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抗原與抗體的相互作用及免疫學檢測-資料下載頁

2025-05-13 20:18本頁面
  

【正文】 引起溶菌、溶血效應。用補體結合試驗既可以測知患者血清中補體的總量,也可以檢測未知抗原或抗體的量。 測定人血清補體總量的方法是以綿羊紅血球的溶血為指示。當綿羊紅血球與抗綿羊紅血球結合后,加患者血清,觀測溶血程度。 用于測定未知抗原 /抗體時,采用兩套系統(tǒng),一套是待測的抗原抗體系統(tǒng),稱為檢測系統(tǒng),一套是包括綿羊紅血球和抗綿羊紅血球抗體的指示系統(tǒng)。待測系統(tǒng)中有無待測得抗原 /抗體是利用指示系統(tǒng)中是否出現(xiàn)溶血來判斷。 反應的過程是首先加待測得抗原 /抗體,反應一段時間后加入補體,在反應一段時間后加指示系統(tǒng)。有待測抗原抗體結合時,必然結合補體,不會出現(xiàn)溶血,沒有待測物質(zhì)時出現(xiàn)溶血。 四、熒光抗體技術 免疫熒光法是將熒光素與特異性血清抗體以化學方式結合起來,然后將此熒光標記了的抗體作為一種試劑在特定條件下浸染標本,使與標本中相應的抗原產(chǎn)生結合反應,再在熒光顯微鏡下,以紫外光為光源進行觀察。當出現(xiàn)熒光時,表明標記抗體存在,相應的抗原也存在。 免疫熒光法有直接法和間接法兩種。 第四節(jié) 免疫親和層析 生物高分子具有能和某種相對應的專一分子可逆結合的特性,例如酶的活性中心或別構中心能和專一的底物、抑制劑、輔助因子效應劑通過某些次級鍵相結合,并在一定條件下又可以解離??贵w與抗原,激素及其受體,核糖核酸與其互補的脫氧核糖核酸等體系,都具有類似的特性。這種高分子和配基之間形成專一的可解離的復合物的能力稱為親和力。根據(jù)這種具有親和力的生物分子間可逆的結合和解離的原理發(fā)展起來的層析就稱為親和層析。 親和層析法的基本過程: 偶聯(lián):將欲分離的高分子物質(zhì)的配基在不影響其生物功能的情況下與水不相溶性的載體結合,制成親和吸附劑或免疫吸附劑。 裝柱:在層析柱內(nèi)裝入固相化的配基 親和層析:含有高分子物質(zhì)的混合液在有利于配基和高分子之間形成復合物的條件下進入裝有親和吸附劑的層析柱。高分子物質(zhì)結合留在柱內(nèi),其他雜質(zhì)流出。 洗脫:改變條件,促使配基和高分子物質(zhì)分離而釋放出需要的物質(zhì)。 再生:將親和層析柱的充分洗滌再生,用于下一周期的純化工作。
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