乙肝核心抗原的檢測與應(yīng)用-預(yù)覽頁
【正文】 究的新興領(lǐng)域，它作為一種全新的高效免疫方法，己在許多難治性感染性疾病、自身免疫性疾病、過敏性疾病和腫瘤性疾病的預(yù)防及治療領(lǐng)域顯示出較好的應(yīng)用前景。HBV核心抗原區(qū) AA1AA151段含有多個(gè)不連續(xù)的抗原表位，對刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性的體液免疫和細(xì)胞免疫均具有重要作用。 第十頁，共四十二頁。 第十一頁，共四十二頁。 ? 第十二頁，共四十二頁。 以往認(rèn)為血清中僅 HBsAg陽性者 ， 病毒為非復(fù)制相 ， 無傳染性 ， 但這種患者中 ， 也有檢測出 HBcAg、 HBV DNA陽性者 ，故判斷單項(xiàng)血清 HBsAg陽性者的傳染性時(shí)應(yīng)慎重 。 第十四頁，共四十二頁。 第十五頁，共四十二頁。 慢性活動(dòng)性肝炎中血 HBcAg陽性率明顯高于 ASC〔無病癥病毒攜帶者〕，說明血 HBcAg陽性較多見于病變活動(dòng)較重的慢性肝炎而較少見于病變較靜止的 ASC。 HBcAg的臨床意義 〔 1〕對血液內(nèi) HBV的開殼處理，能直接檢測HBcAg，能比 HBeAg更客觀地反映血 HBV的存在，以及作出數(shù)量多少的判斷，可替代 HBeAg而作為病毒復(fù)制和傳染性的敏感指標(biāo)，是病毒存在的直接標(biāo)志。 第十八頁，共四十二頁。 HBcAg含量與肝臟損害的情況有關(guān)，有助于抗病毒藥物及免疫治療的療效評價(jià)。在不具備 PCR檢測條件的單位，以酶聯(lián)〔 ELISA〕法試劑盒在檢測血清 HBV五項(xiàng)標(biāo)志的同時(shí)，檢測 HBcAg不僅能進(jìn)一步了解病毒的復(fù)制情況，還可了解肝細(xì)胞損害和病情進(jìn)展的程度，且檢測費(fèi)用低廉，有臨床實(shí)用價(jià)值。 HBcAg HBcAg主要存在于 HBV顆粒和受染的肝細(xì)胞中， HBV復(fù)制時(shí) HBcAg表達(dá)于肝細(xì)胞內(nèi)，分胞核型、胞質(zhì)型和胞膜型。 HBV高復(fù)制期 HBcAg以胞核表達(dá)為主 ， 無或很少在胞質(zhì)內(nèi)表達(dá)；而低復(fù)制期時(shí)相反 ， HBcAg在肝細(xì)胞核內(nèi)而不是細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的表達(dá)程度能夠精確地反映慢性乙型肝炎患者的病毒復(fù)制水平 。 HBcAg與 HBeAg關(guān)系 HBcAg與 HBeAg常同時(shí)表達(dá)在肝細(xì)胞內(nèi)，但在亞細(xì)胞水平有重要差異。 HBcAg與肝組織炎癥活動(dòng)關(guān)系 血清 HBV DNA、 HBeAg和定位于核內(nèi)的HBcAg都與肝組織的損害程度無關(guān) 。 HBcAg與肝組織炎癥活動(dòng)關(guān)系 光鏡下發(fā)現(xiàn)漿膜型 HBcAg多分布于碎屑樣壞死及灶性壞死區(qū) ， 漿膜型 HBcAg陽性肝細(xì)胞常有各種變化 ， 或明顯萎縮 ， 或腫脹變形 。 第二十六頁，共四十二頁。 第二十七頁，共四十二頁。 ，肝內(nèi) HBcAg表達(dá)特點(diǎn) HBV合并 HDV感染者的肝組織中，HBcAg和 HDAg陽性細(xì)胞分布關(guān)系不密切，HBcAg陽性細(xì)胞明顯少于 HDAg陽性細(xì)胞，HBcAg主要呈核型表達(dá)，胞質(zhì)中陽性顆粒較少見到，表達(dá)強(qiáng)度也較弱，說明 HDV感染者 HBV是低水平復(fù)制， HDV可能有抑制 HBV基因復(fù)制或病毒抗原表達(dá)的作用，特別是在 HDV復(fù)制活潑的階段，即 HDAg大量表達(dá)時(shí)， HBV復(fù)制受到的抑制最為明顯。在兒童慢性乙型肝炎患者中，肝內(nèi) HBcAg呈彌漫性分布者為病毒感染早期， HBcAg呈局灶性分布并伴隨 HBeAg陽性者為疾病短期內(nèi)進(jìn)展的標(biāo)志。 HBcAg檢測的應(yīng)用價(jià)值 〔 2〕有助于評估肝細(xì)胞壞死炎性活動(dòng)的程度及病變開展的趨向，推測慢性乙型肝炎的預(yù)后。 HBcAg檢測的應(yīng)用價(jià)值 〔 3〕 HBcAg檢測也是判斷 HBV復(fù)制狀態(tài)的一項(xiàng)重要指標(biāo)，肝組織 HBcAg與 HBV DNA兩種病毒復(fù)制標(biāo)志物相關(guān)。說明 HBV有可能在多種組織內(nèi)復(fù)制并表達(dá)抗原。對HBcAg的強(qiáng)免疫原特性的認(rèn)識，可以指導(dǎo)我們研制更有效的預(yù)防或治療乙型病毒性肝炎的疫苗。 步驟 〔 1〕 標(biāo)本處理：取血清檢測 。 將上述的 HBsAb包被板每孔參加 100ul開殼劑 〔 空白對照孔不加 〕 ， 置 45℃ 溫育 30分鐘 。 第三十八頁，共四十二頁。 〔 6〕 結(jié)果判定 。 步驟 〔 5〕 顯色 。 Cutoff值 〔 界限值 〕 =陰性對照OD均值 /。 內(nèi)容總結(jié) HBcAg的檢測與應(yīng)用。
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