【正文】 基靈敏度試驗n 總結和失敗原因調(diào)查88使用范圍計劃外的驗證 ： 如工藝重大改變，設施設備改造等偏差原因：無菌實驗失敗，根據(jù)偏差調(diào)查結果的要求環(huán)境監(jiān)測結果明顯反常，根據(jù)偏差調(diào)查結果的要求某個區(qū)域的空調(diào)關閉時間超過驗證的時間段89培養(yǎng)基灌裝試驗應考慮的因素n 培養(yǎng)基的選擇n 培養(yǎng)基促生長能力n 灌裝數(shù)量n 環(huán)境監(jiān)測方案n 收集和培養(yǎng)n 最差條件的挑戰(zhàn)90培養(yǎng)基的選擇n 適應廣譜微生物生長n 較好的澄明度，較小的粘度n 可除菌過濾n 常用培養(yǎng)基： 3％大豆胰蛋白肉湯（ TSB）粉針劑：? 聚乙二醇，乳糖和 /或肉湯粘稠的乳膏劑：n混于肉湯中的瓊脂和羧甲基纖維素 91培養(yǎng)基促生長能力n 靈敏度試驗取灌裝前、中、后各階段的培養(yǎng)基樣品枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠球菌、綠膿桿菌、黑曲霉菌、環(huán)境菌每個菌種接種 2支，計數(shù) 100cfu/瓶2025176。C/3035176。C培養(yǎng) 5天內(nèi)生長92灌裝數(shù)量n 批次量足夠大n 灌裝量一般 5000~10000瓶n 批量小的 (低于 5000瓶 )以全批數(shù)量灌裝93環(huán)境監(jiān)測n 全面、全過程檢測n 對無菌生產(chǎn)區(qū)環(huán)境的評估n 對人員資格的確認 (所有無菌區(qū)工作人員）n 環(huán)境的清潔：灌裝結束 4小時內(nèi)94收集和培養(yǎng)n 按灌裝的先后順序軋蓋n 翻轉(zhuǎn)接觸所有表面n 培養(yǎng)： 2025度 7天， 3035度 7天 n 在中間轉(zhuǎn)換溫度和培養(yǎng)結束時 100％燈檢n 記錄污染瓶數(shù)n 記錄丟棄的數(shù)量和原因，不得隨意丟棄95最差條件挑戰(zhàn)儲存時間：灌裝設備、灌裝部件、儲罐、無菌物料、藥液在實際灌裝前能夠放置的最長時間? 例 1:用需要再滅菌前的灌裝設備、灌裝部件、儲罐、無菌物料參與培養(yǎng)基灌裝? 例 2:無菌過濾后存放在儲罐內(nèi)的培養(yǎng)基到實際生產(chǎn)時產(chǎn)品的最大儲存時間后再灌裝 96最差條件挑戰(zhàn)n 無菌灌裝時間 在培養(yǎng)基灌裝中模擬用時最長的瓶子滿批量生產(chǎn)需要的時間，其中包括正常的干擾時間（換班、設備維修）n 灌裝速度和瓶子規(guī)格n 灌裝速度和瓶子規(guī)格的關系n 最慢的速度，最大的瓶子規(guī)格n 最小的瓶子規(guī)格，最快的速度97最差條件挑戰(zhàn)n 人員n 培養(yǎng)基灌裝時模擬無菌區(qū)可能容納最多的人數(shù)n 無菌區(qū)工作人員至少每年參與一次培養(yǎng)基灌裝n 操作干擾n 正常的（灌裝線裝配，稱量調(diào)節(jié)，加膠塞，處理倒瓶，取樣，環(huán)境監(jiān)測）n 非正常的（設備故障，灌裝線堵塞，軌道調(diào)節(jié)，拆卸 /替換破損的部件）n 干擾的次數(shù)應該不少于正常生產(chǎn)時發(fā)生的次數(shù)n 工藝氣體n 使用氮氣的，因考慮其不利于微生物生長，以壓縮空氣代替98培養(yǎng)基灌裝失敗后的調(diào)查n 不管批次量有多大 ,只要培養(yǎng)基灌裝中存在污染就意味著無菌保證有問題n 設計合理、操作適當?shù)臒o菌灌裝污染水平應為零灌裝瓶數(shù) 結果判斷5000 如有 1瓶污染，調(diào)查并再驗證5000~10000 如有 1瓶污染，調(diào)查并重復培養(yǎng)基灌裝如有 2瓶污染，調(diào)查并考慮再驗證10000 如有 1瓶污染，進行調(diào)查如有 2瓶污染，調(diào)查并考慮再驗證 99培養(yǎng)基灌裝失敗后的調(diào)查n 環(huán)境和人員監(jiān)測數(shù)據(jù)n 滅菌記錄和設備校驗記錄n 灌裝區(qū)域清潔消毒記錄n 人員培訓記錄n 高效過濾器完整性測試記錄n 壓差記錄n 溶液除菌過濾器完整性測試記錄n 污染菌來源n 丟棄的培養(yǎng)基灌裝瓶n 灌裝時的干擾活動n 其他偏差和干擾活動100容器密封性驗證n 目的：保證滅菌過程后和產(chǎn)品有效期內(nèi)密封系統(tǒng)的完整性n 密閉系統(tǒng)：安瓿或容器 /膠塞系統(tǒng)n 方法：n 物理方法：染料檢漏法，鹽水滲入法，高壓電極檢測機n 微生物檢測法：n 氣溶膠法n 將灌裝培養(yǎng)基的壓蓋容器放置在充滿微生物的氣溶膠腔室內(nèi)，保持一定溫度、壓力、濕度和時間n 微生物浸泡法n 將灌裝培養(yǎng)基的壓蓋容器倒置在一定濃度的特定微生物的溶液內(nèi)，保持一段時間101微生物浸泡法操作步驟n菌液n待確認密封口n支架n培養(yǎng)基n容器n 選擇試驗菌種（大腸埃希氏菌、銅綠假單胞菌、粘質(zhì)沙雷氏菌）n 制備菌懸液n 一接種環(huán)置 10ml TSB中 3035度培養(yǎng) 1618小時，再置于1000 ml TSB中培養(yǎng) 2224小時，濃度不小于 106/mln 準備灌裝有培養(yǎng)基的西林瓶（按正常程序軋鋁蓋）n 試驗：n 將鋁蓋去除n 倒置于菌懸液中 4小時n 取出后消毒外表面n 培養(yǎng) 7天，每天觀察生長情況n 培養(yǎng)基的陽性試驗102粉針劑、凍干粉針、小容量注射劑工藝驗證的異同粉針劑 凍干粉針 小容量注射劑相同點 遵循一般驗證程序 設計，安裝，運行，性能，產(chǎn)品基本范圍相同：布局設計，建筑材質(zhì)，環(huán)境級別，HEPA， 工藝用水，純蒸汽，清洗滅菌去熱原設備及程序，氣體系統(tǒng)，人員，包裝，無菌工藝，產(chǎn)品工藝不同點 無菌粉末的處理，分裝機，培養(yǎng)基灌裝程序凍干機，無菌過濾器洗烘灌封機，不一定是最終滅菌產(chǎn)品103無菌工藝的再驗證n 法規(guī)性和定期性的再驗證n 計量器具（每年一次）n 培養(yǎng)基灌裝（每年兩次）n 高效過濾器泄漏試驗（每年兩次）n 關鍵滅菌設備及滅菌程序（滅菌釜，熱隧道，凍干機，儲液罐）（每年一次）n 人員（每年一次）n 變更引起的再驗證n 變更應評估對產(chǎn)品質(zhì)量可能的影響n 原料，包材n 工藝參數(shù)或路線n 設備改變或重大維修n 處方改變，批量改變n 偏差、質(zhì)量事故等 104不同品種共線生產(chǎn)的驗證要求n 評估不同品種共線生產(chǎn)的風險，制定控制措施n 核心是防止交叉污染n 制訂有效的清潔規(guī)程n 拆卸、清洗、干燥、儲存、裝配n 清潔劑的選擇n 清潔驗證n 確定殘留物限度標準（化學 /微生物）n 確定取樣點和檢驗方法n 日常監(jiān)控和再驗證105常見問題n “無菌工藝驗證包括工藝無菌性驗證和產(chǎn)品驗證 ”，是否可以理解為在產(chǎn)品注冊申報時就已形成本產(chǎn)品的完整的工藝規(guī)程中規(guī)定的各項參數(shù)的驗證？n 在生產(chǎn)過程中，無菌灌裝線上沉降碟的放置是否應在所用操作開始前完成？n 沉降碟需要暴露多長時間？n 動態(tài)沉降菌檢測中，等結果出來已經(jīng)是 23天后了，如何根據(jù)結果進行判斷？ 106n 壓縮空氣的微生物檢測如何很好的進行？n 請問如何建立警戒限或糾偏限？有無相關的計算公式或技術要求？n 無菌檢查不合格時，如有真菌不合格的情況，可能有哪些原因？最有可能的原因是什么？107謝謝！108謝謝觀看 /歡迎下載BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAI