乙肝核心抗原的檢測與應(yīng)用(存儲(chǔ)版)
【正文】 當(dāng) HBeAg/抗 HBe轉(zhuǎn)換后， HBV復(fù)制趨于減少，沒有傳染性或傳染性很小。血清中的 HBcAg陽性與肝臟病變活動(dòng)程度有關(guān)，且對(duì)估計(jì)預(yù)后有很好價(jià)值。 HBcAg的臨床意義 〔 2〕有助于對(duì)乙型肝炎病情和預(yù)后的判斷， HBcAg感染的肝細(xì)胞是細(xì)胞免疫效應(yīng)攻擊的靶細(xì)胞，肝細(xì)胞溶解后HBcAg可直接釋放入血，故能直接反映肝細(xì)胞損害和病情進(jìn)展的程度。 第二十頁，共四十二頁。 肝 HBcAg與血清 HBV DNA水平呈正相關(guān) 。 慢性 HBV感染者肝組織中漿膜型 HBcAg的表達(dá)強(qiáng)度隨肝組織病變活性積分 〔 HAI〕 評(píng)分值的增高而增強(qiáng) ， HAI評(píng)分值低者核型 HBcAg的表達(dá)增強(qiáng) 。 HBcAg與肝組織炎癥活動(dòng)關(guān)系 乙型肝炎引起的肝硬化肝組織中 HBcAg、 HBV DNA的陽性率較高。 第二十九頁，共四十二頁。肝細(xì)胞內(nèi) HBcAg轉(zhuǎn)陰和肝細(xì)胞壞死病變減輕具有一致性。這可能是 HBV通過產(chǎn)婦傳播，導(dǎo)致新生兒乙型肝炎的高發(fā)病率、新生兒發(fā)育不良和死亡的重要因素。 〔 2〕 乙肝病毒 Dane顆粒的別離 。 步驟 〔 5〕 顯色 。 將上述的 HBcAb包被板每孔中加底物液 A、 B各 50ul， 混勻 ， 室溫放置 1020分鐘 。 HBcAg出現(xiàn)的陽性率與 HBsAg的出現(xiàn)密切相關(guān)，往往 HBcAg〔＋〕與HBsAg〔＋〕同時(shí)存在，而 HBsAg〔＋〕時(shí)不一定會(huì)出現(xiàn) HBcAg〔＋〕。 第四十一頁，共四十二頁。 第三十九頁，共四十二頁。 將上述的HBsAb包被板每孔中的開殼液轉(zhuǎn)移 50ul至相應(yīng)的已用蒸餾水洗 2次并拍干的HBcAg包被板中 〔 注意每份樣品要更換一個(gè)吸頭 ， 以防交叉污染 〕 ， 然后每孔參加 HBcAb酶結(jié)合物 50ul〔 空白對(duì)照孔不加 〕 ， 混勻并封板 ， 置 45℃ 溫育 30分鐘 ， 棄去孔內(nèi)液體并用蒸餾水洗 7次并拍干 。 第三十六頁，共四十二頁。 HBcAg表達(dá) 國內(nèi)學(xué)者對(duì)乙型肝炎孕婦所分娩的死胎進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn) HBcAg在多種臟器內(nèi)均可表達(dá)，其中以肺、肝、腎臟、臍帶為最高，胸腺、心臟、脾、胎盤次之，大腦最低。 第三十一頁，共四十二頁。 第二十八頁，共四十二頁。 HBcAg在胞質(zhì)內(nèi)表達(dá)預(yù)示預(yù)后不良 。 第二十四頁，共四十二頁。 HBcAg與 HBV DNA關(guān)系 肝內(nèi) HBcAg與 HBV DNA的分布區(qū)域常較一致 ，有的肝細(xì)胞可同時(shí)檢出 HBcAg和 HBV DNA， 但多數(shù)HBV DNA〔 ＋ 〕 肝細(xì)胞并不同時(shí)含有 HBcAg。因此，兩種檢測方法可以互補(bǔ)使用，以減少漏檢。它可與其他的 HBV血清學(xué)標(biāo)志物起到相互配合和相互補(bǔ)充的作用。 第十六頁，共四十二頁。 多年來 ， 一直認(rèn)為 e抗原是復(fù)制標(biāo)記物 ， 由于 HBeAg是 HBcAg的降解產(chǎn)物 ， 以可溶性蛋白形式存在 ， 在結(jié)構(gòu)上不及 HBcAg與病毒顆粒關(guān)系密切 ，對(duì)判斷病毒復(fù)制 、 評(píng)估傳染性不及 HBcAg敏感可靠 。如用 EIA微板法檢測血清 HBcAg，被檢標(biāo)本不須任何處理，直接在微孔板內(nèi)進(jìn)行檢測，應(yīng)用于臨床，可與乙型肝炎病毒標(biāo)志物同步檢測。這一結(jié)果為我們進(jìn)一步探索該DNA疫苗在治療主要因機(jī)體 CTL功能低下所致 HBV慢性持續(xù)感染方面的應(yīng)用前景奠定了初步的實(shí)驗(yàn)研究根底。 第八頁，共四十二頁。 第六頁，共四十二頁。 HBcAg己被證明含有 HBV特異性 DNA聚合酶，是 HBV復(fù)制的標(biāo)志。 0 引言 乙型肝炎病毒〔 HBV〕是嗜肝 DNA病毒，完整的 HBV顆粒又稱 Dane顆粒，球形，直徑約42urn。 摘要 HBcAg存在于 Dane顆粒的核心，是 HBV的結(jié)構(gòu)蛋白即病毒核殼蛋白，具有重要的生物學(xué)特性和臨床病理意義， HBcAg由 HBV基因組的 C開放讀碼區(qū)〔 ORF〕編碼，具有高度免疫原性，對(duì) HBcAg的免疫應(yīng)答在病毒去除中有重要作用。 第三頁，共四十二頁。 胞核定位序列位于 HBcAg的羧基末端區(qū) 〔 C端區(qū) 〕 第145156位和第 172183位的氨基酸序列 ， 具有與細(xì)胞核特異性結(jié)合 ， 并將與之相連的蛋白或 DNA轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞核中的功能 。 Th1和Th2細(xì)胞通
環(huán)評(píng)公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1