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20xx年醫(yī)學(xué)專題—大豆蛋白的提取與含量測(cè)定-資料下載頁(yè)

2024-11-19 04:40本頁(yè)面
  

【正文】 (sh236。guǎn)(干燥的)按下表順序分別加入各種試劑并(干燥的)按下表順序分別加入各種試劑并進(jìn)行反應(yīng)和測(cè)定進(jìn)行反應(yīng)和測(cè)定試管號(hào)試管號(hào) 1 2 3 4 5 6 7蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)液(蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)液( ml)) (( mg) 00 buffer(( ml)) 1 0Folin甲試劑甲試劑 (( ml)) 1 1 1 1 1 1 1于室溫下不停地振蕩于室溫下不停地振蕩 10minFolin乙應(yīng)用液(乙應(yīng)用液( ml)) 4 4 4 4 4 4 4立即搖勻,在立即搖勻,在 55℃℃ 恒溫水浴中保溫恒溫水浴中保溫 5min, 用流水冷卻用流水冷卻 1min后,測(cè)后,測(cè) A650A650值值 第十五 頁(yè) ,共十八 頁(yè) 。?? 樣品測(cè)定:、樣品測(cè)定: 取兩支試管(平行)各加入待測(cè)的蛋白質(zhì)樣品液取兩支試管(平行)各加入待測(cè)的蛋白質(zhì)樣品液 1ml(( 不加不加buffer),), 其他其他 (q237。tā)操作同工作曲線(可取兩支試管編號(hào)操作同工作曲線(可取兩支試管編號(hào) 9,與,與 工作曲線同時(shí)進(jìn)行反應(yīng)和工作曲線同時(shí)進(jìn)行反應(yīng)和比色測(cè)定)比色測(cè)定) ;;試管號(hào)試管號(hào) 8 9蛋白質(zhì)稀釋液(蛋白質(zhì)稀釋液( ml)) (( mg) 1 1 buffer(( ml)) 0 0Folin甲試劑甲試劑 (( ml)) 1 1于室溫下不停地振蕩于室溫下不停地振蕩 10minFolin乙應(yīng)用液(乙應(yīng)用液( ml)) 4 4立即搖勻,在立即搖勻,在 55℃℃ 恒溫水浴中保溫恒溫水浴中保溫 5min, 用流水冷卻用流水冷卻 1min后,測(cè)后,測(cè)A650A650值值第十六 頁(yè) ,共十八 頁(yè) 。? (n243。ngd249。)的計(jì)算:的計(jì)算:? A650值對(duì)應(yīng)的值對(duì)應(yīng)的 mg數(shù)數(shù) (Pr)Pr(mg/ml)= 稀釋倍數(shù)? Pr溶液的 ml數(shù) 思考題思考題采用、采用 Folin的酚法測(cè)定樣品的蛋白質(zhì)含量時(shí),樣品中的酚法測(cè)定樣品的蛋白質(zhì)含量時(shí),樣品中的什么物質(zhì)對(duì)測(cè)定結(jié)果有干擾?的什么物質(zhì)對(duì)測(cè)定結(jié)果有干擾?作為標(biāo)準(zhǔn)、作為標(biāo)準(zhǔn) (biāozhǔn)蛋白的酪蛋白在應(yīng)用時(shí)有何要求蛋白的酪蛋白在應(yīng)用時(shí)有何要求。 第十七 頁(yè) ,共十八 頁(yè) 。內(nèi)容 (n232。ir243。ng)總結(jié)大豆蛋白的提取與含量 測(cè) 定。掌握 Folin酚法 測(cè) 定蛋白 濃 度的原理和方法 實(shí)驗(yàn) 原理。 試劑乙中的磷 鉬 酸和磷 鎢 酸在堿性條件下不 穩(wěn) 定,易被酚 類還 原而呈 蘭 色( 鉬蘭 和 鎢蘭 混合物)。此法也可 測(cè) 定溶液 (r243。ngy232。)中酪氨酸的色氨酸的 濃 度。( 2) 200μg/ml的 標(biāo) 準(zhǔn)酪(牛血清)蛋白溶液 (r243。ngy232。)。 標(biāo) 準(zhǔn)酪蛋白溶液 (r243。ngy232。):用 , 濃度 為 200μg/ml。 作 為標(biāo) 準(zhǔn)蛋白的酪蛋白在 應(yīng) 用 時(shí) 有何要求第十八 頁(yè) ,共十八 頁(yè) 。
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