【正文】 大多數(shù)科學(xué)家認(rèn)為，這種結(jié)合能夠阻斷內(nèi)毒素誘導(dǎo)靶細(xì)胞或組織釋放炎癥介質(zhì)和細(xì)胞因子，起中和內(nèi)毒素的毒性和促進(jìn)網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞系統(tǒng)吞噬清除的功能。目前，在國外細(xì)菌內(nèi)毒素定量法的使用率大約占65%～70%，已經(jīng)超過凝膠法，而且還呈上升趨勢。近十余年來，細(xì)菌內(nèi)毒素試驗(yàn)的方法已取得很大進(jìn)展，目前有凝膠法(Celclottechique)；比濁法(Turbidmeuic assay)；比色法(Colorimetricassay)和免疫學(xué)方法(Immunology method)等。 LBP（LPS結(jié)構(gòu)蛋白）脂多糖結(jié)合蛋白(lipopolysaccharide binding protein,LBP)在體內(nèi)具有LPS增敏作用和中和LPS作用。盡管革蘭氏陰性菌各種成分相差很大，但LPS為革蘭氏陰性菌胞壁所共有，它包括相同脂質(zhì)A和具種間差異的多糖成分，Toll受體僅識別脂質(zhì)A，這樣機(jī)體就能識別整個革蘭氏陰性菌病原菌，科學(xué)家將存在于胞壁為大多數(shù)微生物所共有的一類分子稱為病原相關(guān)分子物質(zhì)結(jié)構(gòu)(pathogenassociatedmolecular patterns，PAMPs)，Toll受體所識別的結(jié)構(gòu)正是PAMPs。利用ELISA法證實(shí)了sCD14能夠直接與LPS結(jié)合。血小板聚集，觸發(fā)凝血系統(tǒng)，引起彌漫性血管內(nèi)凝血。LPS所引起炎癥反應(yīng)的病理作用分系統(tǒng)和細(xì)胞兩個方面。內(nèi)核部分含有庚糖和2酮基3脫氧辛酸(KDO)兩種特殊的糖類分子。隨后其他學(xué)者用不同方法從各種革蘭氏陰性菌中提出與LPS相似的物質(zhì)，該物質(zhì)具有多種毒性反應(yīng)，為區(qū)別于外毒素，而稱之為內(nèi)毒素。在某些情況下，細(xì)菌感染可能被控制，但內(nèi)毒素仍可通過“漏”的腸黏膜，引起炎癥的激活及細(xì)胞介質(zhì)的釋放，導(dǎo)致全身炎癥反應(yīng)綜合征(SIRS)、多器官功能不全綜合征(MODS)甚至多臟器功能衰竭(MOF)［2］。類脂A具有免疫原性，注入動物全內(nèi)可以產(chǎn)生相應(yīng)抗體。研究證明，內(nèi)毒素所引起的各種生物學(xué)效應(yīng)是通過與靶細(xì)胞作用而誘導(dǎo)這些細(xì)胞產(chǎn)生一系列炎癥介質(zhì)和細(xì)胞因子表現(xiàn)出來的，并非內(nèi)毒素本身的效應(yīng)。4 細(xì)菌內(nèi)毒素受體近年來有關(guān)內(nèi)毒素受體的研究報道的非常多，已發(fā)現(xiàn)了4類分子家族與LPS脂質(zhì)A部分結(jié)合參與炎癥信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，包括CD1脂多糖結(jié)構(gòu)蛋白(lipopolysaccharide binding protein，LBP)、Toll樣受體(TollLike Receptors，TLRs)、清道夫受體、T和β2白細(xì)胞整合素(CD11a/CD18，CD11b/CD18，CD11c/CD18等)。然而，LPS被CD14識別并不是直接的，它需要脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)催化。近年研究發(fā)現(xiàn)，巨噬細(xì)胞表面SR是參與宿主早期防御的重要受體。有人發(fā)現(xiàn)LBP存在時，使LPS的作用增敏1000倍。其缺陷為特異性不強(qiáng)、精密度、定量性較差。 免疫學(xué)方法　目前采用的方法主要有酶聯(lián)免疫吸附檢測法、火箭免疫電泳試驗(yàn)法、L聚賴氨酸法、雙抗體夾心法、熒光偏振法、125I氣同位素標(biāo)記法。在細(xì)菌生長初期，LPS的構(gòu)建不完全，此時抗CGL抗體與核心結(jié)構(gòu)結(jié)合，能顯示出交叉抗感染的作用。方法主要有三氯醋酸法、酚水法、二乙二醇法、水乙醚法、水丁醇法、酚氯仿石油醚法等［14］。此法操作簡單速度快，靈敏度高，檢測范圍較寬，但需要精密的儀器。模式Ⅰ為單受體模型，即LPS/LBP與CD14結(jié)合后，由另一能夠識別mCD14GPI結(jié)構(gòu)的跨膜蛋白將信號轉(zhuǎn)導(dǎo)到細(xì)胞內(nèi)。SRA主要在巨噬細(xì)胞上表達(dá)，而肝臟枯否氏細(xì)胞占全身巨噬細(xì)胞90%以上，因此肝臟是清除代謝產(chǎn)物及毒物的主要器官。Toll與其配體Spatzle結(jié)合而被激活，可引起胞漿內(nèi)的轉(zhuǎn)錄因子dorsal的抑制因子cactus的降解、分離，從而dorsal被激活而啟動機(jī)體的免疫防御反應(yīng)。LPS入侵機(jī)體后首先由單核細(xì)胞對它產(chǎn)生識別與應(yīng)答作用，產(chǎn)生一系列細(xì)胞因子：腫瘤壞死因子α(TNFα)、白細(xì)胞介素1(IL1)、白細(xì)胞介素6(IL6)等。LPS和LBP形成LPSLBP復(fù)合物后，再與CD14結(jié)合，誘導(dǎo)胞膜及胞漿內(nèi)蛋白磷酸化，然后啟動細(xì)胞因子基因表達(dá)，產(chǎn)生細(xì)胞因子。具有激活凝血系統(tǒng)作用；第四，內(nèi)毒素既能激活補(bǔ)體活化的經(jīng)典途徑，也能活化旁路途徑。LPS為革蘭氏陰性菌外膜中的脂多糖成分。細(xì)菌內(nèi)毒素的研究進(jìn)展目 錄中文摘要及關(guān)鍵詞 （1） 英文摘要及關(guān)鍵詞 （2）前言 （3）1 細(xì)菌內(nèi)毒素的化學(xué)組成 （3）2 細(xì)菌內(nèi)毒素的生物學(xué)活性 （4）3 內(nèi)毒素的病理生理作用機(jī)制 （5）4 細(xì)菌內(nèi)毒素受體的研究進(jìn)展 （5） CD14 （6） TOLL樣受體 （7） 清道夫受體 （8） LBP （9）5 細(xì)菌內(nèi)毒素的檢測方法 （10） 鱟氏實(shí)驗(yàn) （10） 半定量測定凝膠法 （10） 定量測定 （10）.1 濁度法(比濁法) （10）.2 顯色基質(zhì)法(比色法) （11）.3 酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA) （11） 免疫學(xué)方法 （11） 生物學(xué)方法 （11） 化學(xué)發(fā)光法 （11） 流式細(xì)胞術(shù) （11）6 內(nèi)毒素的制備 （11）7 內(nèi)毒素抗體的保護(hù)作用 （12）參考文獻(xiàn) （13）致謝 （14）摘　　要