乙肝核心抗原的檢測(cè)與應(yīng)用(文件)
【正文】 以上的較大兒童， HBcAg呈局灶性分布比彌漫性分布者， ALT水平較高并伴有較明顯的肝臟炎癥活動(dòng)。 第三十一頁(yè)，共四十二頁(yè)。 第三十二頁(yè)，共四十二頁(yè)。 HBcAg表達(dá) 國(guó)內(nèi)學(xué)者對(duì)乙型肝炎孕婦所分娩的死胎進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn) HBcAg在多種臟器內(nèi)均可表達(dá)，其中以肺、肝、腎臟、臍帶為最高，胸腺、心臟、脾、胎盤次之，大腦最低。 3 小結(jié) 總之，充分認(rèn)識(shí) HBcAg的生物學(xué)特點(diǎn)和其在血液、肝組織內(nèi)表達(dá)的規(guī)律，有助于我們通過(guò)對(duì) HBcAg的檢測(cè)而正確判斷是否有 HBV的復(fù)制以及復(fù)制的強(qiáng)度，正確評(píng)估肝病活動(dòng)及肝組織損害的程度，從而指導(dǎo)制定有效的治療方案。 第三十六頁(yè)，共四十二頁(yè)。 〔 3〕 加開(kāi)殼劑釋放出 HBcAg。 將上述的HBsAb包被板每孔中的開(kāi)殼液轉(zhuǎn)移 50ul至相應(yīng)的已用蒸餾水洗 2次并拍干的HBcAg包被板中 〔 注意每份樣品要更換一個(gè)吸頭 ， 以防交叉污染 〕 ， 然后每孔參加 HBcAb酶結(jié)合物 50ul〔 空白對(duì)照孔不加 〕 ， 混勻并封板 ， 置 45℃ 溫育 30分鐘 ， 棄去孔內(nèi)液體并用蒸餾水洗 7次并拍干 。 每孔中參加終止液 〔 2MH2SO4〕 50ul，混勻 ， 選擇波長(zhǎng) 450nm， 空白孔調(diào)零 ， 上酶標(biāo)儀測(cè) OD值 。 第三十九頁(yè)，共四十二頁(yè)。 〔 6〕 結(jié)果判定 。 第四十一頁(yè)，共四十二頁(yè)。一般認(rèn)為，當(dāng) HBeAg/抗 HBe轉(zhuǎn)換后， HBV復(fù)制趨于減少，沒(méi)有傳染性或傳染性很小 第四十二頁(yè)，共四十二頁(yè)。 HBcAg出現(xiàn)的陽(yáng)性率與 HBsAg的出現(xiàn)密切相關(guān)，往往 HBcAg〔＋〕與HBsAg〔＋〕同時(shí)存在，而 HBsAg〔＋〕時(shí)不一定會(huì)出現(xiàn) HBcAg〔＋〕。 標(biāo)本 OD值 ≤Cutoff值 ， 為陽(yáng)性；OD值＞ Cutoff值 ， 為陰性 。 將上述的 HBcAb包被板每孔中加底物液 A、 B各 50ul， 混勻 ， 室溫放置 1020分鐘 。 Cutoff值 〔 界限值 〕 =陰性對(duì)照 OD均值 /。 步驟 〔 5〕 顯色 。 第三十七頁(yè)，共四十二頁(yè)。 〔 2〕 乙肝病毒 Dane顆粒的別離 。 第三十五頁(yè)，共四十二頁(yè)。這可能是 HBV通過(guò)產(chǎn)婦傳播，導(dǎo)致新生兒乙型肝炎的高發(fā)病率、新生兒發(fā)育不良和死亡的重要因素。研究結(jié)果證實(shí)肝組織 HBcAg檢測(cè)具有多種實(shí)用價(jià)值，值得推薦。肝細(xì)胞內(nèi) HBcAg轉(zhuǎn)陰和肝細(xì)胞壞死病變減輕具有一致性。 第三十頁(yè)，共四十二頁(yè)。 第二十九頁(yè)，共四十二頁(yè)。 HBcAg與肝組織炎癥活動(dòng)關(guān)系 觀察肝內(nèi)顆 HBcAg粒的分布類型 ， 有助于判斷 HBV在肝組織中的復(fù)制狀況；肝組織病變的活動(dòng)程度 。 HBcAg與肝組織炎癥活動(dòng)關(guān)系 乙型肝炎引起的肝硬化肝組織中 HBcAg、 HBV DNA的陽(yáng)性率較高。 增生胞核抗原 〔 PCNA〕〕 是再生肝細(xì)胞的標(biāo)志 ，代表肝組織的炎癥活性 ， PCNA與胞質(zhì) HBcAg表達(dá)程度正相關(guān) ， 但不是胞核型 HBcAg的獨(dú)立影響因素 。 慢性 HBV感染者肝組織中漿膜型 HBcAg的表達(dá)強(qiáng)度隨肝組織病變活性積分 〔 HAI〕 評(píng)分值的增高而增強(qiáng) ， HAI評(píng)分值低者核型 HBcAg的表達(dá)增強(qiáng) 。在病毒活潑復(fù)制的 ASC，常有較強(qiáng)的 HBcAg胞核表達(dá)和 HBeAg胞質(zhì)表達(dá)；活動(dòng)性慢性乙型肝炎時(shí)常有 HBcAg的胞質(zhì)表達(dá)，因免疫去除而病毒減少，難以檢出 HBeAg。 肝 HBcAg與血清 HBV DNA水平呈正相關(guān) 。Delladetsima et al發(fā)現(xiàn)膽管上皮細(xì)胞也是HBV的適合宿主， HBV能夠在其中復(fù)制并表達(dá) HBcAg和 HBsAg抗原。 第二十頁(yè)，共四十二頁(yè)。 第十九頁(yè)，共四十二頁(yè)。 HBcAg的臨床意義 〔 2〕有助于對(duì)乙型肝炎病情和預(yù)后的判斷， HBcAg感染的肝細(xì)胞是細(xì)胞免疫效應(yīng)攻擊的靶細(xì)胞，肝細(xì)胞溶解后HBcAg可直接釋放入血，故能直接反映肝細(xì)胞損害和病情進(jìn)展的程度。它與 HBV復(fù)制標(biāo)志呈正相關(guān)，可以反映 HBV活動(dòng)的復(fù)制程度。血清中的 HBcAg陽(yáng)性與肝臟病變活動(dòng)程度有關(guān)，且對(duì)估計(jì)預(yù)后有很好價(jià)值。 HBcAg與 HBV DNA、 HBV DNAP的關(guān)系 在慢性乙型肝炎患者中，
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