種子制備與菌種保藏-wenkub.com
2025-05-09 07:07 本頁(yè)面
【正文】 ? 林業(yè)微生物菌種保藏管理中心（ CFCC） 中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院 ， 北京 。 ? 工業(yè)微生物菌種保藏管理中心 （ CICC） 中國(guó)食品發(fā)酵工業(yè)科學(xué)研究所 ， 北京 。 而且在運(yùn)用基因工程菌進(jìn)行發(fā)酵時(shí) ， 抗生素的加入可幫助維持質(zhì)粒復(fù)制與染色體復(fù)制的協(xié)調(diào) 。 適用于霉菌、放線菌和形成芽孢的細(xì)菌的保藏 6 孢子或營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞懸浮液保存 懸浮于滅菌的 10%20%甘油介質(zhì)， 低溫冰箱（ 50 70℃ ） 12年 7 冷凍干燥管保存（ lyophilization freezedrying ) 收集菌種 滅菌脫脂牛奶或馬血清作為懸浮介質(zhì) 滅菌安瓿管 預(yù)凍 真空凍干 密封， 4℃ 冰箱，保存 35年 適用于一切微生物的保存 細(xì)胞 10%20%甘油作為懸浮介質(zhì) 分裝入無(wú)菌聚丙烯管 預(yù)凍 置液氮內(nèi)（ 196℃ ）， 保存 510年 適用于所有微生物、動(dòng)物和植物細(xì)胞的保存 8 液氮管保存 (storage in liquid nitrogen) 基因工程菌的保藏 ? 由載體質(zhì)粒等攜帶的外源 DNA片段通常是遺傳不穩(wěn)定的 、且很易丟失其外源質(zhì)粒復(fù)制子 。 4）采用夾套或蛇管冷卻以保持恒溫，溫度不能高于控制溫度，防止造成異常發(fā)酵 5） 通過培養(yǎng)基中生理酸堿性物質(zhì)的配比，使 pH自然維持在適宜的范圍 6）控制合適移種量： 確定合適的移種量：過大或過小都對(duì)發(fā)酵有不利影響 掌握種子罐的放罐體積。 ( 2) 菌體生長(zhǎng)階段：顯微鏡檢查細(xì)胞分化情況 。 : 1) 培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分含量應(yīng)較斜面豐富，以確保一定的營(yíng)養(yǎng)菌體生長(zhǎng)量；能保持生長(zhǎng)過程中 pH穩(wěn)定。 一 斜面種子的制備 ： 在試管或扁瓶?jī)?nèi)，以瓊脂固化的培養(yǎng)基表面上生長(zhǎng)的菌種培養(yǎng)物。 生產(chǎn)菌種的必備條件： 1 生長(zhǎng)快： 2 對(duì)環(huán)境條件要有比較大的承受能力 3 遺傳表現(xiàn)型要穩(wěn)定，不易退化 4 菌種要純 斜面 沙土管 冷干管 液氮管 實(shí)驗(yàn)室種子制備 生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)種子制備 生產(chǎn)種子制備的一般流程 二級(jí)斜面 一級(jí)斜面 米孢子 母瓶
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