【正文】 大腸桿菌的這兩個(gè) tRNA編碼基因克隆在另一個(gè)高效表達(dá)的質(zhì)粒上。由此構(gòu)建的大腸桿菌雙質(zhì)粒系統(tǒng)有效地解除了受體細(xì)胞對(duì)外源基因高效表達(dá)的制約作用。170。例如，在人尿激酶原 cDNA的 412個(gè)密碼子中，共含有 22個(gè) 精氨酸密碼子 ，其中 7個(gè) AGG、 2個(gè) AGA， 而大腸桿菌受體細(xì)胞中 tRNAAGG和 tRNAAGA的豐度較低。（ 五 ）質(zhì)?？截悢?shù)1. 質(zhì)?？截悢?shù)對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)代謝的影響170。目前實(shí)驗(yàn)室里廣泛使用的表達(dá)型質(zhì)粒在每個(gè)大腸桿菌細(xì)胞中可達(dá)數(shù)百甚至上千個(gè)拷貝，質(zhì)粒的擴(kuò)增過(guò)程通常發(fā)生在受體細(xì)胞的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期內(nèi)，而此時(shí)正是細(xì)菌生理代謝最旺盛的階段。170。質(zhì)粒分子的過(guò)度增殖以及其后目的基因的高效表達(dá)勢(shì)必會(huì)影響受體細(xì)胞的生長(zhǎng)代謝，進(jìn)而導(dǎo)致重組質(zhì)粒的不穩(wěn)定性以及目的基因宏觀表達(dá)水平的下降。2. 質(zhì)粒擴(kuò)增時(shí)序的控制170。在 28℃ 時(shí)，每個(gè)細(xì)胞的質(zhì)?？截悢?shù)為 60oripCP3PL MCSApr170。在 42℃ 時(shí)，拷貝數(shù)迅速增至 300 600170。在此溫度下，受體細(xì)胞染色體上的 CI基因表達(dá)的溫度敏感型阻遏蛋白失活。因此，用一種手段同時(shí)控制質(zhì)粒拷貝數(shù)和基因的表達(dá)170。pCP3擁有一個(gè)溫度可誘導(dǎo)型的復(fù)制子第三節(jié) 用于基因轉(zhuǎn)移的受體菌或細(xì)胞受體細(xì)胞應(yīng)具備的條件各種基因工程受體的特性實(shí)驗(yàn)室常用的基因工程受體一、受體細(xì)胞應(yīng)具備的條件限制性缺陷型外切酶和內(nèi)切酶活性缺陷 (recB， recC， hsdR) 重組整合缺陷型用于基因擴(kuò)增或高效表達(dá)的受體細(xì)胞 (recA)具有較高的轉(zhuǎn)化效率具有與載體選擇標(biāo)記互補(bǔ)的表型感染寄生缺陷型防止重組細(xì)菌擴(kuò)散污染，生物武器除外 二、各種基因工程受體的特性170。遺傳背景清楚，載體受體系統(tǒng)完備，生長(zhǎng)迅速，培養(yǎng)簡(jiǎn)單，重組子穩(wěn)定 ；（一） 大腸桿菌170。編碼結(jié)構(gòu)復(fù)雜、種類繁多的內(nèi)毒素；170。適用于外源 DNA的擴(kuò)增和克隆、原核生物基因的高效表達(dá)、基因文庫(kù)的構(gòu)建，是 DNA重組實(shí)驗(yàn)和基因工程的主要受體菌。170。遺傳背景清楚，蛋白質(zhì)分泌機(jī)制健全 ，生長(zhǎng)迅速，培養(yǎng)簡(jiǎn)單，不編碼內(nèi)毒素；（二） 枯草桿菌170。遺傳欠穩(wěn)定，載體受體系統(tǒng)欠完備；170。適用于原核生物基因的克隆、表達(dá)以及重組蛋白多肽的有效分泌。170?？股氐闹饕a(chǎn)者，分子遺傳相對(duì)操作簡(jiǎn)便，不產(chǎn)內(nèi)毒素；（三） 鏈霉菌170。遺傳不穩(wěn)定，生長(zhǎng)相對(duì)緩慢；170。主要用于抗生素生產(chǎn)菌株的改良。170。具有真核生物的特征，遺傳背景清楚，生長(zhǎng)迅速，培養(yǎng)簡(jiǎn)單，外源基因表達(dá)系統(tǒng)完善，遺傳穩(wěn)定；（四） 酵母菌170。內(nèi)源性蛋白產(chǎn)物種類繁多且含量高 ；170。適用于外源 DNA的擴(kuò)增、克隆以及真核生物基因的高效表達(dá)、基因文庫(kù)的構(gòu)建、真核生物基因表達(dá)調(diào)控的研究，是 DNA重組實(shí)驗(yàn)和基因工程重要的真核性受體菌 。170。具有真核生物的特征，外源基因表達(dá)量高，繁殖相對(duì)較快，培養(yǎng)成本低廉，遺傳穩(wěn)定；（五） 昆蟲(chóng)細(xì)胞（家蠶）170。DNA重組操作系統(tǒng)欠完善；170。適用于真核生物基因的高效表達(dá)。170。與人的親緣關(guān)系近，分子重組表達(dá)系統(tǒng)健全，具有合適的糖基化修飾系統(tǒng)；（六） 哺乳動(dòng)物細(xì)胞 (中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞 CHO) 170。細(xì)胞培養(yǎng)條件苛刻，生長(zhǎng)緩慢；170。適用于哺乳類動(dòng)物和人的基因表達(dá)調(diào)控研究、基因藥物的生產(chǎn) ,是 DNA重組實(shí)驗(yàn)和基因工程的主要哺乳動(dòng)物受體。170。農(nóng)作物的經(jīng)濟(jì)意義重大，轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞易于分化，細(xì)胞培養(yǎng)簡(jiǎn)單且成本低廉，具有光合作用；（七） 植物細(xì)胞（擬南芥菜、煙 草 ） 170。遺傳操作繁瑣；170。適用于高等植物基因表達(dá)調(diào)控的研究、基因藥物的生產(chǎn)，農(nóng)作物品質(zhì)的改良。三、實(shí)驗(yàn)室常用的基因工程受體大腸桿菌170。用于接受質(zhì)粒： C600、 W31 HB10 JM8 JM101（ Aps、 Tcs、 Cms） 用于接受 λ DNA： LE39 ED8654；酵母菌170。畢赤酵母170。啤酒酵母哺乳動(dòng)物細(xì)胞 (CHO) 本節(jié)要點(diǎn)1. 概念2. 簡(jiǎn)答嚴(yán)緊型質(zhì)粒 接合型質(zhì)粒非接合型質(zhì)粒質(zhì)粒1) 質(zhì)粒的基本特性2) λDNA作為載體的優(yōu)點(diǎn)3) 考斯質(zhì)粒的特點(diǎn)4) 噬菌粒的特點(diǎn)質(zhì)粒的遷移作用松弛型質(zhì)粒α互補(bǔ) 質(zhì)粒的不相容性穿梭質(zhì)?？妓官|(zhì)粒噬菌粒167。 靜夜四無(wú)鄰，荒居舊業(yè)貧。 一月 21一月 21Thursday, January 28, 2023167。 雨中黃葉樹(shù)，燈下白頭人。 13:17:3813:17:3813:171/28/2023 1:17:38 PM167。 1以我獨(dú)沈久，愧君相見(jiàn)頻。 一月 2113:17:3813:17Jan2128Jan21167。 1故人江海別，幾度隔山川。 13:17:3813:17:3813:17Thursday, January 28, 2023167。 1乍見(jiàn)翻疑夢(mèng)，相悲各問(wèn)年。 一月 21一月 2113:17:3813:17:38January 28, 2023167。 1他鄉(xiāng)生白發(fā)，舊國(guó)見(jiàn)青山。 28 一月 20231:17:38 下午 13:17:38一月 21167。 1比不了得就不比，得不到的就不要。 。 一月 211:17 下午 一月 2113:17January 28, 2023167。 1行動(dòng)出成果，工作出財(cái)富。 2023/1/28 13:17:3813:17:3828 January 2023167。 1做前，能夠環(huán)視四周；做時(shí)，你只能或者最好沿著以腳為起點(diǎn)的射線向前。 1:17:38 下午 1:17 下午 13:17:38一月 21167。 沒(méi)有失敗，只有暫時(shí)停止成功！。 一月 21一月 21Thursday, January 28, 2023167。 很多事情努力了未必有結(jié)果，但是不努力卻什么改變也沒(méi)有。 13:17:3813:17:3813:171/28/2023 1:17:38 PM167。 1成功就是日復(fù)一日那一點(diǎn)點(diǎn)小小努力的積累。 一月 2113:17:3813:17Jan2128Jan21167。 1世間成事，不求其絕對(duì)圓滿，留一份不足，可得無(wú)限完美。 13:17:3813:17:3813:17Thursday, January 28, 2023167。 1不知香積寺，數(shù)里入云峰。 一月 21一月 2113:17:3813:17:38January 28, 2023167。 1意志堅(jiān)強(qiáng)的人能把世界放在手中像泥塊一樣任意揉捏。 28 一月 20231:17:38 下午 13:17:38一月 21167。 1楚塞三湘接，荊門(mén)九派通。 。 一月 211:17 下午 一月 2113:17January 28, 2023167。 1少年十五二十時(shí)，步行奪得胡馬騎。 2023/1/28 13:17:3813:17:3828 January 2023167。 1空山新雨后，天氣晚來(lái)秋。 1:17:38 下午 1:17 下午 13:17:38一月 21167。 楊柳散和風(fēng)，青山澹吾慮。 一月 21一月 21Thursday, January 28, 2023167。 閱讀一切好書(shū)如同和過(guò)去最杰出的人談話。 13:17:3813:17:3813:171/28/2023 1:17:38 PM167。 1越是沒(méi)有本領(lǐng)的就越加自命不凡。 一月 2113:17:3813:17Jan2128Jan21167。 1越是無(wú)能的人，越喜歡挑剔別人的錯(cuò)兒。 13:17:3813:17:3813:17Thursday, January 28, 2023167。 1知人者智，自知者明。勝人者有力，自勝者強(qiáng)。 一月 21一月 2113:17:3813:17:38January 28, 2023167。 1意志堅(jiān)強(qiáng)的人能把世界放在手中像泥塊一樣任意揉捏。 28 一月 20231:17:38 下午 13:17:38一月 21167。 1最具挑戰(zhàn)性的挑戰(zhàn)莫過(guò)于提升自我。 一月 211:17 下午 一月 2113:17January 28, 2023167。 1業(yè)余生活要有意義，不要越軌。 2023/1/28 13:17:3813:17:3828 January 2023167。 1一個(gè)人即使已登上頂峰，也仍要自強(qiáng)不息。 1:17:38 下午 1:17 下午 13:17:38一月 21MOMODA POWERPOINTLorem ipsum dolor sit amet, consectetur adipiscing elit. Fusce id urna blandit, eleifend nulla ac, fringilla purus. Nulla iaculis tempor felis ut cursus. 感謝您的下載觀看專 家告 訴