20xx年醫(yī)學專題—內(nèi)毒素是革蘭陰性菌細胞壁的脂多糖(lps)成分-脂多糖的類脂a-…-資料下載頁
2024-11-19 04:56本頁面
【正文】 。目前，在國外細菌內(nèi)毒素定量法的使用率大約占65%～70%，已經(jīng)超過凝膠法，而且還呈上升趨勢?！∶嘎?lián)免疫吸附測定法(ELISA) 酶聯(lián)免疫測定法(ELISA法)基于抗原抗體的酶聯(lián)免疫測定法，目前在國外應用十分普遍。主要由外加熱原質(zhì)刺激巨嗜細胞后產(chǎn)生的內(nèi)熱原物IL1等，而進行的定量測定方法。體外人全血熱原檢測方法是近年來國內(nèi)外正在興起的一種研究熱原檢測的新方法，具有檢測范圍廣，靈敏度高，不同個體血液的結(jié)果差異小等優(yōu)點[12]。國內(nèi)一些學者，已采用酶聯(lián)免疫測定法對體外人全血熱原檢測方法的可行性進行研究和優(yōu)化，取得了可喜的進展[13]。 免疫學方法 目前采用的方法主要有酶聯(lián)免疫吸附檢測法、火箭免疫電泳試驗法、L聚賴氨酸法、雙抗體夾心法、熒光偏振法、125I氣同位素標記法。這些方法的特點是特異性、準確性高，但其應用尚待大量臨床實踐的驗證，操作尚待進一步簡化?！∩飳W方法 利用LPS刺激免疫細胞產(chǎn)生ILTNF的特性，以標化的細胞系作為靶細胞，檢測細胞培養(yǎng)上清中的ILTNF等細胞因子含量，推算出待檢樣本中的LPS含量。 化學發(fā)光法 應用CR1和CR3受體誘導中性粒細胞的氧化反應作為一個反應平臺，通過測定內(nèi)毒素對中性粒細胞的生物學作用來檢測內(nèi)毒素的含量。 流式細胞術(shù) 應用針對內(nèi)毒素表面抗原決定簇的單克隆抗體對內(nèi)毒素進行熒光標定而后應用流式細胞儀進行檢測。6 內(nèi)毒素的制備內(nèi)毒素的制備方法很多，各種方法所得的制品在純度、活性、產(chǎn)量等方面均有所差異。方法主要有三氯醋酸法、酚水法、二乙二醇法、水乙醚法、水丁醇法、酚氯仿石油醚法等［14］。目前應用較多的是酚水法。7 內(nèi)毒素抗體的保護作用內(nèi)毒素具有較強的免疫原性，只需幾十至數(shù)百微克即能明顯誘導小鼠及家兔產(chǎn)生抗內(nèi)毒素抗體。內(nèi)毒素核心結(jié)構(gòu)和類脂A在幾乎所有革蘭氏陰性菌之間具有明顯的相似性和高度的穩(wěn)定性，而且又是最具生物學活性和毒性的成份，因此用核心結(jié)構(gòu)和類脂A統(tǒng)稱為核心糖脂，CGL作為免疫原制備抗體，可獲得具有廣泛交叉反應性的保護性抗體，從而達到阻斷幾乎所有內(nèi)毒素的病理生理作用。由CGL產(chǎn)生的抗體具有與幾乎所有革蘭氏陰性菌內(nèi)毒素的結(jié)合能力。大多數(shù)科學家認為，這種結(jié)合能夠阻斷內(nèi)毒素誘導靶細胞或組織釋放炎癥介質(zhì)和細胞因子，起中和內(nèi)毒素的毒性和促進網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞系統(tǒng)吞噬清除的功能。臨床研究表明，抗CGL血清或免疫球蛋白具有明顯的防治革蘭氏陰性菌感染性休克和減少死亡率的作用。但由于缺乏再次免疫應答，抗體滴度難以控制，導致抗體來源和標準化工作受到限制，此類抗體難以在臨床上推廣應用。近十年來，應用單克隆抗體技術(shù)制備的抗CGL抗體，克服了以上諸多缺點，臨床上應用也是安全有效的，具廣闊的發(fā)展前景。還有研究表明，內(nèi)毒素抗體保護作用的大小與所使用的動物模型和感染的嚴重程度有關。在細菌生長初期，LPS的構(gòu)建不完全，此時抗CGL抗體與核心結(jié)構(gòu)結(jié)合，能顯示出交叉抗感染的作用。如感染菌量過大，細菌還未充分繁殖，動物就死于細菌的直接毒性作用，此時抗CGL抗體也無法發(fā)揮中和LPS毒性的作用［15］?？傊?，內(nèi)毒素抗體的研究為革蘭氏陰性菌感染提供了免疫治療的新途徑，單抗的研制和開發(fā)具有潛在的臨床實用價值，前景光明。參考文獻[1]羅海波，鮑行豪．細菌內(nèi)毒素研究(第一版)[M]．人民衛(wèi)生出版社，1983，6：1～37[2]李鳴真．腸道細菌和內(nèi)毒素的易位[J]．中國危重病急救醫(yī)學，1998，10(12)：764～767[3]馮俊明，劉友生，王曉東．燒傷合并內(nèi)毒素血癥早期纖維連接蛋白在腎臟的 及其意義[J]．第三軍醫(yī)大學學報，1998，20(2)：138～141[4]羅海波，朱平，李蘭娟．細菌毒素與臨床[M]．北京人民衛(wèi)生出版社，1991.[5]董小青，王金蘭，崔穎，等．內(nèi)毒素致病機理與抗內(nèi)毒素藥物研究[J]．天津 藥學，2000，15(4)：51～53[6]崔穎，劉俊媛，王金蘭，等．內(nèi)毒素的致熱特性[J]．天津藥學，2002，(05).： 29～30[7]趙虎，周庭銀．CD14的結(jié)構(gòu)和功能[J]．免疫學雜志，2000，1(16)：74～75 [8]白潔，蔭俊．CD14生物學特性[J]國外醫(yī)學．生理．病理科學與臨床分冊， 2000，(2)：124～125[9]秦玉新，張慶柱．內(nèi)毒素作用中的蛋白質(zhì)和信號通路[J]．中國藥理學通報， 2001，1(10)：1336[10]鄭仲謹．細菌內(nèi)毒素信號受體的研究[J]．中國急救學，2001，12(12)：735～737[11]馮起甲，徐智，吳國明，等．脂多糖結(jié)合蛋白與CD14結(jié)合位點模擬肽 的初步篩選[J].第三軍醫(yī)大學學報，2007，(16)：1572[12][J].，2003，26(5)：230[13]黃清泉，劉文英．體外人全血熱原檢測方法的研究[J].中國藥學雜志，2004，39(5)：372[14]陳海松．動態(tài)濁度法定量測定頭抱呱酮鈉中的細菌內(nèi)毒素[J]．中國藥師， 2005，8(1)：34～35[15]王金蘭．中藥抗內(nèi)毒素生物活性機理的研究[J]．中草藥學，1996，27(2)：121～125內(nèi)容總結(jié)
教學教案相關推薦
鄂ICP備17016276號-1