【正文】 8的分子結(jié)構(gòu) IL8分子量 ，不成熟的 IL8為 99個氨基酸，單核細(xì)胞產(chǎn)生的成熟 IL8分子主要形式為 72個氨基酸，而內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的成熟 IL8分子主要為 77個氨基酸。 第八十二頁，共九十八頁。 Brat et al.: IL8 in gliomagenesis and IL8的產(chǎn)生 第八十三頁，共九十八頁。 IL8的結(jié)合受體及生物學(xué)活性 Brat et al.: IL8 in gliomagenesis and 第八十四頁，共九十八頁。 IL 8與臨床 ? IL8的表達(dá)與臨床疾病的關(guān)系 – 牛皮癬皮屑中和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)滑液中 IL8表達(dá)增高 – 某些與中性粒細(xì)胞積聚有關(guān)的炎癥和呼吸系統(tǒng)疾病局部或血清中IL8水平往往升高，如胃炎、炎癥性結(jié)腸炎、肺纖維化或成人呼吸窘迫綜合征、慢性支氣管炎、支氣管擴(kuò)張、敗血癥休克、急性腦膜炎球菌感染、酒精性肝炎等。 ? 抗人白細(xì)胞介素 8單克隆抗體乳膏 (恩博克乳膏 )治療尋常型銀屑病 . 第八十五頁，共九十八頁。 其它 IL IL32： 2024年 Kim等利用基因芯片技術(shù)研究 IL18誘導(dǎo)高表達(dá)基因時 ,發(fā)現(xiàn)的一種高表達(dá)細(xì)胞因子樣基因 , 編碼炎癥性細(xì)胞因子。 IL32在炎癥和發(fā)熱方面有重要作用。 IL34: 2024年 Lin等通過對分泌蛋白和跨膜蛋白高通量篩選時，發(fā)現(xiàn)一個能明顯促進(jìn)單核細(xì)胞活性的分子，并能與 MCSF受體結(jié)合。 第八十六頁，共九十八頁。 白細(xì)胞介素的分類 ? IL1 家族 – IL1α/β 1Ra 18 33 36 37 ? IL2 家族 – IL2 4 7 9 15 21 (共用 γ受體鏈 ) ? IL6 家族 – IL6 11 27 30 31 (共用 gp130受體鏈 ) ? IL10 家族 – IL10 19 20 22 24 26 28A/B 29 (結(jié)構(gòu)相似 ) ? IL12 家族 ? IL12 23 27 35 (均為異源二聚體結(jié)構(gòu) ) ? IL17家族 ? IL17AF(包括 IL25〕 ?集落刺激因子 ? IL3 1 5 6 11 ? IL8〔趨化因子〕 ? 其它 IL ? IL 5 13 14 16 32 34 第八十七頁，共九十八頁。 白細(xì)胞介素的研究策略 ? 傳統(tǒng)生物學(xué)策略 ? 蛋白質(zhì)〔發(fā)現(xiàn)功能〕 DNA ? 反向生物學(xué)策略 ? 生物信息學(xué)分析 基因 ORF克隆 功能研究〔蛋白質(zhì)〕 第八十八頁，共九十八頁。 傳統(tǒng)生物學(xué)策略 生物活性 蛋白質(zhì) 基因 細(xì)胞 動物模型 人體內(nèi)功能及與疾病關(guān)聯(lián) 別離純化 cDNA克隆 檢測表型 構(gòu)建 臨床相關(guān) 第八十九頁，共九十八頁。 反向生物學(xué)策略 DNA 蛋白質(zhì) 細(xì)胞 動物模型 人體內(nèi)功能及與疾病關(guān)聯(lián) 檢測表型 構(gòu)建 臨床相關(guān) 疾病標(biāo)本 DNA 致病基因或 易感基因分析 第九十頁，共九十八頁。 ? 細(xì)胞因子序列同源性分析和基因 Cluster分析 [IL19202327303335,IL 17 BF(包括IL25)， IL1 F10,IL36,IL37,IL38] ? 免疫細(xì)胞基因和蛋白表達(dá)譜分析 〔 IL21222628A/B29313234 〕 ? 免疫相關(guān)疾病的易感基因或致病基因分析 (IL24) ? 利用免疫細(xì)胞篩選模型，開展基因表達(dá)文庫或 RNAi文庫的功能篩選 新的細(xì)胞因子的發(fā)現(xiàn) 第九十一頁，共九十八頁。 免疫細(xì)胞 篩選技術(shù) 生物信息學(xué) 基因芯片 酵母雙 雜交 蛋白質(zhì) 組學(xué) 結(jié)構(gòu)基因 組學(xué) 動物體內(nèi) 實驗 基因敲除 轉(zhuǎn)基因小鼠 功能研究 藥物開發(fā) 研究 其它應(yīng)用 研究 免疫細(xì)胞篩選技術(shù)在發(fā)現(xiàn)細(xì)胞分子研究的重要位置 第九十二頁，共九十八頁。 Nucleic Acids Res. 2024,36:p793799 2024年 1月人類轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫 HInvitational Database (HInvDB)的統(tǒng)計 :已注釋 34,057個人類編碼蛋白 ,有文獻(xiàn)支持功能研究的蛋白 12,404個 . 第九十三頁，共九十八頁。 篩選潛在的細(xì)胞因子的策略 ? 未知蛋白的生物信息學(xué)分析： – 無功能性文章報道或無免疫相關(guān)的功能性報道 – 具有潛在的信號肽或被證實為分泌蛋白 – 蛋白氨基酸數(shù)目少于 300個 – 主要在免疫系統(tǒng)和造血系統(tǒng)中表達(dá) 94 獲得的基因， ORF克隆連接在真核表達(dá)載體 轉(zhuǎn)染 HEK 293T細(xì)胞，檢測其分泌表達(dá) 第九十四頁，共九十八頁。 Th1 Th2 Th17 Treg CD4 + CD45RA + na 239。 ve T cells PBMC Anti CD3, anti CD28, IL 1b, IL 6, TNF a, IL 23, anti IFN γ , anti IL 4 Anti CD3, anti CD28, IL 12, IL 2, anti IL 4 Anti CD3, anti CD28, IL 4, IL 2, anti IFN γ , anti IL 10 Anti CD3, anti CD28, IL 2, TGF β IFN γ T bet IL4, IL 5, IL 13 GATA 3 IL 17A, IL 17F, IL 22, IL 26 ROR γ t CD25 FoxP3 Differentiation index Proliferation index Apoptosis index [3H]Thymidine incorporation assay 、 BrdU 、 CFSE Annexin V Expression profile of novel gene Add the secreted protein 在免疫細(xì)胞中，檢測其生物學(xué)功能 CD8+ T B antiCD3 antiCD28 LPS 第九十五頁，共九十八頁。 ? 白細(xì)胞介素的分類 – 不同白細(xì)胞介素家族 ? 白細(xì)胞介素的命名 ? 已發(fā)現(xiàn)白細(xì)胞介素的研究策略 ? 新的白細(xì)胞介素的發(fā)現(xiàn) —— 研究路線 – CCDC134 基因的功能性研究 第九十六頁，共九十八頁。 思考題 ? 白細(xì)胞介素的概念；舉例說明不同白細(xì)胞介素家族成員的特點。 ? 舉例說明發(fā)現(xiàn)新白細(xì)胞介素的技術(shù)路線。 第九十七頁，共九十八頁。 內(nèi)容總結(jié) Cytokine。 1986年基因克隆成功，國際統(tǒng)一命名為白細(xì)胞介素 4〔 interleukin 4,IL4)。 IL 4的產(chǎn)生：在人類 IL4主要由活化 T細(xì)胞 Th2亞群產(chǎn)生。 1986年統(tǒng)一命名白細(xì)胞介素 6〔 interleukin 6,IL6)。1985年 Kishimoto等從人 T細(xì)胞中首先獲得 IL6 cDNA克隆成功，人 IL6基因與小鼠有 65%同源性。舉例說明發(fā)現(xiàn)新白細(xì)胞介素的技術(shù)路線 第九十八頁，共九十八頁。