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抗原與抗體的相互作用及免疫學檢測(完整版)

2025-06-30 20:18上一頁面

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【正文】 抗原抗體分子間的作用力,即親和力包括以下幾種: 鹽鍵(離子鍵) 范德華力 疏水作用 氫鍵 二、 抗原與抗體結(jié)合的可逆性 抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)是一個可逆的反應(yīng) Ab+Ag Ab:Ag 由于抗原抗體結(jié)合的可逆性,可利用親和層析法分離純化抗原或抗體;利用待測抗原和標準抗原與抗體的競爭結(jié)合,進行抗原或抗體的定量測定,如放免檢測法、酶聯(lián)免疫吸附法等 三、抗原與抗體反應(yīng)中量的關(guān)系 當抗體與抗原結(jié)合時,如果是顆??乖?,則出現(xiàn)凝集現(xiàn)象;如果是可溶性抗原,則產(chǎn)生沉淀作用。在這一免疫應(yīng)答過程中,除依賴于抗原物質(zhì)有特定的化學結(jié)構(gòu)外,還依賴于動物機體的免疫應(yīng)答能力。 佐劑在抗血清制備中的作用: 由于佐劑有吸附和包埋抗原的 “ 儲藏所 ” 作用,延長了抗原在體內(nèi)的存留時間,便于抗原較長時間的、不間斷的刺激機體免疫系統(tǒng),使初次反應(yīng)與再次反應(yīng)結(jié)合在一起,其免疫效果更為理想。 抗血清制備:血液室溫放置 12h或冰箱內(nèi) 4度過夜,血清便可充分析出,用滴管吸出或離心分離取得。 硫銨鹽析和 DEAE纖維素柱層析法純化 IgG 在 IgG帶正電,其他血清蛋白帶負電,因此陰離子交換劑 DEAE纖維素可以一次將 IgG提純到很高的純度 IgM的純化方法: 18%飽和度硫銨沉淀+DEAE纖維素柱層析法。 絮狀沉淀反應(yīng) 一系列試管中加入等量的抗體和遞增量的抗原,在中性條件下 37度保溫 12h,便可見到絮狀的蛋白質(zhì)沉淀。當抗原、抗體存在多種體系時,會出現(xiàn)多條沉淀弧。只不過其檢測的對象和檢測的目的各有不同。有待測抗原抗體結(jié)合時,必然結(jié)合補體,不會出現(xiàn)溶血,沒有待測物質(zhì)時出現(xiàn)溶血。 親和層析法的基本過程: 偶聯(lián):將欲分離的高分子物質(zhì)的配基在不影響其生物功能的情況下與水不相溶性的載體結(jié)合,制成親和吸附劑或免疫吸附劑。高分子物質(zhì)結(jié)合留在柱內(nèi),其他雜質(zhì)流出。當出現(xiàn)熒光時,表明標記抗體存在,相應(yīng)的抗原也存在。用補體結(jié)合試驗既可以測知患者血清中補體的總量,也可以檢測未知抗原或抗體的量。 抗原抗體為單一體系時,抗原濃度不同,沉淀弧的特征不同:
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