【正文】 phalitis,第五十二頁，共六十三頁。,牛組織(zǔzhī)及體液的傳染性分類,I 類 高度感染 腦脊髓（ 眼） II類 中度感染 脾臟、扁逃體、淋巴結、回腸、近端大 腸、腦脊液、腦垂體、腎上腺、（硬腦 膜、松果體、胎盤） III類 低感染性 周圍神經(jīng)、鼻黏膜、胸腺、骨髓、肝、 肺、胰腺 IV類 無感染性 骨骼肌、心臟、乳腺、牛奶、血清、糞 便、腎臟、甲狀腺、唾液腺、唾液、卵 巢、子宮、睪丸(ɡāo w225。n)、附睪、胎兒組織、（初 乳、膽汁、骨骼、軟骨組織、結締組織、 毛發(fā)、皮膚、尿液）,第五十三頁，共六十三頁。,CJD和vCJD問題(w232。nt237。),源于英國的BSE愈演愈烈，已經(jīng)蔓延到法國、德國、比利時等31個國家。BSE又與人類vCJD有關。到2002年6月，在英國已確認為vCJD病人有122人，其中113人已死亡。對113個死亡病歷因果分析，89例確定是BSE感染，其他24人可能與BSE有關。 目前雖無證據(jù)表明經(jīng)血、血液成分和血液制品轉(zhuǎn)播vCJD，但是由于vCJD是新出現(xiàn)的疾病，現(xiàn)在就認為vCJD無傳染性還為時過早(w233。i sh237。 ɡu242。 zǎo)。動物試驗表明血液中傳染因子含量低，但有傳染性。而且實驗證明牛BSE可以傳染給羊。因此有理論上的風險。應特別關注經(jīng)人血傳染vCJD的可能性。,第五十四頁，共六十三頁。,狂犬疫苗(y236。mi225。o)安全性問題 （ Vero 細胞殘余DNA）,質(zhì)量標準10n g/劑 100pg /劑 檢測靈敏度 ： 110pg/ml 2ug (2x106 pg) SV40DNA可使50%動物(d242。ngw249。)致瘤 為一個致瘤劑量 如100pg則為100/2 x106=0.5x104致瘤劑量 如每個細胞基因組DNA為10pg, 而一個癌基因為10Kb(約105pg ),則致瘤基因為細胞基因組的1/106，100pg細胞DNA中含100 X106pg致瘤基因,則致瘤劑量為 104/2x106=0.5x1010個致瘤劑量。 一個致瘤劑量的細胞DNA10000ng .,第五十五頁，共六十三頁。,Vero細胞(x236。bāo)的致腫瘤性,Montagnon實驗： 用裸鼠進行腫瘤實驗，106 或107細胞注射裸鼠， 同時用Hela細胞作對照 137169代： 注射部位結節(jié)呈退行性變，全部(qu225。nb249。) 動物無腫瘤發(fā)生 190210代： 注射部位結節(jié)呈進行性變，全部 動物出現(xiàn)腫瘤，且半數(shù)動物發(fā)生 肺和淋巴節(jié)的腫瘤轉(zhuǎn)移。 結論：170代以前的細胞是安全的,第五十六頁，共六十三頁。,Vero細胞殘余(c225。ny)DNA的標準,Vero 細胞殘余DNA 質(zhì) 量 標 準： 80年代(ni225。nd224。i)： 美國 FDA → 10pg /劑 歐盟、WHO → 100pg /劑 我國衛(wèi)生部→ 100pg /劑 90年代后期： WHO 推薦為→ 10ng/劑 2005年版《中國藥典》 100 pg /劑 檢測靈敏度： 110pg/ml,第五十七頁，共六十三頁。,狂犬疫苗安全性問題 （ Vero 細胞(x236。bāo)殘余DNA）,Melissa Duxbury的實驗： 人血漿的DNA平均濃度為2501500ng/ml, 500ml的全血含60%的血漿， DNA濃度按1500ng/ml計，一次輸入500ml的全血，側會有450ug的DNA由靜脈進入體內(nèi)，經(jīng)多年觀察未發(fā)現(xiàn)與DNA相關的腫瘤發(fā)生。 接受了后來被證實為白血病的供血者的血，受血者經(jīng)7年觀察未發(fā)現(xiàn)白血病和淋巴瘤患者(hu224。nzhě)。 1ug的病毒致癌基因DNA可使動物發(fā)生腫瘤， 50u 的細胞致癌基因DNA不能使動物發(fā)生腫瘤。,第五十八頁，共六十三頁。,狂犬(ku225。nɡ quǎn)疫苗安全性問題 （B丙內(nèi)脂）,B丙內(nèi)脂： * 1981年美國 Alabama州Auburn 大學的獸醫(yī)學生暴 露前程序免疫接種HDCV疫苗(y236。mi225。o)（用B丙內(nèi)脂滅活、） * 1983年131個學生進行加強免疫， 10天后其中20人 出現(xiàn)蕁麻疹等較嚴重的副反應。 * 13人查到了抗人白蛋白IgE * BPLHAS ?變性的 HSA ? 產(chǎn)生抗人白蛋白IgE ? 出現(xiàn)過敏反應。,第五十九頁，共六十三頁。,狂犬疫苗(y236。mi225。o)安全性問題 （B丙內(nèi)脂）,原因： 生產(chǎn)工藝： 細胞培養(yǎng)擴增病毒時需加入人白蛋白 ? 滅活病毒 ?濃縮病毒液 ? 純化 ? 配制(p232。izh236。) ? 分裝 ? + ? ? B丙內(nèi)脂 密度梯度區(qū)帶離心法 添加劑 ? 2萬 / PRM、危險 ? 凍干 ? 成品（有變性的BPLHAS),第六十頁，共六十三頁。,狂犬(ku225。nɡ quǎn)疫苗安全性問題 （B丙內(nèi)脂）,改進措施和解決辦法 生產(chǎn)工藝： 細胞培養(yǎng)擴增 ? 加毒種培養(yǎng) ? 收獲病毒液 ? 加人白蛋白 ? 純化 ? 滅活病毒 ? 配制 ? 分裝 ? ? ? ? 柱層析純化 B丙內(nèi)脂 添加劑（人白蛋白） ? 具有濃縮、高度純化功能、不危險 凍干 ? 成品(ch233。ngpǐn)（無變性的BPLHAS),第六十一頁，共六十三頁。,謝 謝！,第六十二頁，共六十三頁。,內(nèi)容(n232。ir243。ng)總結,狂犬病及疫苗。血清3型：Mokola病毒株，分離自尼日利亞田鼠。血清2型：EBL1蝙蝠株，分離自烏克蘭蝙蝠。對熱敏感，60℃經(jīng)30min或100℃2min即可滅活。也可由染毒唾液污染外環(huán)境（石頭、樹枝等）后，再污染普通(pǔtōng)創(chuàng)面而傳染。謝 謝,第六十三頁，共六十三