抗原與抗體的相互作用及免疫學(xué)檢測(參考版)
2025-05-17 20:18本頁面
【正文】 再生：將親和層析柱的充分洗滌再生，用于下一周期的純化工作。高分子物質(zhì)結(jié)合留在柱內(nèi)，其他雜質(zhì)流出。 親和層析法的基本過程： 偶聯(lián)：將欲分離的高分子物質(zhì)的配基在不影響其生物功能的情況下與水不相溶性的載體結(jié)合，制成親和吸附劑或免疫吸附劑。這種高分子和配基之間形成專一的可解離的復(fù)合物的能力稱為親和力。 第四節(jié) 免疫親和層析 生物高分子具有能和某種相對(duì)應(yīng)的專一分子可逆結(jié)合的特性，例如酶的活性中心或別構(gòu)中心能和專一的底物、抑制劑、輔助因子效應(yīng)劑通過某些次級(jí)鍵相結(jié)合，并在一定條件下又可以解離。當(dāng)出現(xiàn)熒光時(shí)，表明標(biāo)記抗體存在，相應(yīng)的抗原也存在。有待測抗原抗體結(jié)合時(shí)，必然結(jié)合補(bǔ)體，不會(huì)出現(xiàn)溶血，沒有待測物質(zhì)時(shí)出現(xiàn)溶血。待測系統(tǒng)中有無待測得抗原 /抗體是利用指示系統(tǒng)中是否出現(xiàn)溶血來判斷。當(dāng)綿羊紅血球與抗綿羊紅血球結(jié)合后，加患者血清，觀測溶血程度。用補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)既可以測知患者血清中補(bǔ)體的總量，也可以檢測未知抗原或抗體的量。只不過其檢測的對(duì)象和檢測的目的各有不同。根據(jù)沉淀圈的大小確定抗原的含量 另外還有其他眾多的免疫檢測技術(shù)和手段，其機(jī)理都利用了抗原抗體的沉淀反應(yīng)。與雙向擴(kuò)散不同的是在瓊脂中含有一定量的抗體，孔內(nèi)加入未知量的相應(yīng)抗原。 抗原抗體為單一體系時(shí)，抗原濃度不同，沉淀弧的特征不同： 抗原抗體為多體系時(shí)，出現(xiàn)的沉淀弧有多條，彼此互不干擾。當(dāng)抗原、抗體存在多種體系時(shí)，會(huì)出現(xiàn)多條沉淀弧。可觀測到沉淀弧。 雙向擴(kuò)散：又稱瓊脂擴(kuò)散，是利用瓊脂凝膠作介質(zhì)的一種沉淀反應(yīng)。 環(huán)狀沉淀反應(yīng) 在試管中加入抗體后，小心加入相應(yīng)抗原，使抗原抗體步混合， 37度保溫 1020min，在二者界面上出現(xiàn)環(huán)狀沉淀。 絮狀沉淀反應(yīng) 一系列試管中加入等量的抗體和遞增量的抗原，在中性條件下 37度保溫 12h，便可見到絮狀的蛋白質(zhì)沉淀。凝集反應(yīng)中抗原稱為凝集原，抗體稱為凝集素。 一、凝集反應(yīng) 凝集反應(yīng)是指顆粒抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合反應(yīng)出現(xiàn)的可見性現(xiàn)象?？梢娦苑磻?yīng)的出現(xiàn)，對(duì)抗原抗體分子合適比
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