【正文】 8的分子結(jié)構(gòu) IL8分子量 ，不成熟的 IL8為 99個氨基酸，單核細胞產(chǎn)生的成熟 IL8分子主要形式為 72個氨基酸，而內(nèi)皮細胞產(chǎn)生的成熟 IL8分子主要為 77個氨基酸。 第八十二頁，共九十八頁。 Brat et al.: IL8 in gliomagenesis and IL8的產(chǎn)生 第八十三頁，共九十八頁。 IL8的結(jié)合受體及生物學活性 Brat et al.: IL8 in gliomagenesis and 第八十四頁，共九十八頁。 IL 8與臨床 ? IL8的表達與臨床疾病的關(guān)系 – 牛皮癬皮屑中和類風濕性關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)滑液中 IL8表達增高 – 某些與中性粒細胞積聚有關(guān)的炎癥和呼吸系統(tǒng)疾病局部或血清中IL8水平往往升高，如胃炎、炎癥性結(jié)腸炎、肺纖維化或成人呼吸窘迫綜合征、慢性支氣管炎、支氣管擴張、敗血癥休克、急性腦膜炎球菌感染、酒精性肝炎等。 ? 抗人白細胞介素 8單克隆抗體乳膏 (恩博克乳膏 )治療尋常型銀屑病 . 第八十五頁，共九十八頁。 其它 IL IL32： 2024年 Kim等利用基因芯片技術(shù)研究 IL18誘導高表達基因時 ,發(fā)現(xiàn)的一種高表達細胞因子樣基因 , 編碼炎癥性細胞因子。 IL32在炎癥和發(fā)熱方面有重要作用。 IL34: 2024年 Lin等通過對分泌蛋白和跨膜蛋白高通量篩選時，發(fā)現(xiàn)一個能明顯促進單核細胞活性的分子，并能與 MCSF受體結(jié)合。 第八十六頁，共九十八頁。 白細胞介素的分類 ? IL1 家族 – IL1α/β 1Ra 18 33 36 37 ? IL2 家族 – IL2 4 7 9 15 21 (共用 γ受體鏈 ) ? IL6 家族 – IL6 11 27 30 31 (共用 gp130受體鏈 ) ? IL10 家族 – IL10 19 20 22 24 26 28A/B 29 (結(jié)構(gòu)相似 ) ? IL12 家族 ? IL12 23 27 35 (均為異源二聚體結(jié)構(gòu) ) ? IL17家族 ? IL17AF(包括 IL25〕 ?集落刺激因子 ? IL3 1 5 6 11 ? IL8〔趨化因子〕 ? 其它 IL ? IL 5 13 14 16 32 34 第八十七頁，共九十八頁。 白細胞介素的研究策略 ? 傳統(tǒng)生物學策略 ? 蛋白質(zhì)〔發(fā)現(xiàn)功能〕 DNA ? 反向生物學策略 ? 生物信息學分析 基因 ORF克隆 功能研究〔蛋白質(zhì)〕 第八十八頁，共九十八頁。 傳統(tǒng)生物學策略 生物活性 蛋白質(zhì) 基因 細胞 動物模型 人體內(nèi)功能及與疾病關(guān)聯(lián) 別離純化 cDNA克隆 檢測表型 構(gòu)建 臨床相關(guān) 第八十九頁，共九十八頁。 反向生物學策略 DNA 蛋白質(zhì) 細胞 動物模型 人體內(nèi)功能及與疾病關(guān)聯(lián) 檢測表型 構(gòu)建 臨床相關(guān) 疾病標本 DNA 致病基因或 易感基因分析 第九十頁，共九十八頁。 ? 細胞因子序列同源性分析和基因 Cluster分析 [IL19202327303335,IL 17 BF(包括IL25)， IL1 F10,IL36,IL37,IL38] ? 免疫細胞基因和蛋白表達譜分析 〔 IL21222628A/B29313234 〕 ? 免疫相關(guān)疾病的易感基因或致病基因分析 (IL24) ? 利用免疫細胞篩選模型，開展基因表達文庫或 RNAi文庫的功能篩選 新的細胞因子的發(fā)現(xiàn) 第九十一頁，共九十八頁。 免疫細胞 篩選技術(shù) 生物信息學 基因芯片 酵母雙 雜交 蛋白質(zhì) 組學 結(jié)構(gòu)基因 組學 動物體內(nèi) 實驗 基因敲除 轉(zhuǎn)基因小鼠 功能研究 藥物開發(fā) 研究 其它應用 研究 免疫細胞篩選技術(shù)在發(fā)現(xiàn)細胞分子研究的重要位置 第九十二頁，共九十八頁。 Nucleic Acids Res. 2024,36:p793799 2024年 1月人類轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫 HInvitational Database (HInvDB)的統(tǒng)計 :已注釋 34,057個人類編碼蛋白 ,有文獻支持功能研究的蛋白 12,404個 . 第九十三頁，共九十八頁。 篩選潛在的細胞因子的策略 ? 未知蛋白的生物信息學分析： – 無功能性文章報道或無免疫相關(guān)的功能性報道 – 具有潛在的信號肽或被證實為分泌蛋白 – 蛋白氨基酸數(shù)目少于 300個 – 主要在免疫系統(tǒng)和造血系統(tǒng)中表達 94 獲得的基因， ORF克隆連接在真核表達載體 轉(zhuǎn)染 HEK 293T細胞，檢測其分泌表達 第九十四頁，共九十八頁。 Th1 Th2 Th17 Treg CD4 + CD45RA + na 239。 ve T cells PBMC Anti CD3, anti CD28, IL 1b, IL 6, TNF a, IL 23, anti IFN γ , anti IL 4 Anti CD3, anti CD28, IL 12, IL 2, anti IL 4 Anti CD3, anti CD28, IL 4, IL 2, anti IFN γ , anti IL 10 Anti CD3, anti CD28, IL 2, TGF β IFN γ T bet IL4, IL 5, IL 13 GATA 3 IL 17A, IL 17F, IL 22, IL 26 ROR γ t CD25 FoxP3 Differentiation index Proliferation index Apoptosis index [3H]Thymidine incorporation assay 、 BrdU 、 CFSE Annexin V Expression profile of novel gene Add the secreted protein 在免疫細胞中，檢測其生物學功能 CD8+ T B antiCD3 antiCD28 LPS 第九十五頁，共九十八頁。 ? 白細胞介素的分類 – 不同白細胞介素家族 ? 白細胞介素的命名 ? 已發(fā)現(xiàn)白細胞介素的研究策略 ? 新的白細胞介素的發(fā)現(xiàn) —— 研究路線 – CCDC134 基因的功能性研究 第九十六頁，共九十八頁。 思考題 ? 白細胞介素的概念；舉例說明不同白細胞介素家族成員的特點。 ? 舉例說明發(fā)現(xiàn)新白細胞介素的技術(shù)路線。 第九十七頁，共九十八頁。 內(nèi)容總結(jié) Cytokine。 1986年基因克隆成功，國際統(tǒng)一命名為白細胞介素 4〔 interleukin 4,IL4)。 IL 4的產(chǎn)生：在人類 IL4主要由活化 T細胞 Th2亞群產(chǎn)生。 1986年統(tǒng)一命名白細胞介素 6〔 interleukin 6,IL6)。1985年 Kishimoto等從人 T細胞中首先獲得 IL6 cDNA克隆成功，人 IL6基因與小鼠有 65%同源性。舉例說明發(fā)現(xiàn)新白細胞介素的技術(shù)路線 第九十八頁，共九十八頁。