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實(shí)驗(yàn)動(dòng)物遺傳學(xué)及質(zhì)量控制-資料下載頁(yè)

2025-01-10 00:24本頁(yè)面
  

【正文】 177。 x 18( mm) 177。 177。 x 7( mm) 177。 177。 x 19( mm) 177。 177。** x 8( mm) 177。 177。 x 20( mm) 177。 177。* x 9( mm) 177。 177。* x 21( mm) 177。 177。 x 10( mm) 177。 177。 x 22( mm) 177。 177。 x 11( mm) 177。 177。 x 23( mm) 177。 177。 x 12( mm) 177。 177。 注:雌雄比較, *P< , ** P< 下頜骨各變量實(shí)測(cè)值 變量 公豬( n=17) 母豬( n=8) X1 ? ? X2 ? ?* X3 ? ?* X4 ? ? X5 ? ? X6 ? ? X7 ? ?* X8 ? ?* X9 ? ?* X10 ? ? X11 ? ? 注:雌雄比較, *P< 免疫學(xué)方法 1. 皮膚移植 該法是 純系動(dòng)物遺傳質(zhì)量控制 基本方法之一,簡(jiǎn)單方便,操作性好。 小鼠與人類在其相應(yīng)的染色體上有控制移植成活的一組基因位點(diǎn),組成了主要 組織相容性復(fù)合體( MHC) 或主要組織相容性系統(tǒng)( MHS),小鼠的 MHC稱為 H2復(fù)合體,位于第 17條染色體上,決定小鼠的主要組織相容性抗原(相當(dāng)于人的 HLA系統(tǒng))。 小鼠的主要組織相容性基因位點(diǎn)已知有 56個(gè),如 H H2…H 56。由于組織相容性是 共顯性 的,所以能單獨(dú)在雜合中表達(dá)。各組織相容性位點(diǎn)的抗原具有不同強(qiáng)度的抗原性。小鼠 H2位點(diǎn)是強(qiáng)抗原,引起對(duì)同種移植物產(chǎn)生強(qiáng)的排斥反應(yīng),使移植的皮膚約 11天內(nèi)被破壞。其余的 H位點(diǎn)都是弱抗原,又稱為 次要組織相容性抗原 ,這些位點(diǎn)對(duì)同種異體的移植物僅能導(dǎo)致延緩的排斥,這種排斥作用有的可長(zhǎng)達(dá)百天左右。 小鼠組織相容性位點(diǎn)的分布 免疫學(xué)方法 皮膚移植測(cè)試時(shí),每個(gè)品系抽取 至少 4只相同性別的成年動(dòng)物, 進(jìn)行同系異體皮膚移植。 移植全部成功者為合格, 發(fā)生非手術(shù)原因引起的移植物 的排斥判為不合格。 24h玻璃套管包扎 創(chuàng)可貼(部分脫落) A:自體移植 B:異體移植 C:異體移植 自體移植 異體移植 異體移植 A B C 1天 7天 14天 21天 注意: 放置皮片時(shí)要注意移植片的被毛與 受體被毛呈相反 方向。 皮片在第一周內(nèi)蒼白、干癟、脫落,則為技術(shù)失敗。對(duì)照自體移植,技術(shù)失敗率不得少于 10%。 皮片在第 2~ 3周內(nèi)發(fā)炎、水腫、壞死、結(jié)痂直至脫落,則為急性排斥。遺傳污染通常引起急性排斥。 皮片在第 3~ 9周內(nèi)逆毛逐漸脫落,直至無(wú)毛;或者因排斥留下凹陷疤痕,都為慢性排斥。遺傳突變通常引起慢性排斥。 皮片在 100d的觀察期內(nèi),始終有逆毛,則為永久接受的標(biāo)志。 GB149232023實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 哺乳類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳質(zhì)量控制 移植類型與移植物的命運(yùn) 名 稱 遺 傳 移植物命運(yùn) 基因型 個(gè)體 品種 自體移植 同 同 同 長(zhǎng)期存活 同基因型的移植 同 不同 同 長(zhǎng)期存活 同種異體移植 不同 不同 同 移植物于短期內(nèi)排斥 同種近交系 F1代移植 同 不同 同 長(zhǎng)期存活 親代與 F1代移植 不同 不同 同 F1→ 親代 — 排斥 親代 →F1— 存活 生化標(biāo)記法 生化標(biāo)記基因檢測(cè)法是 近交系動(dòng)物遺傳純度檢測(cè) 中的常規(guī)方法。 近交系小鼠選擇位于 10個(gè)染色體上的 14個(gè)生化位點(diǎn);近交系大鼠選擇 11個(gè)生化位點(diǎn);作為遺傳檢測(cè)的生化標(biāo)記。 常使用 醋酸纖維膜電泳 技術(shù)。 待檢測(cè)樣品(血清、腎勻漿等)點(diǎn)樣,進(jìn)行電泳,顯色。 分析得到的電泳譜圖,確定各待測(cè)位點(diǎn)的基因型,然后把這些基因型與各品系的標(biāo)準(zhǔn)遺傳概貌進(jìn)行對(duì)比,列出相同與不同的基因位點(diǎn),從而判斷被檢測(cè)品系的基因純合程度。 GB149232023實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 哺乳類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳質(zhì)量控制 GB149232023實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 哺乳類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳質(zhì)量控制 舉例:碳酸酐酶 2( Car2), 樣品:溶血素,蛋白染色法 待測(cè)動(dòng)物 1 待測(cè)動(dòng)物 2 待測(cè)動(dòng)物 3 C57BL/6 慢帶 a DBA/2 快帶 b 舉例:酯酶 1( Esterase1, Es1), 樣品:血清,酶顯色板法 待測(cè)動(dòng)物 1 待測(cè)動(dòng)物 2 待測(cè)動(dòng)物 3 CBA/N 慢帶 b C57BL/6 快帶 a 最近發(fā)展起來(lái)的技術(shù)還有染色體核型分帶技術(shù)、以聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)或限制性內(nèi)切酶為基礎(chǔ)的分子生物學(xué)研究方法、非核 DNA測(cè)試等。 1. 限制性酶切片斷多態(tài)性( Restriction fragment length polymorphysims,RFLPs) 技術(shù):當(dāng)動(dòng)物基因組 DNA被限制性內(nèi)切酶消化時(shí),酶能夠識(shí)別 DNA鏈上的特定核苷酸序列,并將其切斷,使 DNA裂解為片段。這些片斷的長(zhǎng)度在動(dòng)物群體存在變異,造成多態(tài)現(xiàn)象。 2. DNA指紋圖( DNA fingerprints,DFP): 是由 DNA指紋探針產(chǎn)生的、多個(gè) RFLP圖帶組成的、具有高度變異和個(gè)體專一性的,并能穩(wěn)定遺傳的限制性片斷長(zhǎng)度多態(tài)性圖譜。 DNA指紋圖具有多座位性、高度變異性和簡(jiǎn)單而穩(wěn)定的遺傳性三個(gè)特點(diǎn)。 分子生物學(xué)方法 3. 小衛(wèi)星 DNA標(biāo)記( minisatellite DNA markers) :由一組很小的重復(fù)單位( 10~ 60bp)頭尾相連而構(gòu)成的序列。每個(gè)重復(fù)單位均含有一個(gè)相同或相似的 10~ 15bp的核心序列。由于基因組中存在著上千個(gè)小衛(wèi)星座位,某些座位的重復(fù)單位含相同或相似的核心序列,所以在一定的條件下,一個(gè)小衛(wèi)星探針可以同時(shí)與多個(gè)小衛(wèi)星座位上的等位基因雜交,形成高度變異性和多態(tài)性。 4. 微衛(wèi)星 DNA標(biāo)記 (microsatellite DNA markers):基因組中 一組更小的重復(fù)單位( 2~ 6bp)頭尾相連而構(gòu)成的序列,亦稱簡(jiǎn)單片段重復(fù)( SSR)。利用微衛(wèi)星 DNA在不同品系間和物種間重復(fù)性的不同來(lái)研究群體間及個(gè)體間的多態(tài)性。微衛(wèi)星在真核細(xì)胞中廣泛存在,分布均勻,平均 6— 60kb就有 1個(gè)重復(fù)序列。微衛(wèi)星被用作基因作圖的標(biāo)記,在接近完成的小鼠遺傳圖中, 7377個(gè)遺傳標(biāo)記中有 6580個(gè)是微衛(wèi)星的遺傳標(biāo)記。 ? 微衛(wèi)星標(biāo)記法采用從小鼠基因組中 PCR擴(kuò)增出微衛(wèi)星側(cè)翼序列,進(jìn)行電泳以后對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析,從而判別小鼠遺傳是否發(fā)生改變。 舉例:微衛(wèi)星 DNA標(biāo)記法 ? GB 149232023實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 哺乳類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳質(zhì)量控制 ? GB149232023實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 哺乳類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳質(zhì)量控制 ( 2023年 12月 23日由中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局和中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)發(fā)布, 2023年 10月 1日正式實(shí)施) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 哺乳類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳質(zhì)量控制 1. 范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了哺乳類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳分類及命名原則、繁殖交配方法和近交系動(dòng)物的遺傳質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于哺乳類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳分類、命名、繁殖及近交系小鼠、大鼠的遺傳純度檢測(cè)。 近交系 封閉群 (遠(yuǎn)交群 ) 雜交群 3. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的繁殖方法: 由于近交系與封閉群動(dòng)物具有不同的遺傳特點(diǎn),因此應(yīng)分別選擇相應(yīng)的繁殖方法 封閉群動(dòng)物的繁殖方法 4. 近交系動(dòng)物的遺傳質(zhì)量監(jiān)測(cè) 近交系動(dòng)物的遺傳質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 近交系小鼠、大鼠遺傳檢測(cè)方法及實(shí)施:生化標(biāo)記基因檢測(cè)、皮膚移植法 毛色基因測(cè)試、免疫標(biāo)記基因檢測(cè)、下領(lǐng)骨測(cè)量法、染色體標(biāo)記檢測(cè)、 DNA多態(tài)性檢測(cè)法等 檢測(cè)時(shí)間間隔:近交 系 動(dòng) 物生產(chǎn)群每年至少進(jìn)行一次遺傳質(zhì)量檢測(cè)。 GB149232023新增加內(nèi)容: 增加了染色體置換系、核轉(zhuǎn)移系等特殊近交系的內(nèi)容,與國(guó)際上最新版本的權(quán)威文件一致。 增加了對(duì)遺傳修飾動(dòng)物說(shuō)明。 對(duì)封閉群動(dòng)物提出檢測(cè)要求。 補(bǔ)充了雜交群的繁殖方法。 對(duì)附錄進(jìn)行了修改。 1. 掌握實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按遺傳學(xué)控制分類方法。 2. 掌握近交系動(dòng)物、雜交 F1代動(dòng)物、封閉群動(dòng)物,突變系動(dòng)物的定義。 3. 了解各品種品系的動(dòng)物的命名方法(包括亞系和支系)。 4. 了解近交衰退及其原因。 5. 了解遺傳學(xué)監(jiān)測(cè)的主要方法。 ?本課小結(jié)(提問(wèn)或考試要點(diǎn)) 謝謝觀看 /歡迎下載 BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAITH
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