食品微生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室要求-資料下載頁(yè)
2024-10-21 04:02本頁(yè)面
【正文】 待自然冷卻，壓力恢復(fù)至零，溫度降到60℃以下再開(kāi)蓋取物，以防突然減壓液體劇烈沸騰或容器爆破。5．滅菌溫度與時(shí)間(1)干熱滅菌器滅菌溫度160℃。(2)壓力蒸氣滅菌鍋滅菌溫度與時(shí)間見(jiàn)表1。表1物品滅菌時(shí)間115℃121℃不含糖等耐熱物質(zhì)培養(yǎng)基含糖類等不耐熱培養(yǎng)基染菌培養(yǎng)物器械器皿1520min30min30min（二）間歇滅菌方法1．此滅菌方法系利用不加壓力的蒸氣滅菌，某些物質(zhì)經(jīng)高壓蒸氣滅菌容易破壞，可用此法滅菌。（1）將欲滅菌物品置于鍋內(nèi)，蓋上頂蓋，打開(kāi)排水口，使器內(nèi)余水排盡。（2）關(guān)閉排水口，打開(kāi)進(jìn)氣門(mén)，根據(jù)需要消毒10～20min。（3）滅菌完畢關(guān)閉進(jìn)氣門(mén)，取出物品待冷至室溫溫度，放入37℃溫箱過(guò)夜，次日仍按上述方法消毒，如此三次，即可達(dá)到滅菌目的。2．煮沸消毒：可用煮鍋或煮沸消毒器，水沸騰后再煮5～15min，也可在水中加入2﹪石炭酸煮沸5min，﹪甲醛，80℃煮60min均可達(dá)到滅菌目的，但選用煮沸消毒的增消劑時(shí)，．滅菌處理：滅菌后物品，按正常情況已屬無(wú)菌，從滅菌器中取出應(yīng)仔細(xì)檢查放置，以免再度污染。(1)物品取出，隨即檢查包裝的完整性，若有破壞或棉塞脫掉，不可作為無(wú)菌物品使用。(2)取出的物品，如為包裝有明顯的水浸者，不可作為無(wú)菌物品使用。(3)培養(yǎng)基或試劑等，應(yīng)檢查是否符合達(dá)到滅菌后的色澤或狀態(tài)，未達(dá)到者應(yīng)廢棄。(4)啟閉式容器，在取出時(shí)應(yīng)將篩孔關(guān)閉。(5)取出的物品掉落在地或誤放不潔之處，或沾有水液，均視為受到污染，不可作為無(wú)菌物品使用。(6)取出的合格滅菌物品，應(yīng)存放于貯藏室或防塵柜內(nèi)，嚴(yán)禁與未滅菌物品混放。(7)凡屬合格物品，應(yīng)標(biāo)有滅菌日期及有效期限。(8)每批滅菌處理完成后，記錄滅菌品名、數(shù)量、溫度、時(shí)間、操作者。四、有毒有菌污物處理要求 微生物實(shí)驗(yàn)所用實(shí)驗(yàn)器材、培養(yǎng)物等未經(jīng)消毒處理，一律不得帶出實(shí)驗(yàn)室。1．經(jīng)培養(yǎng)的污染材料及廢棄物應(yīng)放在嚴(yán)密的容器或鐵絲筐內(nèi)，并集中存放在指定地點(diǎn)，待統(tǒng)一進(jìn)行高壓滅菌。2．經(jīng)微生物污染的培養(yǎng)物，必須經(jīng)121℃30min高壓滅菌。3．染菌后的吸管，使用后放入消毒液中，最少浸泡24h（消毒液體不得低于浸泡的高度）再經(jīng)121℃30 min高壓滅菌。4．涂片染色沖洗片的液體，一般可直接沖入下水道，烈性菌的沖洗液必須沖在燒杯中，經(jīng)高壓滅菌后方可倒入下水道，染色的玻片放入消毒液中浸泡24 h后，煮沸洗滌。做凝集試驗(yàn)用的玻片或平皿，必須高壓滅菌后洗滌。5．打碎的培養(yǎng)物，立即用消毒液噴灑和浸泡被污染部位，浸泡半小時(shí)后再擦拭干凈。污染的工作服或進(jìn)行烈性試驗(yàn)所穿的工作服、帽、口罩等，應(yīng)放入專用消毒袋內(nèi)，經(jīng)高壓滅菌后方能洗滌。五、培養(yǎng)基制備要求培養(yǎng)基制備的質(zhì)量將直接影響微生物生長(zhǎng)。因?yàn)楦鞣N微生物對(duì)其營(yíng)養(yǎng)要求不完全相同，培養(yǎng)目的的不同，各種培養(yǎng)基制備要求如下：1．根據(jù)培養(yǎng)基配方的成分按量稱取，然后溶于蒸餾水中，在使用前對(duì)應(yīng)用的試劑藥品應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn)。2．PH測(cè)定及調(diào)節(jié)：PH測(cè)定要在培養(yǎng)基冷至室溫時(shí)進(jìn)行，因在熱或冷的情況下，其PH有一定差異，當(dāng)測(cè)定好時(shí)，按計(jì)算量加入堿或酸混勻后，應(yīng)再測(cè)試一次。培養(yǎng)基PH值一定要準(zhǔn)確，否則會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)或影響結(jié)果的觀察。但需注意因高壓滅菌可影響一些培養(yǎng)基的PH降低或升高，故不宜滅菌壓力過(guò)高或次數(shù)太多，以免影響培養(yǎng)基的質(zhì)量，指示劑、去氧膽酸鈉、瓊脂等一般在調(diào)完P(guān)H后再加入。3．培養(yǎng)基需保持澄清，便于觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)情況，培養(yǎng)基加熱煮沸后，可用脫脂棉花或絨布過(guò)濾，以除去沉淀物，必要時(shí)可用雞蛋白澄清處理，所用瓊脂條要預(yù)先洗凈晾干后使用，避免因瓊脂含雜質(zhì)而影響透明度。4．盛裝培養(yǎng)基不宜用鐵、銅等容器，使用洗凈的中性硬質(zhì)玻璃容器為好。5．培養(yǎng)基的滅菌既要達(dá)到完全滅菌目的，又要注意不因加熱而降低其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，一般121℃15min即可，如為含有不耐高熱物質(zhì)的培養(yǎng)基如糖類、血清、明膠等，則應(yīng)采用低溫滅菌或間歇法滅菌，一些不能加熱的試劑如亞碲酸鉀、卵黃、TTC、抗菌素等，待基礎(chǔ)瓊脂高壓滅菌后涼至50℃左右再加入。6．每批培養(yǎng)基制備好后，應(yīng)做無(wú)菌生長(zhǎng)試驗(yàn)及所檢菌株生長(zhǎng)試驗(yàn)。如果是生化培養(yǎng)基，使用標(biāo)準(zhǔn)菌株接種培養(yǎng)，觀察生化反應(yīng)結(jié)果，應(yīng)呈正常反應(yīng)，培養(yǎng)基不應(yīng)貯存過(guò)久，必要時(shí)可置4℃冰箱存放。7．目前各種干燥培養(yǎng)基較多，每批需用標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行生長(zhǎng)試驗(yàn)或生化反應(yīng)觀察，各種培養(yǎng)基用相應(yīng)菌株生長(zhǎng)試驗(yàn)良好后方可應(yīng)用，新購(gòu)進(jìn)的或存放過(guò)久的干燥培養(yǎng)基，在配制時(shí)也應(yīng)測(cè)PH，使用時(shí)需根據(jù)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)用量和方法進(jìn)行。8．每批制備的培養(yǎng)基所用化學(xué)試劑、滅菌情況及菌株生長(zhǎng)試驗(yàn)結(jié)果、制作人員等應(yīng)做好記錄，以備查詢。六、樣品采集及處理要求1．所采集的檢驗(yàn)樣品一定要具有代表性，采樣時(shí)應(yīng)首先對(duì)該批食品原料、加工、運(yùn)輸、貯藏方法條件、周圍環(huán)境衛(wèi)生狀況等進(jìn)行詳細(xì)調(diào)查，檢查是否有污染源存在。2．根據(jù)食品的種類及數(shù)量，采樣數(shù)量及方法應(yīng)按標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法的要求進(jìn)行。3．采樣應(yīng)注意無(wú)菌操作，容器必須滅菌，避免環(huán)境中微生物污染，容器不得使用煤酚皂溶液，用新潔爾滅、酒精等消毒藥物滅菌，更不能含有此類消毒藥物或抗生素類藥物，以避免殺死樣品中的微生物，所用剪、刀、匙用具也需滅菌方可應(yīng)用。4．樣品采集后應(yīng)立即送往檢驗(yàn)室進(jìn)行檢驗(yàn)，送檢過(guò)程中一般不超過(guò)3h，如路程較遠(yuǎn)，可保存在1～5℃環(huán)境中，如需冷凍者，則在凍存狀態(tài)下送檢。5．檢驗(yàn)室收到樣品后，進(jìn)行登記（樣品名稱、送檢單位、數(shù)量、日期、編號(hào)等），觀察樣品的外觀，如果發(fā)現(xiàn)有下列情況之一者，可拒絕檢驗(yàn)。(1)樣品經(jīng)過(guò)特殊高壓、煮沸或其他方法殺菌者，失去代表原食品檢驗(yàn)意義者。(2)瓶、袋裝食品已啟開(kāi)者，食品已折碎不完整者，即失去原食品形狀者（食物中毒樣品除外）。(3)按規(guī)定采樣數(shù)量不足者。對(duì)送檢符合要求的樣品，檢驗(yàn)室收到后，應(yīng)立即進(jìn)行檢驗(yàn)，如果條件不具備，應(yīng)置4℃冰箱存放，及時(shí)準(zhǔn)備創(chuàng)造條件，然后進(jìn)行檢驗(yàn)。6．樣品檢驗(yàn)時(shí)，根據(jù)其不同性狀，進(jìn)行適當(dāng)處理。(1)液體樣品接種時(shí)，應(yīng)充分混合均勻，按量吸取進(jìn)行接種。(2)固體樣品，用滅菌刀、剪取其不同部位共25g，置于225ml滅菌生理鹽水或其他溶液中，用均質(zhì)器攪碎混勻后，按量吸取接種。(3)瓶、袋裝食品應(yīng)用滅菌操作啟開(kāi)，根據(jù)性狀選擇上述方法處理后接種。七、樣品檢驗(yàn)、記錄和報(bào)告的要求1．檢驗(yàn)室收到樣品后，首先進(jìn)行外觀檢驗(yàn)，及時(shí)按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法進(jìn)行檢驗(yàn)，檢驗(yàn)過(guò)程中要認(rèn)真、負(fù)責(zé)、嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，避免環(huán)境中微生物污染。2．樣品檢驗(yàn)過(guò)程中所用方法、出現(xiàn)的現(xiàn)象和結(jié)果等均要用文字寫(xiě)出試驗(yàn)紀(jì)錄，以作為對(duì)結(jié)果分析、判定的依據(jù)，記錄要求詳細(xì)、清楚、真實(shí)、客觀、不得涂改和偽造。
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