選修三專題一12基因工程的基本操作程序?qū)W(xué)案-資料下載頁
2025-11-15 15:36本頁面
【導(dǎo)讀】簡述基因工程原理及基本操作程序。一個(gè)基因表達(dá)載體的組成除了________外，還必須有______、______以及________等。______________是轉(zhuǎn)基因動(dòng)物中采用最多，也是最為有效的一。種將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞的方法。大腸桿菌細(xì)胞最常用的轉(zhuǎn)化方法是：首先用_______. 要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，檢測方法是___________。蛋白質(zhì)，方法是______________。除了上述分子檢測外，有的還需要進(jìn)行。為什么要建立cDNA文庫？PCR技術(shù)擴(kuò)增的過程是？為什么要構(gòu)建基因表達(dá)載體？單獨(dú)的DNA片段能不能穩(wěn)定遺傳？基因表達(dá)載體的構(gòu)成包括哪些元件？什么是啟動(dòng)子、終止子？需要提供胸腺嘧啶個(gè)。們產(chǎn)生，再加入，才可形成C。為使過程⑧更易進(jìn)行，可用（藥劑）處理D。
【正文】 數(shù)是 （ ） A． 3 B． 4 C． 9 D． 12 圖為某種質(zhì)粒表達(dá)載體簡圖，小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶 EcoRI、 BamHI 的酶切位點(diǎn)， ampR 為青霉素抗性基因， tctR為四環(huán)素抗性基因， P 為啟動(dòng)因子， T 為終止子， ori為復(fù)制原點(diǎn)。已知目的基因的兩端分別有包括 EcoRI、 BamHI 在內(nèi)的多種酶的酶切位點(diǎn)。 （ 1） 將含有目的基因的 DNA 與質(zhì)粒表達(dá)載體分別用 EcoRI 酶切，酶切產(chǎn)物用 DNA 連接酶進(jìn)行連接后，其中由兩個(gè) DNA 片段之間連接形 成的產(chǎn)物有 ___________________、 _______、 ________________________三種。若要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質(zhì)粒，需要對這些連接產(chǎn)物進(jìn)行 。 （ 2）用上述 3種連接產(chǎn)物與無任何抗藥性的原核宿主細(xì)胞 進(jìn)行轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。之后將這些宿主細(xì)胞 接種到含四環(huán) 素 的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是 ；若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是 。 （ 3）目的基因表達(dá)時(shí)， RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點(diǎn)是 ，其合成的產(chǎn)物是 。 （ 4）在上述實(shí)驗(yàn)中，為了防止目的基因和質(zhì)粒表達(dá)載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，酶切時(shí)應(yīng)選用的酶 是 。 人體細(xì)胞內(nèi)含有抑制癌癥發(fā)生的 p53 基因，生物技術(shù)可對此類基因的變化進(jìn)行檢測。 5 (1)目的基因的獲取方法通常包括 __________________和 __________________。 (2)上圖表示從正常人和患者體內(nèi)獲取的 p53 基因的部分區(qū)域。與正常人 相比，患者在該區(qū)域的堿基會發(fā)生改變，在上圖中用方框圈出發(fā)生改變的堿基對；這種變異被稱為____________________。 (3)已知限制酶 E 識別序列為 CCGG，若用限制酶 E 分別完全切割正常人和患者的 p53 基因部分區(qū)域 (見上圖 )，那么正常人的會被切成 ______個(gè)片段；而患者的則被切割成長度為______對堿基和 ______對堿基的兩種片段。 (4)如果某人的 p53 基因部分區(qū)域經(jīng)限制酶 E 完全切割后 ，共出現(xiàn) 170、 2 290 和 460 堿基對的四種片段，那么該人的基因型是 ________(以 P+表示正常基因， P表示異?；?)。 6
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