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乙肝核心抗原的檢測與應用(文件)

2025-10-01 14:34 上一頁面

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【正文】 以上的較大兒童, HBcAg呈局灶性分布比彌漫性分布者, ALT水平較高并伴有較明顯的肝臟炎癥活動。 第三十一頁,共四十二頁。 第三十二頁,共四十二頁。 HBcAg表達 國內學者對乙型肝炎孕婦所分娩的死胎進行研究,發(fā)現(xiàn) HBcAg在多種臟器內均可表達,其中以肺、肝、腎臟、臍帶為最高,胸腺、心臟、脾、胎盤次之,大腦最低。 3 小結 總之,充分認識 HBcAg的生物學特點和其在血液、肝組織內表達的規(guī)律,有助于我們通過對 HBcAg的檢測而正確判斷是否有 HBV的復制以及復制的強度,正確評估肝病活動及肝組織損害的程度,從而指導制定有效的治療方案。 第三十六頁,共四十二頁。 〔 3〕 加開殼劑釋放出 HBcAg。 將上述的HBsAb包被板每孔中的開殼液轉移 50ul至相應的已用蒸餾水洗 2次并拍干的HBcAg包被板中 〔 注意每份樣品要更換一個吸頭 , 以防交叉污染 〕 , 然后每孔參加 HBcAb酶結合物 50ul〔 空白對照孔不加 〕 , 混勻并封板 , 置 45℃ 溫育 30分鐘 , 棄去孔內液體并用蒸餾水洗 7次并拍干 。 每孔中參加終止液 〔 2MH2SO4〕 50ul,混勻 , 選擇波長 450nm, 空白孔調零 , 上酶標儀測 OD值 。 第三十九頁,共四十二頁。 〔 6〕 結果判定 。 第四十一頁,共四十二頁。一般認為,當 HBeAg/抗 HBe轉換后, HBV復制趨于減少,沒有傳染性或傳染性很小 第四十二頁,共四十二頁。 HBcAg出現(xiàn)的陽性率與 HBsAg的出現(xiàn)密切相關,往往 HBcAg〔+〕與HBsAg〔+〕同時存在,而 HBsAg〔+〕時不一定會出現(xiàn) HBcAg〔+〕。 標本 OD值 ≤Cutoff值 , 為陽性;OD值> Cutoff值 , 為陰性 。 將上述的 HBcAb包被板每孔中加底物液 A、 B各 50ul, 混勻 , 室溫放置 1020分鐘 。 Cutoff值 〔 界限值 〕 =陰性對照 OD均值 /。 步驟 〔 5〕 顯色 。 第三十七頁,共四十二頁。 〔 2〕 乙肝病毒 Dane顆粒的別離 。 第三十五頁,共四十二頁。這可能是 HBV通過產(chǎn)婦傳播,導致新生兒乙型肝炎的高發(fā)病率、新生兒發(fā)育不良和死亡的重要因素。研究結果證實肝組織 HBcAg檢測具有多種實用價值,值得推薦。肝細胞內 HBcAg轉陰和肝細胞壞死病變減輕具有一致性。 第三十頁,共四十二頁。 第二十九頁,共四十二頁。 HBcAg與肝組織炎癥活動關系 觀察肝內顆 HBcAg粒的分布類型 , 有助于判斷 HBV在肝組織中的復制狀況;肝組織病變的活動程度 。 HBcAg與肝組織炎癥活動關系 乙型肝炎引起的肝硬化肝組織中 HBcAg、 HBV DNA的陽性率較高。 增生胞核抗原 〔 PCNA〕〕 是再生肝細胞的標志 ,代表肝組織的炎癥活性 , PCNA與胞質 HBcAg表達程度正相關 , 但不是胞核型 HBcAg的獨立影響因素 。 慢性 HBV感染者肝組織中漿膜型 HBcAg的表達強度隨肝組織病變活性積分 〔 HAI〕 評分值的增高而增強 , HAI評分值低者核型 HBcAg的表達增強 。在病毒活潑復制的 ASC,常有較強的 HBcAg胞核表達和 HBeAg胞質表達;活動性慢性乙型肝炎時常有 HBcAg的胞質表達,因免疫去除而病毒減少,難以檢出 HBeAg。 肝 HBcAg與血清 HBV DNA水平呈正相關 。Delladetsima et al發(fā)現(xiàn)膽管上皮細胞也是HBV的適合宿主, HBV能夠在其中復制并表達 HBcAg和 HBsAg抗原。 第二十頁,共四十二頁。 第十九頁,共四十二頁。 HBcAg的臨床意義 〔 2〕有助于對乙型肝炎病情和預后的判斷, HBcAg感染的肝細胞是細胞免疫效應攻擊的靶細胞,肝細胞溶解后HBcAg可直接釋放入血,故能直接反映肝細胞損害和病情進展的程度。它與 HBV復制標志呈正相關,可以反映 HBV活動的復制程度。血清中的 HBcAg陽性與肝臟病變活動程度有關,且對估計預后有很好價值。 HBcAg與 HBV DNA、 HBV DNAP的關系 在慢性乙型肝炎患者中,
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