ? 從最高稀釋度開(kāi)始 ，分別滴一滴稀釋液于試驗(yàn)平板和對(duì)照平板標(biāo)記好的區(qū)域 ? 將稀釋液涂滿整個(gè) 1/4區(qū)域， 37176。
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