乙肝核心抗原的檢測與應用-資料下載頁
2024-10-04 14:34本頁面
【正文】 ，而核型 HBcAg那么不具有此種作用。 第三十二頁，共四十二頁。 HBcAg檢測的應用價值 〔 3〕 HBcAg檢測也是判斷 HBV復制狀態(tài)的一項重要指標，肝組織 HBcAg與 HBV DNA兩種病毒復制標志物相關。研究結果證實肝組織 HBcAg檢測具有多種實用價值，值得推薦。 第三十三頁，共四十二頁。 HBcAg表達 國內學者對乙型肝炎孕婦所分娩的死胎進行研究，發(fā)現(xiàn) HBcAg在多種臟器內均可表達，其中以肺、肝、腎臟、臍帶為最高，胸腺、心臟、脾、胎盤次之，大腦最低。說明 HBV有可能在多種組織內復制并表達抗原。這可能是 HBV通過產(chǎn)婦傳播，導致新生兒乙型肝炎的高發(fā)病率、新生兒發(fā)育不良和死亡的重要因素。 第三十四頁，共四十二頁。 3 小結 總之，充分認識 HBcAg的生物學特點和其在血液、肝組織內表達的規(guī)律，有助于我們通過對 HBcAg的檢測而正確判斷是否有 HBV的復制以及復制的強度，正確評估肝病活動及肝組織損害的程度，從而指導制定有效的治療方案。對HBcAg的強免疫原特性的認識，可以指導我們研制更有效的預防或治療乙型病毒性肝炎的疫苗。 第三十五頁，共四十二頁。 4 HBcAg的 ELISA法檢測 HBcAg ELISA試劑由北京美迪科生物技術有限責任公司提供 ， 試劑主要包括 HBsAb包被板 、 HBcAg包被板 、 開殼劑 、 HBcAbHRP結合物 、 底物液 TMB等 。 第三十六頁，共四十二頁。 步驟 〔 1〕 標本處理：取血清檢測 。 〔 2〕 乙肝病毒 Dane顆粒的別離 。 將 HBsAb包被板用蒸餾水洗 2次并拍干 ， 每孔加樣本 、陰陽性對照血清各 100ul〔 空白對照孔不加 〕 ， 用封片紙封好 ， 45℃ 溫育 30分鐘 ，棄去孔內液體并用蒸餾水洗 7次并拍干 。 〔 3〕 加開殼劑釋放出 HBcAg。 將上述的 HBsAb包被板每孔參加 100ul開殼劑 〔 空白對照孔不加 〕 ， 置 45℃ 溫育 30分鐘 。 第三十七頁，共四十二頁。 步驟 〔 4〕 中和抑制法檢測 HBcAg。 將上述的HBsAb包被板每孔中的開殼液轉移 50ul至相應的已用蒸餾水洗 2次并拍干的HBcAg包被板中 〔 注意每份樣品要更換一個吸頭 ， 以防交叉污染 〕 ， 然后每孔參加 HBcAb酶結合物 50ul〔 空白對照孔不加 〕 ， 混勻并封板 ， 置 45℃ 溫育 30分鐘 ， 棄去孔內液體并用蒸餾水洗 7次并拍干 。 第三十八頁，共四十二頁。 步驟 〔 5〕 顯色 。 將上述的 HBcAb包被板每孔中加底物液 A、 B各 50ul， 混勻 ， 室溫放置 1020分鐘 。 每孔中參加終止液 〔 2MH2SO4〕 50ul，混勻 ， 選擇波長 450nm， 空白孔調零 ， 上酶標儀測 OD值 。 〔 6〕 結果判定 。 Cutoff值 〔 界限值 〕 =陰性對照 OD均值 /。 標本 OD值 ≤Cutoff值 ， 為陽性； OD值＞ Cutoff值 ， 為陰性 。 第三十九頁，共四十二頁。 步驟 〔 5〕 顯色 。 將上述的 HBcAb包被板每孔中加底物液 A、 B各 50ul， 混勻 ， 室溫放置 1020分鐘 。 每孔中參加終止液 〔 2MH2SO4〕50ul， 混勻 ， 選擇波長 450nm， 空白孔調零 ，上酶標儀測 OD值 。 〔 6〕 結果判定 。 Cutoff值 〔 界限值 〕 =陰性對照OD均值 /。 標本 OD值 ≤Cutoff值 ， 為陽性；OD值＞ Cutoff值 ， 為陰性 。 第四十頁，共四十二頁。 第四十一頁，共四十二頁。 內容總結 HBcAg的檢測與應用。 HBcAg出現(xiàn)的陽性率與 HBsAg的出現(xiàn)密切相關，往往 HBcAg〔＋〕與HBsAg〔＋〕同時存在，而 HBsAg〔＋〕時不一定會出現(xiàn) HBcAg〔＋〕。不能以 HBsAg陰性就排除 HBV感染，臨床上 HBsAg陰性的患者，只要 HBcAg檢出陽性，說明仍有乙型肝炎病毒復制。一般認為，當 HBeAg/抗 HBe轉換后， HBV復制趨于減少，沒有傳染性或傳染性很小 第四十二頁，共四十二頁。
環(huán)評公示相關推薦
鄂ICP備17016276號-1