dna重組培訓講義-資料下載頁
2025-01-08 02:14本頁面
【正文】 酶， 轉座酶 和解離酶 復制轉座作用引起了轉座子的一個復制，它插入到一個接受位點。捐贈位點保持不變，以致捐贈者和接受者都有轉座子的一個復制 非復制轉座作用允許一個轉座子像物體一樣從捐贈們點移動到接受位點，這樣就在捐贈位點留下了一個斷裂。 保守的轉座作用描述了另一種非復制結果，因子在捐贈位點被切除，然后通過一連串的反應插入到一個靶位，這樣每一個核苷粘合都被保留。 復制轉座作用通過一個共合體進行 非復制轉座作用借助斷裂和重聚進行 TnA轉座作用： 復制型轉座需要轉座酶和分解酶 ? tnpA基因產物是一個轉座酶 ? TnpR基因的產物具有二重功能，蛋白擔任著基因抑制子表達和供應分解酶的功能。 ? TnpR抑制了所有 tnpA和自己的基因的轉錄。 共合體結構的解離部位稱為 res，即是解離酶的結合部位。位點 I是遺傳上作為res部位的區(qū)域，它的缺失將使解離反應完全不能進行。然而解離反應也與部位 II和 III有關。因為其中任何一個部位缺失，解離反應都變得很弱。 三、 轉座子轉座的特征 ? （ 1）轉座不依賴于靶序列的同源性 ? （ 2）轉座后靶序列重復 ? （ 3）轉座子的插入具有專一性 ? （ 4）轉座具有排他性 ? （ 5）轉座具有極性效應 ? （ 6）活化臨近的沉默基因 ? （ 7）區(qū)域性優(yōu)先 轉座頻率的調控 ? 對于細胞來說，控制轉座子調換的頻率是很重要的，轉座子必須能維持某一最小的移動頻率，因為太大的頻率會破壞宿主細胞，研究表明每一個轉座子都有控制它自身調換頻率的機制。 通過反義 RNA的翻譯水平控制 IS10R外側邊緣兩個啟動子 PIN弱啟動子 控制 IS10R的轉錄 POUT—強啟動子 右向轉錄宿主 DNA INRNA和 OUTRNA 有 36bp的重疊 穩(wěn)定性： OUTRNA??INRNA 大量 OUTRNA作為 INRNA的反義 RNA 四、轉座子的某些遺傳學效應 ? 1）引起插入突變 ? 2）插入位置上出現(xiàn)新的基因 ? 3）造成插入位置上出現(xiàn)靶 DNA的少數(shù)核苷酸對的重復 ? 4）轉座后原來位置上保持原有的轉座子 ? 5）引起染色體的畸變 ? 6）切除 五、 真核生物的轉座因子 ? （一）玉米的控制因子 ? AcDs系統(tǒng)是玉米轉座因子系統(tǒng)之一。 Ac屬于自主控制因子 ，或稱激活因子 。 ? Ds屬于非自主因子 ，又稱解離因子 。 ? Ac能自主轉座，并形成不穩(wěn)定的基因突變，但不使染色體斷裂；它能使 Ds因子活化、轉座，并通過 Ds控制結構基因的表達。 Ds由 Ac因子中間序列的缺失而形成，從而失去轉座酶功能。當 Ac因子存在時，能活化 Ds，使其在基因組內轉座或插入結構基因之內，導致基因失活或改變結構基因的表達水平，也可使染色體特定部位斷裂，引起缺失或重組。 （二）果蠅的轉座元件 ? 果蠅中存在著幾個轉座因子的家族。 P因子是黑腹果蠅的一種自主性轉座因子， P因子能誘發(fā)果蠅雜種的不育。雜種不育只發(fā)生在 P品系雄性與 M品系雌性果蠅之間。 P品系果蠅染色體攜帶P因子， M品系不含 P因子。當 P雄性與 M雌性果蠅雜交時，子代體細胞正常，生殖細胞則發(fā)育不全，因而無后代。 1 2 3 4 5 6 7 8 果蠅 P因子導致的 mRNA剪接異常 生殖細胞 體細胞 1 2 4 5 6 7 8 AAAA 1 2 4 5 6 3 AAAA 轉座酶 第四節(jié) 逆轉錄轉座子 ? 轉座過程中需要以 RNA為中間體，經過逆轉錄過程再分散到基因組中，稱為逆轉錄子（ retroposon）。 （ retrotransposon） ? 在很多高等生物的基因組中，也存在著與逆轉錄病毒基因組非常相似的逆轉錄轉座子，它們位于較長的正向重復或長末端重復 (long terminal repeat, LTR)區(qū)域內。 逆轉錄病毒基因組編碼逆轉錄酶和整合酶，逆轉錄酶在侵染細胞的細胞質中把 RNA轉換成線型雙鏈DNA。 線型 DNA進入細胞核 ,由整合酶催化整合作用 ,整合后的原病毒 DNA通過宿主系統(tǒng)產生病毒 RNA。 病毒 RNA，雙鏈 DNA， 整合進宿主 DNA 演講完畢，謝謝觀看！
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