【導讀】翻譯表達，因而它能積極參與有規(guī)律的基因的表達。到目前為止，氨基糖苷類和。自然核苷酸是唯一報道的人類PARN活動的調節(jié)器。在現(xiàn)在的研究中，我們發(fā)。嘌呤作為基本官能團能有效地抑制人類PARN。如以前所報道，當對多種腫瘤細。胞系進行測試時，這種核苷類似物表現(xiàn)出很大的抑制作用。動力學分析表明，對。此外，用乙酰和/或糖基三苯甲基來替代糖基上2′，4′或6′的OH是抑制。要了解核苷如何準確的進入PARN活性部位，通過分子動力學模擬。我們的研究結果支持這一想法即通過起催化作用的氨基酸殘基的相互作。用使糖基介導的穩(wěn)定的核苷到達活躍的部位。兩者合計，在體外和硅片的數(shù)據(jù)表。合物可發(fā)揮治療作用，從而解釋其在分子水平上的已知的體內抑制作用。PARN活動是通過輔助蛋白因子及與5′帽結構的相互。并在部分基因的表達方面起調節(jié)作用。到目前為止這些化合物沒有分子靶點或他們的合成中間體已經(jīng)被確定。且，最后，選擇性保護的主要6′-羥基組一組取得了三苯甲基化合物A4。

　　

【正文】 額外的苯環(huán)的貢獻進一步改善其親和力，使其成為更有效的 PARN抑制劑。 在這項工作中提出的硅片分析表明糖基和主要的催化氨基酸之間重要的相互作用，同時在 PARN中的聚 （ A） 限制形式實驗中也觀察到 [8]。 C6在其活性部位的最佳結合方向是允許糖環(huán)的 OH基團與三個催化 Asp殘基（圖 6）建立氫鍵相互作用 ， 以及為了六元糖環(huán)和受體之間已增強的相互疏水作用。再加一個額外的苯基 （ 化合物 A6） 提高受體的活性部位的相互作用 （ 圖 6） 。結合 A AC AMP和 CMP的 Ki 值，我們的數(shù)據(jù)表明，至少在這里測試的在被改進的核苷的情況下， PARN對于胞嘧啶有一個較高的親和力，而不是對于基于腺嘌呤的化合物。雖然 PARN 從聚 （ U） 中區(qū)分聚 （ A） ，但不能降解聚 （ C） 或聚 （ G）[613]， 似 乎至少在這種被改進的核苷測試情況 下 ， 它更 好的結合一個胞核嘧啶而不是一種腺嘌呤。值得注意的 是 ， PARN的基體識別仍是一個未解決的問題。一個重要的觀察：盡管事實上酶有效降解聚 （ A） ， 但是在 腺嘌呤基地和酶之間沒有特定的氫鍵之間的相互作用 [8]。 在該類似物的作用下，脫腺 苷化反應中的二價鎂離子的介入也進行了研究。 之前我們已經(jīng)表明，當二價鎂濃度的增加而不是帶有一個磷酸基 （ AMP 和 GMP） 的核苷酸的濃度增加時，嘌呤核苷酸的抑制作用會使三個磷酸基（ ATP 和GTP）或兩個磷酸基 （ ADP 和 GDP） 被釋放。我們的研究結果符合這些觀察而且表明 ， 二價鎂的促進作用通過改進的核苷并不影響 PARN的抑制作用，這可能是因為缺乏任何磷酸基。一些研究關于二價鎂離子結合模式到磷酸基進行辯論。據(jù)報道，二價鎂只結合 ATP的 β磷酸鹽，即 MgATP 是一種 β， γ雙齒或 R、β， β， γ和 R， γ雙齒混合物，最后，金屬與 ADP 的 R和 β磷酸和所有 ATP的磷酸鹽 [4144]相互作用。在 PARN的活性部位，對二價鎂積極參與機制的實際作用進行了詳細研究 [7]。在那份報告中 ， 提出的對 PARN的兩個金屬離子示意圖是基于以前同一組的報告 [45]表明 PARN活性部位類似于 DNA聚合酶 I中 3050個核酸外切酶的活性部位。作者認為三個天冬氨酸殘基（ D28， D292，和 D382）和一個谷氨酸殘基（ E30）可通過水分子直接或間接的協(xié)調銜接兩個金屬離子。 然而， 二價鎂 可代替其他二價金屬離子（如 Mn2+ 或 Co2+）， 在對鎂離子本身催化機理的絕對要求提出問題。此外，據(jù)報道，新霉素 B 作為一種混合非競爭性抑制劑 [17]，其二價鎂離子釋放 PARN和 DNA聚合酶活性 的克萊片段 的抑制作用。在該報告中，作者表明對于 PARN，新霉素 B中的鉀和二價鎂離子的濃度無關，并認為新霉素 B 和二價離子為同一站點或重疊結合位點 [17]競爭。 眾所周知 ， 在又脫氧核糖核酸的情況下，比如 DNA聚合酶 的克萊片段，二價鎂很難用Kae 105 M1和蛋白質結合， 單金屬離子和雙金屬離子的機制都已經(jīng)被提出來了[46]。 因此 ， 二價鎂無法釋放 PARN 的抑制作 用這可能由于金屬對酶的親和力弱或重疊 （ 對金屬和抑制劑 ） 的結合點。 如上所述 [8]，一個 截斷 人類 PARN 的 C末端的晶體結構是在兩種狀態(tài)下來決定（自由和 RNA結合形式），但有趣的是，作者報道說，盡管二價鎂包括在這機制條件下（在同一數(shù)量級的標準統(tǒng)一試驗下使用，即 至 2mm 之間）。 在這個報告中 ， 晶體數(shù)據(jù)顯示 ， PARN 活動所必需的氨基 酸 ， 例如 ，（ D28 D282， D382， E30） ， 無論和 核糖或一個 寡核苷酸 基板磷酸基團 都很好的相互作用 ， 而生化數(shù)據(jù)顯示 ， H377 對催化活性以及與磷酸鹽的相互作用也是必不可少的。 在我們 的分析中 ， 同樣的氨基酸都參與了在活性部位核苷糖基的協(xié)調。此外，事實上，增加的二價鎂確實可以通過嘌呤三和二磷酸核苷酸（ RTP和 RDP）釋放 PARN的抑制活性，而不是通過單磷酸核苷酸（ RMP） ，這表明可能是金屬離子獨立存在的一種抑制模式。 此外 ， 在最近的一份報告 [47]中， 即使在沒有二價鎂的情況下， 關于二價鎂 PARN的熱穩(wěn)定性影響被檢測到 酶能夠運作 ， 雖然速度慢一些。 雖然二價鎂對整個 PARN功能完整性是必要的，上述數(shù)據(jù)可以解釋為什么在我們的研究中增加的二價鎂濃度沒有影響核苷類似物抑制程度。此外 ， 最近的一項關于結合到 PARN的帽的結構性基礎的研究顯示帽結合和活性部位領域部分重疊 [48]。有趣的是，一個常見的天門冬氨酸殘基（ D28），似乎和我們研究的 A2， A6 和 C6 的 40OH基團協(xié)調有關系，在帽結合領域和活性部位領域的二價鎂協(xié)調中可能也呈現(xiàn)為常見的殘基。 在目前的研究中 ， 很明顯的是，核苷類似物的相互作用并沒有干預必要的二價鎂 ，這一特點在這一類似物作為在細胞環(huán)境中潛在的治療化合物的有效性是必不可少的。 目前的研究表明 PARN代表至少有一個 氟 代嘧啶 核苷 核苷類似物的目標在分子水平上。 從這個角度來看，這些類似物可以通過干擾 mRNA的生命周期發(fā)揮效果，其中 PARN是一個關鍵部分。 對于 mRNA進出因素的類似化合物的進一步發(fā)展可用于更深入的生化研究 ， 最終用于治療應用。 這些化合物在細胞培養(yǎng)中展現(xiàn)這項建議被記錄的抗癌和抗病毒效力所支持。 參考文獻 略 原文