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正文內(nèi)容

20xx年醫(yī)學(xué)專題—bca蛋白定量-資料下載頁(yè)

2024-11-19 03:47本頁(yè)面
  

【正文】 四、 考前須知1. 配制好的混合BCA工作液室溫24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。2. 參加BCA工作液后,也可以在室溫放置2小時(shí),或60℃放置30分鐘。BCA法測(cè)定蛋白濃度時(shí),吸光度會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)不斷加深。并且顯色反響會(huì)因溫度升高而加快。如果濃度較低,適合在較高溫度孵育,或延長(zhǎng)孵育時(shí)間。3. 待測(cè)樣品濃度在50~2000微克/毫升濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系。4. BCA法測(cè)定蛋白濃度不受絕大局部樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響,可以兼容樣品中高達(dá)5%的SDS,5%的Triton X100,5%的Tween 20, 60, 80。但受螯合劑和略高濃度的復(fù)原劑的影響,需確保EDTA低于10mM,無(wú)EGTA,二硫蘇糖醇低于1mM。5. 操作時(shí)要帶手套。內(nèi)容總結(jié)
〔1〕以蛋白含量〔μg〕為橫坐標(biāo),吸光值為縱坐標(biāo),繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線
〔2〕2. 參加BCA工作液后,也可以在室溫放置2小時(shí),或60℃放置30分鐘
〔3〕如果濃度較低,適合在較高溫度孵育,或延長(zhǎng)孵育時(shí)間
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