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乙肝核心抗原的檢測(cè)與應(yīng)用(留存版)

  

【正文】 CR〕檢測(cè)法比固相放射免疫法靈敏度高,但實(shí)際上可出現(xiàn) HBcAg陽(yáng)性而 HBV DNA陰性的結(jié)果。作為免疫攻擊的靶抗原, HBeAg不及 HBcAg重要。 這可能是由于機(jī)體對(duì)呈漿 、 膜型分布的 HBcAg和 HBV DNA具有更加強(qiáng)烈的免疫反響 , 將肝內(nèi)含活潑復(fù)制的 HBV DNA和靶抗原HBcAg表達(dá)的肝細(xì)胞溶解破壞 , 以去除病毒所致 。 第三十三頁(yè),共四十二頁(yè)。 步驟 〔 4〕 中和抑制法檢測(cè) HBcAg。 第四十頁(yè),共四十二頁(yè)。 每孔中參加終止液 〔 2MH2SO4〕50ul, 混勻 , 選擇波長(zhǎng) 450nm, 空白孔調(diào)零 ,上酶標(biāo)儀測(cè) OD值 。 將 HBsAb包被板用蒸餾水洗 2次并拍干 , 每孔加樣本 、陰陽(yáng)性對(duì)照血清各 100ul〔 空白對(duì)照孔不加 〕 , 用封片紙封好 , 45℃ 溫育 30分鐘 ,棄去孔內(nèi)液體并用蒸餾水洗 7次并拍干 。 HBcAg漿膜型者顯示此種一致性,而核型那么否,可能由于肝細(xì)胞質(zhì)、膜上的 HBcAg作為靶抗原易受到殺傷性了淋巴細(xì)胞的攻擊,導(dǎo)致肝細(xì)胞損害,而核型 HBcAg那么不具有此種作用。 HBcAg顆粒在肝組織中主要呈彌漫的漿膜型分布, HBcAg和 HBV DNA呈漿、膜型分布者,其肝組織中 HBV DNA表達(dá)程度、炎癥活動(dòng)度和纖維組織增生程度,明顯較呈核型分布者高。 經(jīng)干擾素 α治療后的慢性活動(dòng)性乙型肝炎患者 , HBcAg發(fā)生從核內(nèi)向胞質(zhì)的轉(zhuǎn)換 。在急性乙型肝炎早期 HBcAg亦達(dá)頂峰值,而且病情嚴(yán)重者的 HBcAg水平也相應(yīng)提高。HBeAg被公認(rèn)為是 HBV復(fù)制的標(biāo)志物。所以, HBcAg測(cè)定更能反映 HBV的存在及其復(fù)制程度,比其他各種免疫學(xué)指標(biāo)更靈敏、更特異。 Th1和Th2細(xì)胞通過(guò)分泌的細(xì)胞因子相互下調(diào)對(duì)方的生長(zhǎng)分化,刺激自身的增生。 第三頁(yè),共四十二頁(yè)。 0 引言 乙型肝炎病毒〔 HBV〕是嗜肝 DNA病毒,完整的 HBV顆粒又稱 Dane顆粒,球形,直徑約42urn。 第六頁(yè),共四十二頁(yè)。這一結(jié)果為我們進(jìn)一步探索該DNA疫苗在治療主要因機(jī)體 CTL功能低下所致 HBV慢性持續(xù)感染方面的應(yīng)用前景奠定了初步的實(shí)驗(yàn)研究根底。 多年來(lái) , 一直認(rèn)為 e抗原是復(fù)制標(biāo)記物 , 由于 HBeAg是 HBcAg的降解產(chǎn)物 , 以可溶性蛋白形式存在 , 在結(jié)構(gòu)上不及 HBcAg與病毒顆粒關(guān)系密切 ,對(duì)判斷病毒復(fù)制 、 評(píng)估傳染性不及 HBcAg敏感可靠 。它可與其他的 HBV血清學(xué)標(biāo)志物起到相互配合和相互補(bǔ)充的作用。 HBcAg與 HBV DNA關(guān)系 肝內(nèi) HBcAg與 HBV DNA的分布區(qū)域常較一致 ,有的肝細(xì)胞可同時(shí)檢出 HBcAg和 HBV DNA, 但多數(shù)HBV DNA〔 + 〕 肝細(xì)胞并不同時(shí)含有 HBcAg。 HBcAg在胞質(zhì)內(nèi)表達(dá)預(yù)示預(yù)后不良 。 第三十一頁(yè),共四十二頁(yè)。 第三十六頁(yè),共四十二頁(yè)。 第三十九頁(yè),共四十二頁(yè)。 HBcAg出現(xiàn)的陽(yáng)性率與 HBsAg的出現(xiàn)密切相關(guān),往往 HBcAg〔+〕與HBsAg〔+〕同時(shí)存在,而 HBsAg〔+〕時(shí)不一定會(huì)出現(xiàn) HBcAg〔+〕。 步驟 〔 5〕 顯色 。這可能是 HBV通過(guò)產(chǎn)婦傳播,導(dǎo)致新生兒乙型肝炎的高發(fā)病率、新生兒發(fā)育不良和死亡的重要因素。 第二十九頁(yè),共四十二頁(yè)。 慢性 HBV感染者肝組織中漿膜型 HBcAg的表達(dá)強(qiáng)度隨肝組織病變活性積分 〔 HAI〕 評(píng)分值的增高而增強(qiáng) , HAI評(píng)分值低者核型 HBcAg的表達(dá)增強(qiáng) 。 第二十頁(yè),共四十二頁(yè)。血清中的 HBcAg陽(yáng)性與肝臟病變活動(dòng)程度有關(guān),且對(duì)估計(jì)預(yù)后有很好價(jià)值。 HBcAg與 HBsAg的關(guān)系 HBcAg出現(xiàn)的陽(yáng)性率與 HBsAg的出現(xiàn)密切相關(guān) , 往往 HBcAg〔 + 〕與 HBsAg〔 + 〕 同時(shí)存在 , 而 HBsAg〔 + 〕 時(shí)不一定會(huì)出現(xiàn) HBcAg〔 + 〕 。 DNA疫苗可刺激機(jī)體特異性 CTL功能的特性給 HBV慢性持續(xù)感染的治療帶來(lái)新的希望。 ? HBcAg可在受染的肝細(xì)胞核中查到 , 但它主要 在 胞 質(zhì) 中 產(chǎn) 生 , 由 胞 核 定 位 序 列 〔 n u c l e a r localization sequ
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